酶标仪软件操作步骤.pdf
.酶标仪软件操作步骤 一、软件运行前的连接 酶标仪插上电源，和电脑连接好后，打开电脑和酶标仪开关，酶标仪至少稳定 15min 后开始读数，效果比较好。注意，当酶标仪处于 power on 的状态时，不要手动打开酶标板室和比色皿室的门，以免紫外辐射的伤害或者仪器的损伤。二、软件的运行 1.打开桌面快捷方式 SkanIt RE for MSS 2.4.2 运行软件，出现 Log on To SkanIt software 的界面。2.use name 默认为“admin”,password 为空 3.点 OK 进入 SkanIt software 2.4.2 界面，New session-新建任务程序，Open session-打开已有程序。4.在界面上方的 setting 中选择 Instrument，出现 Instrument setting 的界面，在 Instrument 中选中 Multiskan spectrum on COM,Themo Electron。点击右侧的setup，在 serial number 中输入 1500-850，然后点击 OK。再点击 Default instrument右边的 connect，即可设定好连接。然后点击 close 关闭窗口。三New session 操作 1新建任务程序：点击 new session 进入 protocol options 界面，在 session name 中输入新的程序名称 点击 next 进入 plate layout options 界面，在 select plate template 中选择所需模板类型（一般 96 孔板选择 use default，比色皿选择 cuvette，其他的可以选择相应的类型）输入 plate layout name(系统默认的与 session name 相同)点击 next 进入 Definition done 界面，在 select location 中选择任务程序所要保存的目的文件夹（该界面可进行新建，重命名及删除文件夹操作）点击 finish 完成新建，进入 SkanIt software 2.4.2 程序操作主界面（主要有三大块：platelayout 用于模板区域选择，protocol 用于程序编辑，results 用于数据处理）。2.plate layout 对模板区域进行选取 .点击 wizard 进入选取模板区域操作界面 fill wizard（任务类型 type 有：blank 空白，calibrator 标准蛋白，control 对照，empty 空白，unkown 一般为样品）。在右边模板中选取开始点位置，即红圆点所在位置。选取方向，在 Filling order 中可通过箭头设定。对于 blank，在 No.of replicates 中填写好重复数，选择好开始位点和方向，点击 Add 可完成。对于 calibrator，在 No.of calibrators 中填写标准蛋白的个数，在 No.of replicates 中填写好重复数，选择好开始位点和方向。如有浓度梯度，可选择Generate series 进行设置。例如，取 7 个浓度蛋白做标准曲线，稀释倍数分别为 20，40，80，160，320，640，1320，每个浓度重复两次，则在 No.of calibrators 中填写 7，在 No.of replicates中填写 2，选择好开始位点和方向。然后选中 Generate series，出现 conventions的界面，在 Initial value 中填写 20，在 operators 中选择 Multiply，step by 中填写2，点击 ok。对于 control，操作基本和 calibrators 相似。对于 Empty 操作基本和 blank 相似。对于 unknown，填写好 No.of replicates，No.of unknowns 并选择好开始位点和方向，点击 Add 即可完成。第一块板填满后，有时会自动进入第二块板的编辑，注意看 Fill wizard 的模板下方的 current plate，如果显示为 2/2,则可以直接关掉窗口，模板区域即可编好。标注：对于单一型任务可先选取全模板【即在No.of unkown 选项中设为模板最大孔数】，然后对不要的区域进行删除。对于非 blank 和 empty 型任务，若有浓度差，可勾选 generate series,然后进行设定：series 为有规则的浓度差，multiple values 为不规则的浓度差。有规则的可通过运算公式，系统直接算出，无规则的通过键盘输入，点击 add 进行添加。3.编辑程序 选好所用模板区域后，点击protocol 进入程序编辑界面。在 protocol properties 所属框内的 execution order 选项中选中数据读取路径 .（共有四种，第一种一般为常用路径，一次读四个孔）。在 Settle delay 选项中设定读数时间间隔。一般比色皿不需要读书时间间隔，设置为零即可，对于测量板而言，由于板在移动过程中液体表面共振波的影响，需要稳定一段时间，一般设置为 5s in a 6-well plate，300ms in a 96-well plate，20ms in a 384-well plate。在 steps 所属框内空白处或选中程序单击鼠标右键得到应用程序子菜单。在 子 菜 单 中 选 取 你 所 要 运 行 的 程 序（如 常 用 的 程 序 有photometric,photometric-scanning,Incubate和 shake 等），并在该程序的选项中设定你所需的参数。一般测蛋白含量选择 photometric，在 wavelength 中设置好波长即可。所有程序编写好后，在 session 中点击 save 保存好模板程序，不保存将无法运行上面所设的模板程序。4测读数据 在 Execution 所属框内点击 connect 链接机器，链接过程中会出现机器状态列表窗口，无异常后点 Close 关闭。在 Execution 所属框内点击 run plate out 弹出酶标板载板，把酶标板底部擦干后放上去后，确保平稳后点击 run plate in，等酶标板进去。在 Execution 所属框内点击 Execute session 按钮运行所设程序，弹出 Run name 窗口，点击 Ok 确认运行。接着会出现读数窗口，不要关闭读数窗口，读数完毕后窗口会自动消失，并弹出酶标板载板。注：以前，无法进行人工读板，这是因为机器序列号的设置不对，要仔细查看机器上的机器序列号，将正确的序列号填入操作软件中的设置中。5数据分析及保存 仪器读数完毕后，系统自动进入 Results 操作界面，在 Result 界面所属框中，可对所得数据进行分析。在 Result 所属框中，单击要分析数据的程序，如测蛋白一般选择的photometric，点鼠标右键得到数据分析方法主菜单。选择要分析的方法，测蛋白选择Quantitative Curve Fit，出现 Parameters，Graph，Table，List 可以点击查看结果。.如果需要标准曲线，则在 Graph 的曲线图中单击右键选择 Toolbar，图标上方会出现一系列图标，点击 Copy to clipboard选择 As a Bitmap，将其粘贴在新建 word 文档中并保存。点击 Result 左侧图标框中选择 Export，在 Parameters 中的 select items to report中选择要保存的内容，一般选择layout，Photometric，Quantitative Curve Fit，然后点击 Add，在；右边的 Report items 中出现所选择的内容。在 After execution 中选中 Save to file，通过右下方的 Browse 选择要保存的文件。注意此次操作可能没有保存到目的文件夹。必须进行以下步骤。点击上方的 Report 可看见结果，点击 Save 选择所要保存到的目的文件夹。并检查是否所有要保存的数据都已经保存到相应文件夹中。四、Open session操作 若要运行或查看已有的程序，在登录界面点击Open session,打开程序所在文件夹，单击所要运行或查看的程序（提示：在该界面中，点 NewFolder 可新建文件夹,Rename 可对已有文件夹重命名，delete 可对程序及文件夹进行删除），点Open 打开。然后可进行所需操作。五、仪器的断开与关闭 在读数完成后若要关闭仪器，应先在 Execution 所属框内点击 Run plate in，待酶标板载板进去后，点击 disconnect 断开仪器，然后再关闭仪器开关，盖好外罩。
