羊肚菌的筛选鉴定及菌种改良精选课件.ppt
关于羊肚菌的筛选鉴定及菌种改良第一页，本课件共有17页什么是羊肚菌？Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.Click here to add your text.羊肚菌(Morchella)，又名草笠竹，为羊肚菌属真菌统称,是一种珍贵的食用菌和药用菌。羊肚菌于1818年被发现。主要包括黑色羊肚菌和黄色羊肚菌两类。国内外一直视其为高档宴席上的佳肴,同时羊肚菌子实体还可入药,具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补肾、提神之功能。第二页，本课件共有17页羊肚菌的形态、种类与分布羊肚菌的形态、种类与分布羊肚菌的形态羊肚菌菌盖呈不规则圆形或长圆形,菌盖长8.210.5 cm，直径2.02.8cm;菌盖与菌柄离生，菌盖中空，菌柄柱状，菌柄稍膨大，中空，白色，菌柄长度3.74.0cm，直径1.01.3cm。子囊棒状，无色，每个子囊内有8个子囊孢子，纵向或重叠排列，大小为162200m16.220.0m;侧丝棒状，顶端膨大，大小为80.01 112.5m7.510.0m;子囊孢子椭圆形，无色，大小为1016m7.512.5m第三页，本课件共有17页羊肚菌的形态、种类与分布羊肚菌的形态、种类与分布羊肚菌的种类与分布第四页，本课件共有17页羊肚菌的筛选羊肚菌的筛选1标本采集2标本材料的预处理3富集培养5高产菌株的筛选4纯种分离第五页，本课件共有17页羊肚菌的筛选羊肚菌的筛选标本采集 在雨后取新长出的羊肚菌盛入清洁的牛皮纸袋或 塑料袋中，扎好，标记，记录采样时间、地点、环境条件等，以备查考。标本预处理 将羊肚菌菌冠粉碎第六页，本课件共有17页羊肚菌的筛选羊肚菌的筛选富集培养 将雨后羊肚菌旁的表土至于富集培养基中富集培养 富集培养基 土豆200g 葡萄糖 2.0%蛋白胨 0.2%KH2PO40.15%MgSO40.05%琼脂 1.5%纯种分离 采用划线分离法、稀释分离法等纯化方法获取单菌落。第七页，本课件共有17页羊肚菌的筛选羊肚菌的筛选高产菌株的筛选 这一步是采用与生产相近的培养基和培养条件，通过三角瓶的容量进行小型发酵试验，获得适合于工业生产用菌种。还要对菌种进行发酵性能测定。第八页，本课件共有17页羊肚羊肚菌菌的鉴定的鉴定羊肚菌菌种的鉴定方法主要有两种,一种是依据生理生化特征,或者对菌种进行栽培试验,等待生长出子实体后,对子实体的形态特征来进行鉴定,从而得出菌种的分类,这是经典的分类和鉴定方法。另一种是近些年来随着生物学技术的发展而出现的分子鉴定方法,这种方法可以对各个发育时期的个体、各个组织器官甚至细胞作检测,而不是单纯的根据食用菌的外表形态特征来进行分类鉴定,因而可以直接对菌种做出鉴定第九页，本课件共有17页羊肚菌的鉴定经典鉴定方法肚菌菌丝分为基内菌丝和表面菌丝。表面菌丝有明显主干，生长初期为白色或淡黄色，有光泽，辐射生长，随后菌丝出现两类分枝，一类形成次级主干，形态与一级主干类似；一类分枝较短，并有部分菌丝伸入培养基内形成基内菌丝。后期，菌丝颜色逐渐加深，呈浅褐色或褐色。光学显微镜下，幼龄菌丝细而长，有隔，呈竹节状，分枝少。成熟菌丝粗，棕色，壁厚呈黑棕色，节间距较短，分枝较多，顶端膨大呈棒状，大多分枝呈锐角，少数呈直角。基内菌丝无主干，分枝多，间隔短，菌丝粗大。第十页，本课件共有17页羊肚菌的鉴定羊肚菌的鉴定分子标记鉴定方法基因组 DNA 提取方法 以鲜子实体为材料，利用 Biospin 真菌基因组 DNA 提取试剂盒提取DNA。ITS 序列分析 采用真菌通用引物 ITS4和 ITS5。测序 将 ITS-PC 产物进行纯化，纯化后的 PC 扩增产物和引物直接测序.第十一页，本课件共有17页羊肚菌的菌种改良羊肚菌的菌种改良菌种活化 斜面种子培养基斜面采用PDA培养基,在无菌室中 斜面接种，25培养。PDA培养基 土豆 200g 葡萄糖 20g 琼脂 1520g 水 1000mL pH值 自然第十二页，本课件共有17页羊肚菌的菌种改良羊肚菌的菌种改良固体培养基的筛选培养基:半合成培养基:PDA综合培养基 天然培养基采用玉米粉琼脂培养基;黄 豆粉琼脂培养基;山芋粉琼脂培养基。各培养基115灭菌20分钟。接种后,恒温25,观察菌丝生长速度,采用菌丝长满试管的天数;菌核生长采用定性方法。第十三页，本课件共有17页羊肚菌的菌种改良羊肚菌的菌种改良种瓶制备将斜面菌种切成黄豆粒大小的小块接种23块到液体种子培养基中,300ml三角瓶装液量120ml,置于旋转式摇床上,转速150rpm,25培养34天。羊肚菌液体种子培养基 土豆10%蔗糖3%蛋白陈0.1%酵母膏0.5%KH2PO4 0.05%MgSO40.05%第十四页，本课件共有17页羊肚菌的益处羊肚菌的益处1.1.增强免疫作用：含有羊肚菌多糖，可促进淋巴增强免疫作用：含有羊肚菌多糖，可促进淋巴细胞增值细胞增值2.2.预防心脑血管疾病：含有多糖，降低胆固醇预防心脑血管疾病：含有多糖，降低胆固醇 浓度，稳定血压，预防动脉粥样硬化。浓度，稳定血压，预防动脉粥样硬化。3.3.预防胃肠道疾病：含有抗预防胃肠道疾病：含有抗生素和脂肪酸类物质，保护肠生素和脂肪酸类物质，保护肠胃、消化助食。胃、消化助食。4 4.抗疲劳作用抗疲劳作用第十五页，本课件共有17页羊肚菌的益处羊肚菌的益处5.5.抗癌作用：羊肚菌多糖，并且羊肚菌含丰富的硒抗癌作用：羊肚菌多糖，并且羊肚菌含丰富的硒是人体红细胞谷胱甘肽过氧化酶的组成成分，可运是人体红细胞谷胱甘肽过氧化酶的组成成分，可运输大量氧分子来抑制恶性肿瘤，使癌细胞失活；另输大量氧分子来抑制恶性肿瘤，使癌细胞失活；另方面能加强维生素方面能加强维生素E E的抗氧化作用。的抗氧化作用。6.6.羊肚菌含抑制肿瘤的多糖，抗菌、抗病毒的活性羊肚菌含抑制肿瘤的多糖，抗菌、抗病毒的活性成分，具有增强机体免疫力、抗疲劳、抗病毒、抑成分，具有增强机体免疫力、抗疲劳、抗病毒、抑制肿瘤等诸多作用；制肿瘤等诸多作用；7.7.抑制脂褐质的形成：日本科学家发现羊肚菌提取抑制脂褐质的形成：日本科学家发现羊肚菌提取液中含有酪氨酸酶抑制剂，可以有效地抑制脂褐质液中含有酪氨酸酶抑制剂，可以有效地抑制脂褐质的形成。的形成。第十六页，本课件共有17页2023/3/1感感谢谢大大家家观观看看第十七页，本课件共有17页
