细胞模型精选课件.ppt

关于细胞模型第一页，本课件共有19页口服给药是最重要的给药方式之一，药物在肠道内的吸收速度及程度是影响药物生物利用度的重要因素。胃肠道上皮细胞是药物口服吸收的必经之路。药物的肠道吸收研究可以提供吸收机制、吸收部位及影响吸收的因素等重要信息，为药物的研发提供参考。第二页，本课件共有19页目前研究口服药物吸收的方法主要有体内法、在体法和体外法3种：体内法能够真实反映药物的总体吸收情况，但难以从细胞和分子水平研究药物的吸收机制;在体法保证了肠道神经和血管的完整性，常用于研究药物的渗透和吸收动力学;体外法简便易行，试验条件容易控制，主要用于研究药物的吸收机制。细胞模型是体外法评价药物吸收的重要手段，最常用的是Caco-2细胞模型。第三页，本课件共有19页1、产生2、特点3、机制4、优点5、不足6、作用第四页，本课件共有19页 Caco-2Caco-2细细胞胞模模型型(human(human colon colon adenocarcinoma adenocarcinoma cell cell line line)最最早早是是由由美美国国堪堪萨萨斯斯大大学学药药学学院院Ronald Ronald T.T.Borchardt Borchardt 博博士士的的实实验验室室以以及及英英国国的的Ciba-GeigyCiba-Geigy实实验验室室在在二二十十世世纪纪八八十十年年代代后后期期建建立立的的。是是第第一一个个被被国国外外制制药药企企业业以以及及实实验验室室广广泛泛应应用用的的肠肠道道吸吸收收的的细细胞胞模模型型。也也是是迄迄今今为为止止的的最最好好的的肠肠道道转转运运模模型型和和上上皮皮转转运模型运模型。第五页，本课件共有19页 Caco-2Caco-2细细胞胞系系来来源源于于人人的的直直肠肠癌癌，其其结结构构和和生生化化作作用用类类似似于于人人小小肠肠上上皮皮细细胞胞，含含有有与与小小肠肠刷刷状状缘缘上上皮皮相相关关的的酶酶系系，与与正正常常的的成成熟熟小小肠肠上上皮皮细细胞胞在在体体外外培培育育过过程程中中出出现现逆逆向向分分化化(反反分分化化)不不同同，Caco-2Caco-2细细胞胞在在传传统统的的细细胞胞培培养养条条件件下下，生生长长在在多多孔孔的的可可渗渗透透的的聚聚碳碳酸酸酯酯膜膜上上可可达达到到融融合合并并自自发发分分化化为为肠肠上上皮皮细细胞胞，形形成成连连续续的单层的单层(monolayer)(monolayer)。第六页，本课件共有19页培育约3星期后，其电阻值达到400（有的要求达到600），它们形成致密的细胞单层，结构和生化作用类似于小肠上皮细胞，3-5天内适合进行转运试验。第七页，本课件共有19页AP Side(Lumen)BL Side(Serosal)Apical to Basolateral Transport:Absorptive TransportA to B Basolateral to Apical Transport:Secretory TransportB to A Efflux to both sidesCaco-2 Cell Culture ModelCaco-2 Cell Culture Model第八页，本课件共有19页第九页，本课件共有19页Caco-2Caco-2细细胞胞虽虽然然是是来来源源于于人人的的结结肠肠癌癌细细胞胞，但但在在很很多多方方面面，其其功功能能与与人人小小肠肠上上皮皮细细胞胞是是相相似似的的，同同源源性性好好，不不会会产产生生上上皮皮细细胞胞形形态态学学和和生生理理学学性性质质上上的的种种属差异；属差异；与与动动物物实实验验相相比比，Caco-2Caco-2细细胞胞生生命命力力强强，培培养养方方法法简简单，相对要比动物实验更单，相对要比动物实验更省时、经济省时、经济；Caco-2Caco-2细胞模型的优点细胞模型的优点细胞模型的优点细胞模型的优点第十页，本课件共有19页Caco-2Caco-2细细胞胞模模型型可可同同时时对对大大批批量量药药物物进进行行快快速速筛筛选选，所需所需药物量少药物量少，仅需要数毫克即可；，仅需要数毫克即可；培培养养成成熟熟的的Caco-2Caco-2细细胞胞是是致致密密的的单单层层细细胞胞，具具有有与与正正常常的的小小肠肠上上皮皮细细胞胞相相同同的的极极性性，可可以以从从不不同同方方向向进进行摄取和转运实验，可用于区分肠腔内吸收的差别；行摄取和转运实验，可用于区分肠腔内吸收的差别；第十一页，本课件共有19页 但但是是，Caco-2Caco-2细细胞胞与与人人小小肠肠上上皮皮也也有有一一定定差差异异，在研究药物转运中表现出一定的局限性，如在研究药物转运中表现出一定的局限性，如:缺少缺少粘蛋白产生细胞，粘蛋白产生细胞，缺少缺少肠壁粘液层；肠壁粘液层；具具有有较较高高的的细细胞胞通通透透性性，若若喂喂养养次次数数多多，某某些些酶酶载载体体或细胞内容物溢出；或细胞内容物溢出；缺少缺少某些代谢酶；某些代谢酶；Caco-2Caco-2细胞模型的局限性细胞模型的局限性细胞模型的局限性细胞模型的局限性第十二页，本课件共有19页细细胞胞的的培培养养和和代代系系对对于于Caco-2Caco-2细细胞胞形形态态学学和和生生理理性性质质有影响，引起细胞对药物转运产生差别；有影响，引起细胞对药物转运产生差别；由由于于培培养养条条件件差差别别，使使不不同同实实验验室室出出来来结结果果缺缺乏乏可可比比性性；第十三页，本课件共有19页Caco-2细胞模型在国外被广泛用于新药的筛选及吸收机制的研究。2002年被国际认定为动物实验替代方法,已经被FDA批准。第十四页，本课件共有19页药物溶出/Caco-2细胞组合模型可通过组合模型渗透性结果预测药物的体内吸收，用于评价固体制剂释药特征的合理性。因此，药物溶出/Caco-2细胞组合模型可作为制剂处方优化和质量控制的重要研究模型，促进Caco-2细胞模型在制剂学中的应用。第十五页，本课件共有19页尽管Caco-2细胞模型有许多限制，但是在阐明药物吸收机制，预测体内吸收和药物相互作用，设计有更好吸收和更高生物利用度的口服药物或制剂并评价它们的安全性等方面仍然是一个很好的工具。第十六页，本课件共有19页随着新一代细胞模型的建立，如加速的Caco-2细胞穿透模型，使原有的Caco-2细胞单层模型的一些缺点将得到克服，细胞模型在药物开发研究中将发挥愈来愈大的作用，Caco-2细胞模型的研究与应用则为其它细胞模型的建立奠定了良好的基础。第十七页，本课件共有19页完第十八页，本课件共有19页2023/3/1感感谢谢大大家家观观看看第十九页，本课件共有19页