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基因工程突破点(一)基因工程的操作工具完成情况 基础回顾基础回顾0 01 1完成情况典题领悟典题领悟02解析解析解析解析完成情况归纳拓展归纳拓展03形成单链形成单链DNA新的新的DNA分子分子形成重组形成重组DNA分子分子黏性末端黏性末端或平末端或平末端形成形成产物产物碱基对碱基对间的氢键间的氢键磷酸磷酸二酯键二酯键磷酸磷酸二酯键二酯键磷酸磷酸二酯键二酯键作用作用部位部位DNA分子分子脱氧脱氧核苷酸核苷酸DNA分子片段分子片段DNA分子分子作用作用底物底物解旋酶解旋酶DNA聚合酶聚合酶DNA连接酶连接酶限制酶限制酶比较比较项目项目完成情况过关训练过关训练04解析解析解析解析0202突破点(二)基因工程的基本操作程序完成情况 基础回顾基础回顾0 01 1目的基因目的基因能够控制特定性状能够控制特定性状启动子启动子_识别和结合的部位，驱动基因转录识别和结合的部位，驱动基因转录终止子终止子RNA聚合酶脱离部位，终止聚合酶脱离部位，终止转录转录标记基因标记基因鉴别受体细胞中是否含有鉴别受体细胞中是否含有目的基因目的基因RNA聚合酶聚合酶受体细胞类型受体细胞类型方法方法植物细胞植物细胞_、基因枪法、花粉管通道法、基因枪法、花粉管通道法动物细胞动物细胞_(注射到受精卵内注射到受精卵内)微生物细胞微生物细胞感受态细胞法感受态细胞法(Ca2处理法处理法)农杆菌转化法农杆菌转化法显微注射法显微注射法完成情况典题领悟典题领悟02解析解析完成情况归纳拓展归纳拓展03选择依据选择依据内容内容根据目的根据目的基因两端基因两端的限制酶的限制酶切割位点切割位点确定限制确定限制酶的种类酶的种类应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，不能应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶，如图甲可选择切割位点位于目的基因内部的限制酶，如图甲可选择选择Pst，不能选择，不能选择Sma；为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用可选择用Pst和和EcoR两种限制酶两种限制酶(但要确保质粒上也但要确保质粒上也有这两种酶的切割位点有这两种酶的切割位点)选择依据选择依据内容内容根根据据质质粒粒的的特特点点确确定定限限制制酶酶的种类的种类切切割割质质粒粒和和目目的的基基因因的的限限制制酶酶一一致致，以以确确保保产产生生相相同的黏性末端；同的黏性末端；质质粒粒上上有有标标记记基基因因等等，所所选选限限制制酶酶尽尽量量不不要要破破坏坏这这些结构。如图乙中选些结构。如图乙中选Sma会破坏标记基因；会破坏标记基因；如如果果所所选选限限制制酶酶的的切切割割位位点点不不只只一一个个，则则切切割割重重组组后后可可能能丢丢失失某某些些片片段段，若若丢丢失失的的片片段段含含复复制制起起点点区区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制完成情况过关训练过关训练04解析解析解析解析解析解析03突破点(三)蛋白质工程完成情况 基础回顾基础回顾0 01 1解析解析完成情况典题领悟典题领悟02完成情况归纳拓展归纳拓展03基因工程基因工程蛋白质工程蛋白质工程蛋蛋白白质质工工程程是是在在基基因因工工程程基基础础上上延延伸伸出出来来的的第第二二代基因工程代基因工程基基因因工工程程中中所所利利用用的的某某些些酶酶需需要要通通过过蛋蛋白白质质工工程程进行修饰、改造进行修饰、改造联联系系只能生产自然界已有的只能生产自然界已有的蛋白质蛋白质可生产自然界没有的蛋白可生产自然界没有的蛋白质质结果结果定向改造生物的遗传特定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的性，以获得人类所需的类型或生物产品类型或生物产品定向改造或生产人类所需定向改造或生产人类所需的蛋白质的蛋白质实质实质获取目的基因获取目的基因构建基构建基因表达载体因表达载体将目的基将目的基因导入受体细胞因导入受体细胞目的目的基因的检测与鉴定基因的检测与鉴定预期蛋白质功能预期蛋白质功能设计预设计预期的蛋白质结构期的蛋白质结构推测应推测应有的氨基酸序列有的氨基酸序列找到相找到相对应的脱氧核苷酸序列对应的脱氧核苷酸序列过程过程区区别别完成情况过关训练过关训练04解析解析解析解析Part04课堂小结 握主干KETANG XIAOJIE WOZHUGAN