生物显微技术 (2)精.ppt

第1页，本讲稿共13页一、实验目的与要求一、实验目的与要求1.了解各类组织的形态结构和细胞特征；2.初步掌握徒手切片技术；第2页，本讲稿共13页简单、省时、容易掌握，有一定局限性，但至今在生物学教简单、省时、容易掌握，有一定局限性，但至今在生物学教学中仍然是观察形态构造的一种基本切片方法学中仍然是观察形态构造的一种基本切片方法 。（1 1）材料和夹持物）材料和夹持物 （2 2）材料的持法）材料的持法 （3 3）持刀方法）持刀方法 （4 4）切片）切片 （5 5）取片）取片 （6 6）选片、装片）选片、装片 徒手切片法徒手切片法 第3页，本讲稿共13页二、实验材料与用品二、实验材料与用品实验材料：实验材料：水花生水花生芹菜芹菜泥蒿泥蒿苋菜苋菜夹竹桃夹竹桃女贞女贞美人蕉美人蕉第4页，本讲稿共13页实验用品：实验用品：二、实验材料与用品二、实验材料与用品第5页，本讲稿共13页切取的标本材料和夹持物材料和夹持物第6页，本讲稿共13页三、内容与方法三、内容与方法（一）选材（一）选材 一般选择正常、软硬适中的植物器官或组织为材料，所一般选择正常、软硬适中的植物器官或组织为材料，所取的新鲜材料应及时放入水中，以免徒手切片时萎蔫。材取的新鲜材料应及时放入水中，以免徒手切片时萎蔫。材料太硬时，可用料太硬时，可用1.5%的氢氟酸或用甘油和的氢氟酸或用甘油和70%酒精的等量混酒精的等量混合液进行软化处理；材料太软时，可用马铃薯块茎、胡萝卜肉合液进行软化处理；材料太软时，可用马铃薯块茎、胡萝卜肉根等作支持物，把材料夹在其中进行切片。对有些植物的叶片根等作支持物，把材料夹在其中进行切片。对有些植物的叶片可卷成筒状进行切片。取材的大小，一般直径不超过可卷成筒状进行切片。取材的大小，一般直径不超过5mm，长度以长度以15-25mm为宜。为宜。第7页，本讲稿共13页（二）切（二）切 片片 1.把欲切的材料削成大小适宜的段块，并将切面削平，然后将材料和刀片蘸把欲切的材料削成大小适宜的段块，并将切面削平，然后将材料和刀片蘸水湿润。水湿润。2.用左手的拇指、食指和中指夹住材料。为防止切片时割伤手指，应使材料用左手的拇指、食指和中指夹住材料。为防止切片时割伤手指，应使材料上端（切面）略高与食指，拇指略低于食指。用右手的拇指和食指捏住刀片一上端（切面）略高与食指，拇指略低于食指。用右手的拇指和食指捏住刀片一端，置于右手食指之上，刀片和材料切面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材端，置于右手食指之上，刀片和材料切面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置。料断面的位置。3.以均匀的力量和平稳的动作使刀刃自左前方向右后方斜滑拉切，注意不要直切，以均匀的力量和平稳的动作使刀刃自左前方向右后方斜滑拉切，注意不要直切，中途不停顿，拉切速度要快，不要推前拖后（拉锯式）切割，左手食指向下稍微移中途不停顿，拉切速度要快，不要推前拖后（拉锯式）切割，左手食指向下稍微移动，使材料略有上升，从而调动每张切片的厚度。切片过程中右手不动，只是右臂动，使材料略有上升，从而调动每张切片的厚度。切片过程中右手不动，只是右臂移动，动作用臂力而不用腕力。移动，动作用臂力而不用腕力。4.切片要薄、平而完整，将切下的切片用毛笔刷蘸水从刀片上轻轻移入培切片要薄、平而完整，将切下的切片用毛笔刷蘸水从刀片上轻轻移入培养皿的清水中或直接将刀片浸没于水中使切片漂洗下来养皿的清水中或直接将刀片浸没于水中使切片漂洗下来 第8页，本讲稿共13页112334第9页，本讲稿共13页临时装片技术：临时装片技术：首先将载玻片、盖玻片用纱布拭擦干净，拭擦玻片动作要轻，手指用力要首先将载玻片、盖玻片用纱布拭擦干净，拭擦玻片动作要轻，手指用力要均匀，否则易拭破。在载玻片中央，滴加一、二滴清水，然后用毛笔取培均匀，否则易拭破。在载玻片中央，滴加一、二滴清水，然后用毛笔取培养皿中切好的材料置于载玻片上，将盖玻片轻轻盖上，盖盖玻片时，用镊养皿中切好的材料置于载玻片上，将盖玻片轻轻盖上，盖盖玻片时，用镊子夹起盖玻片，使载玻片一边先放下，接触一边水，然后再轻轻放平，以子夹起盖玻片，使载玻片一边先放下，接触一边水，然后再轻轻放平，以免水中产生气泡，影响观察。如仍有气泡，可用镊子轻轻加压盖玻片，将免水中产生气泡，影响观察。如仍有气泡，可用镊子轻轻加压盖玻片，将气泡赶出。如水分过多，可用滤纸条将水吸干，如水分不足，可在盖玻片气泡赶出。如水分过多，可用滤纸条将水吸干，如水分不足，可在盖玻片边沿用滴管加水少许。使材料浸没水中，盖玻片紧贴载玻片，这样装片制边沿用滴管加水少许。使材料浸没水中，盖玻片紧贴载玻片，这样装片制成。成。第10页，本讲稿共13页第11页，本讲稿共13页第12页，本讲稿共13页显微镜观察显微镜观察图像采集与处理图像采集与处理植物结构的比较植物结构的比较徒手切片和临时装片制片练习徒手切片和临时装片制片练习实实验验过过程程选材和制片选材和制片实验报告实验报告第13页，本讲稿共13页