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第十九章第十九章 中药及其制剂分析概论中药及其制剂分析概论返回主目录返回主目录第一节第一节 概述概述第二节第二节 中药的鉴别中药的鉴别第三节第三节 中药的检查项目于内容中药的检查项目于内容第四节第四节 中药及制剂中成分的含量测定和质量整体控中药及制剂中成分的含量测定和质量整体控制制第五节第五节 中药的体内分析及代谢组学研究中药的体内分析及代谢组学研究精品课件 第一节第一节 概概 述述一、中药的特色与分析特点和对策一、中药的特色与分析特点和对策（一）中药及其制剂定义（一）中药及其制剂定义 1 1中药中药：以中医药学理论体系的术语表述其性：以中医药学理论体系的术语表述其性能、功效和使用规律，并且只有当按中医药学理论指能、功效和使用规律，并且只有当按中医药学理论指导其临床应用的传统药物，才可称之谓中药。导其临床应用的传统药物，才可称之谓中药。2 2中药制剂（中成药）中药制剂（中成药）：用中药为原料，按中：用中药为原料，按中医药学理论谴药、配伍和组方，以一定制备工艺和方医药学理论谴药、配伍和组方，以一定制备工艺和方法制成一定剂型的药物制剂。法制成一定剂型的药物制剂。精品课件（二）中药及其制剂的质量标准（二）中药及其制剂的质量标准 1 1现状：现状：ChP2010ChP2010已收载中药品种已收载中药品种21652165种，比种，比ChP2005ChP2005多了多了10191019种。中药及其制剂的质量控制主要包种。中药及其制剂的质量控制主要包括鉴别、检查和含量测定。括鉴别、检查和含量测定。2 2进展：如何确定中药制剂质量评价的指标是进展：如何确定中药制剂质量评价的指标是关关键问题键问题。只有在天然药物化学、药理学、药剂学、药物。只有在天然药物化学、药理学、药剂学、药物分析以及临床和基础医学等方面进行深入的研究，探明分析以及临床和基础医学等方面进行深入的研究，探明中药制剂的作用机理、主要成分及相互的作用关系后，中药制剂的作用机理、主要成分及相互的作用关系后，才能评价其质量的客观指标，制定出比较完善的质量标才能评价其质量的客观指标，制定出比较完善的质量标准。准。精品课件(三）中药制剂分析的特点三）中药制剂分析的特点 由于中药制剂的组成十分复杂，因此给分析测由于中药制剂的组成十分复杂，因此给分析测试带来一定困难，中药制剂分析的样品一般需要经试带来一定困难，中药制剂分析的样品一般需要经过提取、纯化等预处理过程，以排除干扰组分的干过提取、纯化等预处理过程，以排除干扰组分的干扰。但过于繁琐预处理不宜作为药品常规检验的方扰。但过于繁琐预处理不宜作为药品常规检验的方法。中药制剂中有效成分的含量一般较低，因此要法。中药制剂中有效成分的含量一般较低，因此要求方法有较高的灵敏度。求方法有较高的灵敏度。精品课件二、中药及其制剂的分类与质量分析要点二、中药及其制剂的分类与质量分析要点 1 1分类分类 中药材及其炮制品中药材及其炮制品 液体制剂液体制剂：合剂与口服液、酒剂和酊剂、：合剂与口服液、酒剂和酊剂、注射剂注射剂 半固体制剂半固体制剂：煎膏剂、浸膏剂和流浸膏剂：煎膏剂、浸膏剂和流浸膏剂 固体制剂固体制剂：丸剂、散剂、颗粒剂、片剂：丸剂、散剂、颗粒剂、片剂 胶囊剂胶囊剂精品课件 2 2质量分析质量分析要点要点注射剂注射剂：为了确保中药注射剂的质量稳定、可控，：为了确保中药注射剂的质量稳定、可控，中药注射剂在固体中药材品种、产地和采收期的前中药注射剂在固体中药材品种、产地和采收期的前提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂的的指纹图谱指纹图谱。HPLCHPLC 色谱指纹图谱色谱指纹图谱 GCGC 中药指纹图谱中药指纹图谱 光谱指纹图谱光谱指纹图谱 TLCTLC 脱氧核糖核酸指纹图谱。脱氧核糖核酸指纹图谱。精品课件三、中药分析用样品制备方法三、中药分析用样品制备方法 提取分离与纯化方法提取分离与纯化方法1 1萃取法萃取法 2 2冷浸法冷浸法3 3回流提取法回流提取法4 4连续回流提取法：使用索氏提取器连续进行提取，连续回流提取法：使用索氏提取器连续进行提取，提取效率高。提取效率高。5 5水蒸气蒸馏法：适用于挥发性组分的提取。组分对水蒸气蒸馏法：适用于挥发性组分的提取。组分对 热应稳定。热应稳定。精品课件6 6超声提取法：超声波具有助溶作用，提取较冷浸法超声提取法：超声波具有助溶作用，提取较冷浸法速度快，一般仅需数十分钟浸出即可达到平衡。由速度快，一般仅需数十分钟浸出即可达到平衡。由于超声提取过程中溶剂可能会有一定的损失，所以于超声提取过程中溶剂可能会有一定的损失，所以用作含量测定时，应于超声振荡前先称定重量，提用作含量测定时，应于超声振荡前先称定重量，提取完毕后，放冷至室温，再称重，并补足减失的重取完毕后，放冷至室温，再称重，并补足减失的重量，滤过后，取续滤液备用。用于药材粉末的提取量，滤过后，取续滤液备用。用于药材粉末的提取时，由于组分是由细胞内逐步扩散出来，速度较慢，时，由于组分是由细胞内逐步扩散出来，速度较慢，加溶剂后宜先放置一段时间，再超声振荡提取。加溶剂后宜先放置一段时间，再超声振荡提取。精品课件 7 7超临界流体萃取法超临界流体萃取法1 1）超临界流体：是指当压力和温度物质的临界点时，）超临界流体：是指当压力和温度物质的临界点时，所形成的单一相态。所形成的单一相态。常用的超临界流体常用的超临界流体 物质物质 临界温度临界温度 临界压力临界压力 优点优点 （）（KPaKPa）COCO2 2 31 7390 31 7390 较低的临界温度、惰性较低的临界温度、惰性 、无毒、纯净、价廉、无毒、纯净、价廉 N N2 2O 36 7290O 36 7290 NH NH3 3 132 11300 132 11300 精品课件2 2）超临界流体特点：）超临界流体特点：具有与液体相似的密度：具有与液体相似的较强的溶具有与液体相似的密度：具有与液体相似的较强的溶 解能力；解能力；溶质在其中扩散系数与气体相似：具有传质快，提取溶质在其中扩散系数与气体相似：具有传质快，提取 时间短的优点，提取完全一般仅需数十分钟；时间短的优点，提取完全一般仅需数十分钟；表面张力为零：很容易渗透到样品的里面，带走测定表面张力为零：很容易渗透到样品的里面，带走测定 组分；组分；选择性强：通过改变萃取的条件，如温度、压力等，选择性强：通过改变萃取的条件，如温度、压力等，可以选择性的萃取某些组分；可以选择性的萃取某些组分；在通常状态下即成为气体：萃取后溶剂立即变为气体在通常状态下即成为气体：萃取后溶剂立即变为气体 而逸出，容易达到浓集的目的。而逸出，容易达到浓集的目的。精品课件装置装置精品课件v影响因素：压力、温度、改性剂、提取时间影响因素：压力、温度、改性剂、提取时间 温度：恒压下温度升高，可提高萃取效率温度：恒压下温度升高，可提高萃取效率 压力：恒温下提高压力，有利于极性组分和高压力：恒温下提高压力，有利于极性组分和高分分 子量组分的提取；压力降低，有利子量组分的提取；压力降低，有利于非极于非极 性组分的提取。性组分的提取。改性剂：甲醇、氯仿改性剂：甲醇、氯仿精品课件第二节第二节 中药的鉴别中药的鉴别鉴别试验的重要性：中药及其制剂的鉴别可以通鉴别试验的重要性：中药及其制剂的鉴别可以通过确认其中所含药味的存在或某些特征成分的检过确认其中所含药味的存在或某些特征成分的检出而达到鉴别的目的。目前部分中药尚无含量测出而达到鉴别的目的。目前部分中药尚无含量测定项目，因此，鉴别就成为中药制剂质量控制的定项目，因此，鉴别就成为中药制剂质量控制的一个非常重要的环节。一个非常重要的环节。精品课件性状鉴别：性状鉴别：形状、大小、色泽、表面特征、质地、折断形状、大小、色泽、表面特征、质地、折断面特征以及气味面特征以及气味显微鉴别显微鉴别：指用显微镜对药材切片、粉末、解离组织指用显微镜对药材切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。或内含物等特征进行鉴别的一种方法。鉴别方法鉴别方法 精品课件 光学显微镜或电子显微镜鉴别：光学显微镜或电子显微镜鉴别：该法通常在下列情况中应用：药材及炮制品的外形鉴该法通常在下列情况中应用：药材及炮制品的外形鉴别特征不明显或外形相似难于鉴别而组织构造不同时；别特征不明显或外形相似难于鉴别而组织构造不同时；药材破碎或呈粉末不易用肉眼辨认或区分时；含原药材药材破碎或呈粉末不易用肉眼辨认或区分时；含原药材粉末的中药制剂；处方中主要药味及化学成分不清楚或粉末的中药制剂；处方中主要药味及化学成分不清楚或尚无化学鉴别法。尚无化学鉴别法。注：注：处方中多味药物共同具有的显微特征不能作为鉴处方中多味药物共同具有的显微特征不能作为鉴 别特征。别特征。多来源药材应选择其共有的显微特征。多来源药材应选择其共有的显微特征。精品课件v显微化学反应鉴别法：显微化学反应鉴别法：一般可取药材切片或粉末，中成药取粉末，置载玻一般可取药材切片或粉末，中成药取粉末，置载玻片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观片上，滴加各种试剂，加盖玻片，在显微镜下观察产生的结晶、沉淀物，以及特殊的颜色变化，察产生的结晶、沉淀物，以及特殊的颜色变化，作为鉴别特征。该法可以确定基础品种中特殊化作为鉴别特征。该法可以确定基础品种中特殊化学成分的存在及在组织中的分布。学成分的存在及在组织中的分布。精品课件v例：例：黄连：纤维素鲜黄色黄连：纤维素鲜黄色 左金丸左金丸 均含石细胞：不能采用均含石细胞：不能采用 吴茱萸：腺毛吴茱萸：腺毛例：黄连粉末例：黄连粉末+水水+稀盐酸稀盐酸 黄色结晶黄色结晶 槟榔粉末槟榔粉末+水水+稀盐酸稀盐酸 滤液+碘化铋钾浑浊显微观察：红石榴球形或方形结晶振摇微热过滤载玻片上精品课件 理化法鉴别：微量升华法理化法鉴别：微量升华法 荧光与光谱鉴别法荧光与光谱鉴别法 颜色反应及沉淀反应颜色反应及沉淀反应 鉴色谱鉴别：纸色谱法鉴色谱鉴别：纸色谱法 毛细管分析法毛细管分析法 TLCTLC、GCGC、HPLCHPLC18精品课件vTLCTLC法法薄层板：最多的是硅胶薄层板：最多的是硅胶G G板，也可另加板，也可另加0.2%0.2%0.5%0.5%的的CMCCMC作为黏合剂，可用软铝笔在板上做标记；能经受一作为黏合剂，可用软铝笔在板上做标记；能经受一般的化学试剂处理，如用含浓硫酸的显色剂处理后，般的化学试剂处理，如用含浓硫酸的显色剂处理后，可将酸在水中洗去，然后烘干保存。可将酸在水中洗去，然后烘干保存。一般通用的展开剂：无水乙醇一般通用的展开剂：无水乙醇-苯（苯（1 1：4 4）苯苯-氯仿（氯仿（1 1：3 3）丙酮丙酮-甲醇（甲醇（1 1：1 1）显色方法：紫外灯下观察荧光斑点显色方法：紫外灯下观察荧光斑点 选用显色剂选用显色剂精品课件v供试品溶液的制备：供试品溶液的制备：一份：一份：+盐酸至盐酸至pH3pH3样品样品 粉末粉末 滤液滤液 +乙醚乙醚 一份：一份：+碳酸钠至碳酸钠至pH11pH11提取液残渣+乙醇供试品溶液粉碎水煮沸过滤回收乙醚溶解精品课件一、杂质检查一、杂质检查杂质检查项目：水分、灰分、酸不溶性灰分、杂质检查项目：水分、灰分、酸不溶性灰分、砷盐、重金属、农药残留量、浸出物、挥发油、砷盐、重金属、农药残留量、浸出物、挥发油、总氮测定等。总氮测定等。二水分检查法二水分检查法 中国药典（中国药典（20102010年版一部）附录收载以下四种年版一部）附录收载以下四种方法：方法：烘干法烘干法 甲苯法甲苯法 （69.369.3共沸）共沸）减压干燥法减压干燥法 GCGC法。法。第三节第三节 中药的检查项目与内容中药的检查项目与内容精品课件v三总灰分和酸不溶性灰分测定法三总灰分和酸不溶性灰分测定法总灰分总灰分：是指药材或制剂经加热炽灼灰化遗留的无机物，包括：是指药材或制剂经加热炽灼灰化遗留的无机物，包括药物本身所含无机盐（称为生理灰分）、泥土、砂石等药材外药物本身所含无机盐（称为生理灰分）、泥土、砂石等药材外表黏附的无机杂质。表黏附的无机杂质。酸不溶性灰分酸不溶性灰分：主要是外来杂质，如泥土、砂石：主要是外来杂质，如泥土、砂石总灰分总灰分+稀盐酸稀盐酸 残渣滤纸残渣：外来杂质水浴过滤水洗滤纸炽灼恒重碳酸盐生理灰分溶解，而泥砂（硅酸盐）不溶精品课件四重金属及有害元素测定方法四重金属及有害元素测定方法 与化学合成药物不同的是，检查前必须对样品进与化学合成药物不同的是，检查前必须对样品进行有机破坏，破坏方法有行有机破坏，破坏方法有干法干法和和湿法湿法两种。两种。重金属检查方法：二硫腙比色法重金属检查方法：二硫腙比色法 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法砷盐检查方法：古蔡法砷盐检查方法：古蔡法 Ag-DDCAg-DDC法法 原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法精品课件五农药残留量测定方法五农药残留量测定方法 农药的来源农药的来源 常用的农药：有机氯类：艾氏剂、氯丹、六六六等常用的农药：有机氯类：艾氏剂、氯丹、六六六等 有机磷类：三硫磷、氯硫磷、蝇毒磷等有机磷类：三硫磷、氯硫磷、蝇毒磷等 检查原则：农药不明的样品测定总氯量、总磷量，检查原则：农药不明的样品测定总氯量、总磷量，已知农药的样品可采用已知农药的样品可采用GCGC法测定某个农药法测定某个农药 的量。的量。总氯量的测定总氯量的测定 样品细粉样品细粉+乙腈乙腈-水水 滤液滤液+石油醚石油醚 萃取液萃取液 （65:3565:35）搅拌过滤萃取浓缩氧瓶燃烧吸收液：硫氰酸铵比色法精品课件GCGC测定测定取样取样 萃取农药萃取农药 柱纯化柱纯化 GCGC测定测定 测定有机氯时，使用电子捕获检测器（测定有机氯时，使用电子捕获检测器（ECDECD）；）；测定有机磷时，使用火焰光度检测器（测定有机磷时，使用火焰光度检测器（FPDFPD）。）。上法得的石上法得的石油醚萃取液油醚萃取液总磷量的测定总磷量的测定洗脱液洗脱液吸收液：磷吸收液：磷钼酸比色法钼酸比色法柱层析浓缩 氧瓶燃烧精品课件第四节第四节 中药制剂中成分的含量中药制剂中成分的含量测定和质量整体控制测定和质量整体控制一、中药及制剂中化学成分的含量测定一、中药及制剂中化学成分的含量测定（一）指标成分选择的原则（一）指标成分选择的原则1.1.复方制剂应首选君药及贵重药，所含化学药品必须测定复方制剂应首选君药及贵重药，所含化学药品必须测定2.2.有毒药物必须测定有毒药物必须测定3.3.应选择专属性强的有效成分测定应选择专属性强的有效成分测定26精品课件4 4、测定成分尽量与中医理论、用药功能接近、测定成分尽量与中医理论、用药功能接近5 5、测定成分需要考虑与生产工艺的关系、测定成分需要考虑与生产工艺的关系6 6、测定成分应归属于某单一药味、测定成分应归属于某单一药味7 7、若确实无法进行含量测定的。可测定药物的总固体量、若确实无法进行含量测定的。可测定药物的总固体量27精品课件（二）中药及其制剂化学成分含量测定的主要方法（二）中药及其制剂化学成分含量测定的主要方法1.1.高效液相色谱法高效液相色谱法2.2.气相色谱法气相色谱法3.3.薄层色谱扫描法：薄层色谱扫描法：指用一定波长的光照射在薄层板指用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中吸收紫外光和可见光的斑点，或上，对薄层色谱中吸收紫外光和可见光的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描，将扫描得经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及积分数据用于鉴别、检查或含量测定的到的图谱及积分数据用于鉴别、检查或含量测定的一种方法。一种方法。28精品课件1 1）对色谱条件的要求：选择性好，组分能完）对色谱条件的要求：选择性好，组分能完全分离，斑点对称、均匀、不拖尾。全分离，斑点对称、均匀、不拖尾。2)2)测量方法：多使用测量方法：多使用反射法反射法。29精品课件v3 3）扫描方式：）扫描方式：单波长单波长 双波长双波长 测定波长测定波长选在被选在被 测组分的最大吸测组分的最大吸 收波长，收波长，参比波长参比波长选在组选在组 分无吸收的位置分无吸收的位置 上，若背景有均上，若背景有均 匀污染时，可选匀污染时，可选 择背景光谱中与择背景光谱中与 测定波长的等吸测定波长的等吸 收处。收处。精品课件4 4）散射参数散射参数SXSX：由于薄层板对由于薄层板对光的散射，其吸收度和浓度光的散射，其吸收度和浓度之间的关系不服从比尔定律，之间的关系不服从比尔定律，二者不呈直线，但符合二者不呈直线，但符合K-MK-M方程，可以进行校正，使其方程，可以进行校正，使其成为直线。薄层扫描仪均装成为直线。薄层扫描仪均装有线性化器，测定时需输入有线性化器，测定时需输入SXSX值，因为吸收度值，因为吸收度-浓度曲浓度曲线的形状与线的形状与SXSX值有关。值有关。精品课件 5 5）定量方法：）定量方法：外标法外标法 若曲线经过原点，可用一点法校正；若若曲线经过原点，可用一点法校正；若曲线不经过原点，用二点法校正；必要时，可采曲线不经过原点，用二点法校正；必要时，可采用多点法校正。用多点法校正。内标法内标法 将内标加入供试液中，以组分与内标峰将内标加入供试液中，以组分与内标峰面积比值作为定量依据。面积比值作为定量依据。精品课件（三）中药及其制剂的多指标成分含量测定（三）中药及其制剂的多指标成分含量测定中药及其制剂中含有众多成分，仅以单一成分作为质中药及其制剂中含有众多成分，仅以单一成分作为质量控制的指标不能全面地反映药材质量，更不能保证量控制的指标不能全面地反映药材质量，更不能保证药效，为了力求客观全面反映中药及其制剂的质量需药效，为了力求客观全面反映中药及其制剂的质量需要选择多指标成份进行含量测定。要选择多指标成份进行含量测定。33精品课件（四）中药一测多评的含量测定（四）中药一测多评的含量测定一测多评法：仅测定一测多评法：仅测定1 1个对照品目标成分，通过计个对照品目标成分，通过计算的出其他待测有效成分的含量的方法算的出其他待测有效成分的含量的方法34精品课件二、中药及其制剂质量的整体控制和中药指纹图谱二、中药及其制剂质量的整体控制和中药指纹图谱中药指纹谱图的含义：指药材、饮片、提取物或中中药指纹谱图的含义：指药材、饮片、提取物或中药制剂等经适当处理后，采用一定分析技术和方法药制剂等经适当处理后，采用一定分析技术和方法得到能够标示其化学的、生物学的或其他特性的图得到能够标示其化学的、生物学的或其他特性的图谱。谱。基本属性基本属性:整体性和模糊性。整体性和模糊性。35精品课件研究意义：不仅能用于定性鉴别，也可用于定量分研究意义：不仅能用于定性鉴别，也可用于定量分析析类别及特点：类别及特点：1 1、按测定手段分类：化学指纹谱图和生物指纹谱、按测定手段分类：化学指纹谱图和生物指纹谱图图2 2、按对象分类：中药材指纹谱图、中药原料指纹、按对象分类：中药材指纹谱图、中药原料指纹谱图、生产工艺过程中间产物指纹谱图、中药制剂谱图、生产工艺过程中间产物指纹谱图、中药制剂指纹谱图等。指纹谱图等。36精品课件