植物染色体标本的制备.ppt

目的要求目的要求 学学习习植植物物染染色色体体标标本本的的制制备备技技术术，了了解解FeulgenFeulgen反反应应的的基基本本原原理理,学学习习其其操操作作方方法法和和压压片片法法,初初步步掌掌握握细胞分裂各期的主要特点。细胞分裂各期的主要特点。实验原理实验原理 FeulgenFeulgen反应的原理是根据反应的原理是根据DNADNA经弱酸经弱酸(1(1mol/L)mol/L)水解后水解后,打开嘌呤和脱氧核糖连接的打开嘌呤和脱氧核糖连接的键键,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基在脱氧核糖的一端形成游离的醛基.这些醛这些醛基就在原位与基就在原位与SchiffSchiff试剂结合试剂结合,形成含醌基的化形成含醌基的化合物合物,醌基是一个发色团所以具有颜色醌基是一个发色团所以具有颜色,因此凡因此凡有有DNADNA的部位的部位,就呈现紫红色。就呈现紫红色。实验用品实验用品一、一、材料材料蚕豆、豌豆（或玉米、水稻）蚕豆、豌豆（或玉米、水稻）二、器材二、器材显显微微镜镜，擦擦镜镜纸纸，剪剪子子，镊镊子子，小小平平皿皿，载载玻玻片片，盖玻片。盖玻片。三、试剂三、试剂 CarnoyCarnoy固固定定剂剂，95%95%酒酒精精 ，1 1mol/Lmol/L HClHCl,SchiffSchiff试剂，亚硫酸试剂，亚硫酸实验方法实验方法1 1、将植物种子放在潮湿的滤纸上，、将植物种子放在潮湿的滤纸上，2020使其发芽。使其发芽。2 2、预处理：切取的、预处理：切取的0.50.5cmcm长的根尖浸入长的根尖浸入0.1%0.1%秋水仙秋水仙素液中，室温下处理素液中，室温下处理3 34 4小时。小时。3 3、固定、水解及染色：、固定、水解及染色：CarnoyCarnoy固定剂固定固定剂固定10103030分钟分钟95%95%酒精酒精1010分钟分钟70%70%酒精酒精1010分钟分钟蒸馏水蒸馏水 1 1mol/Lmol/L HCl HCl,60 15,60 15分钟分钟 SchiffSchiff试剂试剂40406060分钟分钟 亚硫酸水亚硫酸水(1,2,3)(1,2,3)换换3 3次次,每次每次5 5分钟自来水分钟自来水将染色后的根尖漂洗干净将染色后的根尖漂洗干净,选择染色效果好的材料选择染色效果好的材料蒸馏水蒸馏水压片压片镜检镜检 观观 察察蚕豆根尖蚕豆根尖2 2n=2x=12n=2x=12豌豆根尖豌豆根尖 2n=2x=14 2n=2x=14 玉米根尖玉米根尖 2n=2x=20 2n=2x=20 水稻根尖水稻根尖 2n=2x=24 2n=2x=24 思考题思考题1 1、简述、简述FeulgenFeulgen反应的原理反应的原理2 2、欲欲得得到到一一张张好好的的FeulgenFeulgen反反应应制制片片,制片过程中应注意些什么制片过程中应注意些什么 3 3、绘制细胞分裂图。、绘制细胞分裂图。