18免疫学防治2.ppt

免疫学防治免疫学防治-2-2辉煌的历史辉煌的历史牛痘接种术的发明牛痘接种术的发明由于由于EdwardJenner首次用牛痘来预防天花而引起的恐慌首次用牛痘来预防天花而引起的恐慌JennerJenner的贡献的贡献1979年世界年世界卫卫生生组织郑组织郑重宣市重宣市“天花在地球上天花在地球上绝绝迹迹”这这是人是人类对传类对传染病染病预预防防进进行人工免疫最行人工免疫最优优秀秀的范例的范例我我我我们们们们，全全全全球球球球扑扑扑扑灭灭灭灭天天天天花花花花证证证证实实实实委委委委员员员员会会会会委委委委员员员员，证证证证实实实实扑扑扑扑灭灭灭灭天天天天花花花花已已已已经经经经在在在在全全全全世世世世界界界界实实实实现现现现。人类使用各种疫苗的时间表人类使用各种疫苗的时间表开始使用年份开始使用年份可可预防疾病预防疾病疫苗类型疫苗类型1772天花天花天花活病毒天花活病毒1798天花天花自然减毒牛痘苗自然减毒牛痘苗1885狂犬狂犬减毒活减毒活病毒和死病毒病毒和死病毒1896伤寒伤寒灭活全菌体灭活全菌体1896霍乱霍乱灭活灭活全菌体全菌体1897鼠疫鼠疫灭活灭活全菌体全菌体1923白喉白喉粗制粗制福尔马林类毒素福尔马林类毒素1927结核病结核病卡介苗卡介苗1955小儿麻痹症小儿麻痹症灭活灭活疫苗疫苗1963麻疹麻疹减毒活减毒活疫苗疫苗1981乙型乙型肝炎肝炎灭活灭活血浆功血浆功1991甲型甲型肝炎肝炎减毒活苗和死减毒活苗和死疫苗疫苗美国疫苗使用前后的传染病死亡人数比较美国疫苗使用前后的传染病死亡人数比较传染病传染病最高死亡人数最高死亡人数19971997年死亡人数年死亡人数死亡降低百分数死亡降低百分数白喉白喉206939206939（19211921）5 599.9999.99麻疹麻疹894134894134（19411941）13513599.9899.98腮腺腮腺炎炎152209152209（19681968）61261299.6099.60百日咳百日咳265269265269（19341934）5519551999.9299.92小儿麻痹症小儿麻痹症2126921269（19521952）4 499.9899.98风疹风疹5768657686（19691969）0 0100.00100.00破伤风破伤风15601560（19231923）434397.2497.24流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌2000020000（19841984）24224298.7098.70乙肝疫苗乙肝疫苗2661126611（19851985）16126 1612639.4039.40免疫预防的巨大贡献免疫预防的巨大贡献WHOWHO评论评论 在生命科学还没有一个领域对人在生命科学还没有一个领域对人类健康作出如此重大的贡献：类健康作出如此重大的贡献：l一些重要传染病得到控制或消灭一些重要传染病得到控制或消灭l改变了人类的疾病谱改变了人类的疾病谱l延长了人类的平均寿命延长了人类的平均寿命我国：我国：5050年代初到现在平均寿命由年代初到现在平均寿命由3535岁达到了岁达到了7373岁岁现在的努力现在的努力世界卫生组织的扩大免疫措施世界卫生组织的扩大免疫措施(Expand Program Immunization(Expand Program Immunization，EPI)EPI)n1974年WHO在全球发起了EPI，经37年的不懈的努力，全球的婴儿免疫接种的覆盖率已经达到了80%以上nEPI计划包括：卡介苗、白、百、破、麻疹、脊髓灰质炎、乙肝、黄热病、流感嗜血杆菌n1990年世界儿童会议上提出20世纪末麻疹发病率和死亡率分别下降90%和95%，基本消灭新生儿破伤风和小麻痹症，2000年中国宣布消灭脊髓灰质炎我国儿童计划免疫接种程序我国儿童计划免疫接种程序乙肝疫苗、卡介苗、脊灰疫苗、百白破疫苗、麻疹疫苗、乙型肝炎、结核病、脊髓灰质炎、百日咳、白喉、破伤风、麻疹、甲型肝炎、流行性脑脊髓膜炎、流行性乙型脑炎、风疹、流行性腮腺炎、流行性出血热、炭疽和钩端螺旋体病 牛痘牛痘鼠疫鼠疫霍乱霍乱乙肝乙肝结核结核疫苗改变世界疫苗改变世界疫苗改变世界疫苗改变世界传染性疾病得到进一步控制传染性疾病得到进一步控制面临的问题面临的问题老的疾病尚未解决，新的传染（感染）性疾病不断出现老的疾病尚未解决，新的传染（感染）性疾病不断出现v老的传染病时有起伏：老的传染病时有起伏：big threebig three：爱滋、结核、疟疾：爱滋、结核、疟疾v新的传染病不断出现新的传染病不断出现 *平均每年在动物发现平均每年在动物发现2-32-3种新的病毒性疾病：疯牛病、疯狗病、疯羊病、种新的病毒性疾病：疯牛病、疯狗病、疯羊病、疯猪病疯猪病 *近近2020年出现了年出现了1515种没法治疗的新的病毒性疾病种没法治疗的新的病毒性疾病 *1970*1970年以来新发展的传染病有年以来新发展的传染病有2020多种，如多种，如19771977年的肺炎军团菌、年的肺炎军团菌、19831983 年幽门螺杆菌和艾滋病毒、年幽门螺杆菌和艾滋病毒、19881988年的丙型肝炎、年的丙型肝炎、20032003年的年的SARSSARS等等v传染病的威胁仍然巨大传染病的威胁仍然巨大 当今世界上每年有当今世界上每年有17001700万人死于传染病，其中万人死于传染病，其中2/32/3是因为无疫苗可用是因为无疫苗可用 1/3 1/3是因为疫苗本身的质量或接种等原因造成是因为疫苗本身的质量或接种等原因造成 v我国我国 乙肝乙肝2 2亿；亿；AIDS AIDS：19991999国家公布国家公布5050万万,2010,2010将达将达10001000万万?免疫预防面临的问题v提高提高“好苗好苗”的接种率、普及率的接种率、普及率v提高提高“差苗差苗”的保护率的保护率v研制针对研制针对“无苗无苗”的疾病的疫苗的疾病的疫苗v从传染病到非传染病从传染病到非传染病v策略和技术改进策略和技术改进面临的技术困难面临的技术困难天然感染不能产生终生免疫力的疾病天然感染不能产生终生免疫力的疾病保护性抗原高度变异保护性抗原高度变异黏膜感染性疾病黏膜感染性疾病非感染性疾病非感染性疾病保护性抗原是非蛋白抗原保护性抗原是非蛋白抗原减毒活疫苗毒力回复减毒活疫苗毒力回复传统疫苗学传统疫苗学 microorganismmicroorganism AntigenAntigen Clone Clone genesgenesTest in Test in animal animal modelsmodels Vaccine Vaccine developmentdevelopmentIdentify Identify componentscomponentsPurify Purify componentscomponentsTest Test immunogenicityimmunogenicityTest Test convalecentconvalecent sera sera5-15 years5-15 yearswhole genome sequencewhole genome sequencePredictionPrediction of novel Ag of novel Agin in silicosilicoVaccine Vaccine candidatescandidatesexpress express recombinantrecombinantproteinproteinTest in Test in AnimalAnimal models modelsVaccineVaccinedevelopmentdevelopment反向疫苗学反向疫苗学1-2 years 1-2 years 疫苗研制策略疫苗研制策略我国预防性疫苗研究使用情况简介我国预防性疫苗研究使用情况简介理论研究有一定的差距，应用研究与国际先进水平差距不大理论研究有一定的差距，应用研究与国际先进水平差距不大正在使用的疫苗、正在更新换代的疫苗、正在研发的新疫苗，代表着我国现时状况正在使用的疫苗、正在更新换代的疫苗、正在研发的新疫苗，代表着我国现时状况和发展趋势和发展趋势现在使用的传统疫苗现在使用的传统疫苗l细菌性疫苗：细菌性疫苗：卡介菌、鼠疫、布氏杆菌、炭疽卡介菌、鼠疫、布氏杆菌、炭疽l病毒性疫苗：病毒性疫苗：麻疹、腮腺炎、脊髓灰质炎麻疹、腮腺炎、脊髓灰质炎开始使用年份开始使用年份可可预防疾病预防疾病疫苗类型疫苗类型1772天花天花天花活病毒天花活病毒1798天花天花自然减毒牛痘苗自然减毒牛痘苗1885狂犬狂犬减毒活减毒活病毒和死病毒病毒和死病毒1896伤寒伤寒灭活全菌体灭活全菌体1896霍乱霍乱灭活灭活全菌体全菌体1897鼠疫鼠疫灭活灭活全菌体全菌体1923白喉白喉粗制粗制福尔马林类毒素福尔马林类毒素1927结核病结核病卡介苗卡介苗1955小儿麻痹症小儿麻痹症灭活灭活疫苗疫苗1963麻疹麻疹减毒活减毒活疫苗疫苗1981乙型乙型肝炎肝炎灭活灭活血浆功血浆功1991甲型甲型肝炎肝炎减毒活苗和死减毒活苗和死疫苗疫苗因因使用量小没有进一步研究使用量小没有进一步研究现有机遇进行研究现有机遇进行研究炭疽活疫苗炭疽活疫苗 -历史历史1881年年Pasteur首创炭疽活疫苗首创炭疽活疫苗 1958年我国董树林研究小组经艰苦卓越的工年我国董树林研究小组经艰苦卓越的工作研究成功人用炭疽减毒活疫苗作研究成功人用炭疽减毒活疫苗1961年生产，划痕接种，每年加强年生产，划痕接种，每年加强美国和英国美国和英国20世纪世纪50年代开始使用铝胶培养年代开始使用铝胶培养上清液疫苗，注射接种，上清液疫苗，注射接种，18个月接种个月接种6针，每针，每年加强年加强n效果与安全性效果与安全性 保护率在保护率在80%以上，但持续时间短，每年加强。副反应较大以上，但持续时间短，每年加强。副反应较大 中国疫苗与美国现用疫苗相比优点为：中国疫苗与美国现用疫苗相比优点为：1.接种次数少接种次数少 2.副反应相对小副反应相对小n发展发展改变先有疫苗接种方式改变先有疫苗接种方式如皮下或皮内注射如皮下或皮内注射保护性抗原（保护性抗原（PA）组分疫苗组分疫苗表达突变表达突变PA，纯化后可得到一致的抗原纯化后可得到一致的抗原表达表达PA的炭疽杆菌减毒活疫苗的炭疽杆菌减毒活疫苗消除炭疽杆菌的质粒、毒素和荚膜，然后表达消除炭疽杆菌的质粒、毒素和荚膜，然后表达PA卡介苗卡介苗l历史历史 1921开始用于儿童，开始用于儿童，1928年以后在全世界广泛使用，年以后在全世界广泛使用，至今已接种至今已接种40亿人，现在每年有亿人，现在每年有1亿儿童接种。接种方法早亿儿童接种。接种方法早期为口服，二十世纪期为口服，二十世纪50年代后改为皮内接种年代后改为皮内接种l安全性安全性 40亿人接种，是世界上最安全的疫苗之一。亿人接种，是世界上最安全的疫苗之一。但对免疫缺但对免疫缺陷者不安全。对感染艾滋病毒者接种卡介菌要慎重。陷者不安全。对感染艾滋病毒者接种卡介菌要慎重。WHO建议可对无症状的感染艾滋病毒者接种卡介苗；而不能给有建议可对无症状的感染艾滋病毒者接种卡介苗；而不能给有症状的患者接种症状的患者接种急需有换代产品，但尚未有突破性进展急需有换代产品，但尚未有突破性进展l使用效果使用效果 用卡介苗预防肺结核已超用卡介苗预防肺结核已超70年代，各种临床观察实验有年代，各种临床观察实验有数十次。数十次。WHO综合分析免疫保护力在综合分析免疫保护力在50%，但这只是但这只是理论计算数据，根据每年发病人数估计，卡介苗预防肺结理论计算数据，根据每年发病人数估计，卡介苗预防肺结核的作用十分有限。从人类消灭天花的经验推测，疫苗的核的作用十分有限。从人类消灭天花的经验推测，疫苗的免疫保护力必须达到免疫保护力必须达到80%以上才有可能预防该种传染病，以上才有可能预防该种传染病，并进一步控制和消灭它。因此卡介苗的效果显然不尽如意，并进一步控制和消灭它。因此卡介苗的效果显然不尽如意，研制和开发新的结核疫苗势在必行研制和开发新的结核疫苗势在必行 对于防止结核杆菌的播散，预防结核性脑膜炎和粟粒性结对于防止结核杆菌的播散，预防结核性脑膜炎和粟粒性结核等重症结核病的免疫保护力十分显著核等重症结核病的免疫保护力十分显著。在多次大规模临在多次大规模临床试验中平均保护力在床试验中平均保护力在75%。数十年来它拯救了数百万。数十年来它拯救了数百万儿童的生命。对于预防脑膜炎和粟粒性结核来说，在发展儿童的生命。对于预防脑膜炎和粟粒性结核来说，在发展中国家继续广泛接种卡介苗的计划是有积极意义的中国家继续广泛接种卡介苗的计划是有积极意义的 l新疫苗研究新疫苗研究*BCG重组疫苗和重组疫苗和DNA疫苗疫苗人型结核杆菌基因在人型结核杆菌基因在BCG中表达，中表达，19X103和和38X103脂蛋白质脂蛋白质已经表达，其他保护性抗原基因也在进行尝试。已经表达，其他保护性抗原基因也在进行尝试。Ag85ADNA疫苗在小鼠实验中有保护效果疫苗在小鼠实验中有保护效果*营养缺陷型减毒活疫苗营养缺陷型减毒活疫苗牛型结核菌牛型结核菌BCG营养缺陷型减毒活疫苗：甲硫氨酸或亮氨酸营养缺陷型减毒活疫苗：甲硫氨酸或亮氨酸生物合成缺陷生物合成缺陷人型结核菌人型结核菌BCG营养缺陷型减毒活疫苗：亮氨酸生物合成缺营养缺陷型减毒活疫苗：亮氨酸生物合成缺陷，有效，但毒力恢复频率高陷，有效，但毒力恢复频率高 -现在状况现在状况 日本于日本于1981年首先研究成功含有百日咳毒素（年首先研究成功含有百日咳毒素（PT）和丝状血凝和丝状血凝素（素（FHA）的无细胞百日咳疫苗，并代替了百日咳菌体疫苗。我国于的无细胞百日咳疫苗，并代替了百日咳菌体疫苗。我国于1991年研制成无细胞百日咳疫苗，年研制成无细胞百日咳疫苗，1994年研制成年研制成DTaP。从临床观从临床观察来看，无细胞百日咳疫苗和察来看，无细胞百日咳疫苗和DTap与老疫苗相当或更高，副反应明显与老疫苗相当或更高，副反应明显降低。目前全世界有十几个国家推广使用新疫苗，我国目前新老疫苗降低。目前全世界有十几个国家推广使用新疫苗，我国目前新老疫苗并存，也在逐步推广并存，也在逐步推广百日咳疫苗百日咳疫苗-历史历史 20世界世界30年代开始使用灭活百日咳菌体疫苗，百日咳的发病年代开始使用灭活百日咳菌体疫苗，百日咳的发病率明显下降。我国百日咳的发病率从率明显下降。我国百日咳的发病率从1978年到年到1999年下降了年下降了99.6%。HWO估计，每年有估计，每年有7000万儿童接种该疫苗受到保护。万儿童接种该疫苗受到保护。但接种全菌体疫苗产生的严重副反应使一些国家接种率下降，随之但接种全菌体疫苗产生的严重副反应使一些国家接种率下降，随之又出现百日咳流行，重新接种疫苗后百日咳发病率又明显下降。又出现百日咳流行，重新接种疫苗后百日咳发病率又明显下降。现处于更新阶段现处于更新阶段已经更新换代的疫苗已经更新换代的疫苗多糖疫苗多糖疫苗 伤寒伤寒Vi多糖疫苗多糖疫苗纯化疫苗纯化疫苗 精制狂犬疫苗、流感亚单位疫苗和裂解疫苗精制狂犬疫苗、流感亚单位疫苗和裂解疫苗基因工程疫苗基因工程疫苗 乙肝疫苗乙肝疫苗-历史历史 早期使用的伤寒疫苗主要是灭活的全菌体疫苗，经工艺的多次改进发展成为热灭活早期使用的伤寒疫苗主要是灭活的全菌体疫苗，经工艺的多次改进发展成为热灭活-酚防腐或丙活全菌体疫苗，保护率为酚防腐或丙活全菌体疫苗，保护率为60-70%，但副反应大。美国和法国联合研究成功，但副反应大。美国和法国联合研究成功纯化伤寒纯化伤寒Vi多糖疫苗，商业化产品多糖疫苗，商业化产品1989年问世年问世-使用现状使用现状 我国我国20世纪世纪80年代开始伤寒年代开始伤寒Vi多糖疫苗研究，多糖疫苗研究，1996年开始生产。疫苗经肌肉或皮年开始生产。疫苗经肌肉或皮下深部一次性接种，下深部一次性接种，90%以上个体有以上个体有4倍以上抗荚膜多糖抗体产生，抗体水平维持倍以上抗荚膜多糖抗体产生，抗体水平维持3年，年，但加强免疫没有回忆反应，诱生的抗体与首次接种相近。保护力十分显著，统计的但加强免疫没有回忆反应，诱生的抗体与首次接种相近。保护力十分显著，统计的2200万人接种人群，万人接种人群，6人发生了伤寒，其中确认免疫接种失败的人发生了伤寒，其中确认免疫接种失败的2人人-发展趋势发展趋势 伤寒伤寒Vi多糖疫苗缺点有两个；其一是多糖疫苗缺点有两个；其一是2岁以下儿童没有保护性免疫反应，其二是没有岁以下儿童没有保护性免疫反应，其二是没有再次接种的免疫记忆反应，因为多糖是再次接种的免疫记忆反应，因为多糖是T细胞非依赖性抗原。因此发展多糖蛋白结合疫苗细胞非依赖性抗原。因此发展多糖蛋白结合疫苗已在研究中。另外在各种伤寒减毒疫苗加以改造，引入已在研究中。另外在各种伤寒减毒疫苗加以改造，引入Vi多糖基因多糖基因伤寒伤寒Vi多糖疫苗多糖疫苗年代年代国外发状况国外发状况年代年代国内发展状况国内发展状况1908成年脑组织苗成年脑组织苗1919成年脑组织苗成年脑组织苗1955幼年脑组织苗幼年脑组织苗不详不详幼年脑组织苗幼年脑组织苗1960地鼠肾细胞苗地鼠肾细胞苗1980地鼠肾细胞苗地鼠肾细胞苗1994浓缩苗浓缩苗2000纯化精制苗纯化精制苗2001Vero细胞纯化苗细胞纯化苗狂犬疫苗国内外发展比较狂犬疫苗国内外发展比较狂犬疫苗狂犬疫苗效果和安全评价效果和安全评价我国的地鼠肾细胞苗接种我国的地鼠肾细胞苗接种5针后有明显的保护但与国外的二倍体细胞苗比较，抗体产针后有明显的保护但与国外的二倍体细胞苗比较，抗体产生较晚，对严重复生较晚，对严重复咬伤者或潜伏期短者不能保护。按咬伤者或潜伏期短者不能保护。按WHO建议，狂犬灭活疫苗的效力必须在建议，狂犬灭活疫苗的效力必须在2.5U以上，由以上，由此研制了浓缩苗。解决了抗原量不足的问题。浓缩后的细胞杂质增多，使副反应加重，从而又研制了纯化苗。此研制了浓缩苗。解决了抗原量不足的问题。浓缩后的细胞杂质增多，使副反应加重，从而又研制了纯化苗。纯化苗的效果好，副反应低，是我国目前使用的疫苗纯化苗的效果好，副反应低，是我国目前使用的疫苗发展趋势发展趋势当前使用的地鼠肾细胞纯化苗，可能随着要求的不断提高，可能对原代细胞的外源性因子进行当前使用的地鼠肾细胞纯化苗，可能随着要求的不断提高，可能对原代细胞的外源性因子进行严格控制，生产成本可能要大幅提高，因此用传代细胞生产的疫苗将有可能是下一步的换代产品。法国的基严格控制，生产成本可能要大幅提高，因此用传代细胞生产的疫苗将有可能是下一步的换代产品。法国的基因工程口服疫苗已经应用到野生动物的免疫，我国也有同类产品在前期研究，但离市场化有较大距离因工程口服疫苗已经应用到野生动物的免疫，我国也有同类产品在前期研究，但离市场化有较大距离发展史发展史1964年发现澳大利亚抗原，年发现澳大利亚抗原，1971年将含有高滴度年将含有高滴度的的HBsAg血浆稀释血浆稀释后加热，接种志原者，证明能产生抗体，有保护力。在此基础上美国后加热，接种志原者，证明能产生抗体，有保护力。在此基础上美国NIH作出作出了纯化血源苗。我国了纯化血源苗。我国19890年生产血源苗，多年的应用表明，血源苗效果是理年生产血源苗，多年的应用表明，血源苗效果是理想的，抗体阳转率在想的，抗体阳转率在90%左右。但长期使用阳性有血安全性问题，而乙肝病毒左右。但长期使用阳性有血安全性问题，而乙肝病毒无法在体外培养，因此发展基因工程疫苗成为乙肝疫苗换代产品的必然趋势，无法在体外培养，因此发展基因工程疫苗成为乙肝疫苗换代产品的必然趋势，国内外相继研制出了真核表达的乙肝疫苗国内外相继研制出了真核表达的乙肝疫苗乙肝基因工程疫苗乙肝基因工程疫苗乙肝疫苗是目前国内正式使用的唯一一个基因工程疫苗品乙肝疫苗是目前国内正式使用的唯一一个基因工程疫苗品种。国产的是中国预防医学科学院阮力研究员研制的种。国产的是中国预防医学科学院阮力研究员研制的CHO细胞表达的乙肝基因细胞表达的乙肝基因工程疫苗，从国外引进的是酵母细细胞表达的乙肝基因工程疫苗，我国目前这工程疫苗，从国外引进的是酵母细细胞表达的乙肝基因工程疫苗，我国目前这两种疫苗用于预防乙肝，血源疫苗已经停止生产两种疫苗用于预防乙肝，血源疫苗已经停止生产发展趋势发展趋势怎么解决怎么解决5-15%无反应性无反应性乙肝疫苗乙肝疫苗轮状病毒疫苗轮状病毒疫苗研究和使用现状：研究和使用现状：到目前为止国外在婴幼儿人群中使用过的源于动物的轮状病到目前为止国外在婴幼儿人群中使用过的源于动物的轮状病毒疫苗有两种：两株牛的和一株恒河猴的轮状病毒疫苗。毒疫苗有两种：两株牛的和一株恒河猴的轮状病毒疫苗。其中牛的轮状病毒疫苗因保护力不明确放弃，恒河猴的轮其中牛的轮状病毒疫苗因保护力不明确放弃，恒河猴的轮状病毒疫苗在状病毒疫苗在、基临床中发生肠套暂停试验基临床中发生肠套暂停试验我国兰州生物制品研究所白值生研究员利用羊轮状病毒株我国兰州生物制品研究所白值生研究员利用羊轮状病毒株研制了口服活疫苗。研制了口服活疫苗。6-24个月龄婴幼儿进行临床试验证个月龄婴幼儿进行临床试验证明了安全性和有效性，明了安全性和有效性，1998年在我国获得批准生年在我国获得批准生产，现大产，现大规模生产规模生产发展趋势发展趋势：4价的重配株疫苗：国外已完成用牛和价的重配株疫苗：国外已完成用牛和猴株与人株重配，进入猴株与人株重配，进入到临床阶段。我国尚有一株还未完成。到临床阶段。我国尚有一株还未完成。人轮状病毒减毒活疫苗：尚未有结果，其原因是难以组织培人轮状病毒减毒活疫苗：尚未有结果，其原因是难以组织培养传代，有少数可能达到临床试验阶段。养传代，有少数可能达到临床试验阶段。VLP：昆虫细胞表达，形成类病毒颗粒有免疫原性，尚未完：昆虫细胞表达，形成类病毒颗粒有免疫原性，尚未完成动物实验成动物实验Summary感染、免疫感染、免疫与疫苗与疫苗免疫学的发展免疫学的发展艾滋艾滋SARS天花天花霍乱霍乱乙肝乙肝结核结核禽流感禽流感哮喘哮喘脊髓灰质炎脊髓灰质炎麻疹麻疹鼠疫鼠疫疟疾疟疾特异性免疫治疗特异性免疫治疗v基于抗体的治疗基于抗体的治疗v基于基于cytotoxic T lymphocyte(CTL)的治疗的治疗治疗用抗体的历史和发展治疗用抗体的历史和发展 治疗用单抗的应用范围治疗用单抗的应用范围 1.治疗肿瘤 Rituxan淋巴瘤 Herceptin乳腺瘤 2.治疗自身免疫疾病 抗CD3、CD4、MHC-2等淋巴细胞表面分子的抗体 3.预防和治疗器官移植中排斥反应 Orthoclone OKT3肾 4.抗感染、抗毒素所致的疾病 RespicanRSV CroFab抗蛇毒 5.治疗心血管疾病 Abciximab RePro血栓 美国已上市的部分治疗用抗体美国已上市的部分治疗用抗体 名称 治疗病种 生产公司 OKT3(CD3)肾移植肾移植OrthoBiotechRituxan(人源化)淋巴瘤淋巴瘤IDECHexceptin(人源化)乳腺癌乳腺癌GenentechReopro(人源化)溶血栓溶血栓CentocorRespiGam(RSV)抗病毒抗病毒MedlmmuneZenapax(人源化)肾移植肾移植RocheCytoGam(人源化)CMV感染感染MeclmmuneCroFab响尾蛇咬响尾蛇咬ProthericsReFacto血友病血友病GeneticsIns.英国研究治疗用抗体英国研究治疗用抗体 名称名称 治疗病种治疗病种 开发公司开发公司抗抗CD3抗体抗体移植排异移植排异牛津大学牛津大学抗抗CD33抗体抗体白血病白血病Celltech(人源化人源化)chiroscience抗抗IL-5抗体抗体哮喘等哮喘等C.C.抗抗IL-12抗体抗体 自身免疫疾病自身免疫疾病CATBexxar肿瘤等肿瘤等SmithKlineTheragyn卵巢癌等卵巢癌等AntisomaPDGF心脏病心脏病C.C.注：Cambridge Antibody Technology(CAT)问题问题 1 1、鼠源单抗的异源性，、鼠源单抗的异源性，“人源化人源化”后活性降低后活性降低 2 2、单抗、单抗 “小型化小型化”是研究方向，但与相应抗原结合是研究方向，但与相应抗原结合 靶点也相对减少靶点也相对减少 3 3、基因工程单抗表达量低，临床剂量大、基因工程单抗表达量低，临床剂量大 4 4、导向药物偶联、导向药物偶联 “弹头弹头”未到靶细胞之前解离，损未到靶细胞之前解离，损 伤健康组织伤健康组织 5 5、双特异性抗体：亲和力、双特异性抗体：亲和力/动力学？动力学？主动特异性免疫治疗治疗性疫苗一、基本原理一、基本原理二、研究进展二、研究进展慢性持续性感染慢性持续性感染认知性疾病认知性疾病自身免疫病自身免疫病肿瘤肿瘤Vaccination against HIVVaccination approachViral protein in vaccine EfficacyEfficacy with HAARTWhole,killed HIVHIV-1 depleted of gp120 -,phase III studyVaxSyn Recombinant gp120of HIV-1 IIIB -n.d.Defined HIV core ProtP24 and p17 -n.d.DNA vaccine HIV-1 Env and Rev +(human)Live virus vectorsHIV-1 Gag,Pol and nef,and gp120 +(macaques)+HSPHSP70 and HSP72 alone or linked togp120 or p27 n.d.n.d.Combination with immune-based therapies Inactivated HIV and GM-CSF and IL-2 +n.d.Therapeutic HSV vaccinesVaccine or companyVaccine descriptionInactivated whole-cell virus vaccineEli LillyFormalin-inactivated;rabbit kidney cells“Lupidon”Heat-killed virusDundarov vaccineFormalin-inactivated;rabbit kidney cellsSkinner vaccine Formalin-inactivated;detergent extractionKutiniva vaccineHSV1 lectin purified glycoproteins on Al(OH)3CappelHSV2 glycoproteinslederleGD1+alumRecombinant subunit vaccineChiron-Biocine GD+alum/Mf-59GlaxoSmithKline Truncated gD2+alum+MPLGenetechTruncated gD1Therapeutic HSV vaccines(continued)Genetically engineered HSV mutantsDISC VACCINEDeletion of nonstructural protein ICP 4-8-275 Black Z virusRecombination of a mutant HSV-1 ICP8 gene into a HSV-2 wild type strainSingle-cycle mutants R7017-R7020Deletion of sequences in HSV1 to reduce virulence and neutrotropinRAV 9395Deletion of UL55,UL56 and r1 34.5 genes,function as a live attenuated HSV-2 vaccineOther vaccinesViral vectorsVaccinia:VgD52(HSV1),VP176(gD1),VP221(Gd2)DNA vaccinesPlasmids encoding for gC,gD,gE from HSV1Therapeutic HBV vaccinesInactivated purified envelope vaccinesMSDHBsAg+alumRecombinant protein based vaccinesAventis PasteurS-pre-S2+alumBiotechnology General LtdS-pre-S1-pre-S2+alumChiron CooperationS-pre-S2+MF-59Medeva LtdS-pre-S2+alumGlaxoSmithKline BiologicalsS+AS2Other vaccinesCytel CorporationCore lipopeptidePowerjectHBS-DNA vaccineShanghai Inst Bio ProdHBsAg-anti-HBs Ab complesInstitute of Immunology,PLAmimogenTherapeuticHPVvaccinesLive vector vaccinesXenovaRecombinant vaccinia;modified e6 and E7 from HPV 16 and 18Sig/E7/LAMP-1Recombinant vacciniaProtein-based vaccinesXenova/GlaxoSmithKline BiologicalsL2E7 fusion protein,HPV6Med ImmuneHPV11 L1 VLP on alumCLS,AustraliaHPV-16 E6-E7 protein with chelating“Iscomatrix”Stress Gene BiotechnologiesHPV16 E7+BCG HS/65Chiron PharmaceuticalsHPV16 E2 protein with MF59 AdjuvantOther vaccinesPeptide HLA H2 restricted HPV E7 peptide+PADREHPV16 E7 peptide+PADRE+Montanide ISA 51 adjuvantHPV16 E7 peptide conjugated with ISCARDNADNA plasmids expressed early proteins DNA plasmid+gold microparticles 认知性疾病认知性疾病v“朊病毒朊病毒”疾病疾病“朊病毒朊病毒”：Creutzfeldt-Jakob病（病（CJD）等疾病等疾病v“朊病毒朊病毒”是正常细胞朊蛋白（是正常细胞朊蛋白（PrPc）的一种构象亚的一种构象亚型。体外实验已经证明抗朊蛋白抗体型。体外实验已经证明抗朊蛋白抗体6H4可结合细胞可结合细胞表面的表面的PrPc，抑制抑制PrPsc的形成。提示可能用疫苗治疗的形成。提示可能用疫苗治疗“朊病毒朊病毒”疾病疾病v采采用用编编码码PrPc的的基基因因Prnp在在小小鼠鼠进进行行免免疫疫以以诱诱导导抗抗体体产产生生，后后者者可可防防止止疾疾病病的的发发生生。但但由由于于PrPc在在体体内内广广泛分布，固有引发自身免疫性疾病的可能泛分布，固有引发自身免疫性疾病的可能Huntington氏病（氏病（HD）v虽然虽然Huntington氏病的发病机理并不十分清楚，但已知富氏病的发病机理并不十分清楚，但已知富含含-片层的蛋白聚集是十分重要的。片层的蛋白聚集是十分重要的。Huntingtin蛋白蛋白N-末端多聚谷氨酸异常延长可引起病理性蛋白相互作用和聚末端多聚谷氨酸异常延长可引起病理性蛋白相互作用和聚集集v通通过过抗抗体体库库技技术术得得到到了了可可特特异异性性结结合合于于临临近近Huntingtin蛋蛋白白外外显显子子-1上上多多聚聚谷谷氨氨酸酸的的17个个氨氨基基酸酸序序列列的的单单链链抗抗体体。将将其其作作为为一一种种内内抗抗体体（intrabody）与与异异常常Huntingtin蛋蛋白白-GFP共共表表达达，可可显显著著降降低低蛋蛋白白聚聚集集。目目前前正正在在动动物物模模型型进行临床前的评价进行临床前的评价Alzheimer氏病（氏病（AD）lAD的的病病理理特特征征是是细细胞胞内内淀淀粉粉样样斑斑快快的的聚聚集集导导细细胞胞死死亡亡。斑斑 块块 内内 的的 主主 要要 成成 分分 是是 A肽肽（40-4240-42个个 氨氨 基基 酸酸）l19991999年，在小鼠模型证明用年，在小鼠模型证明用A肽免疫可抑制斑块形成及肽免疫可抑制斑块形成及相关的神经病理变化。这一发现为用疫苗治疗相关的神经病理变化。这一发现为用疫苗治疗ADAD奠定了基奠定了基础。虽然其后有实验证明接受此项治疗的小鼠可恢复记忆础。虽然其后有实验证明接受此项治疗的小鼠可恢复记忆和学习能力。主要的疑问是斑快的清除是否在人类与行为和学习能力。主要的疑问是斑快的清除是否在人类与行为改善、神经生理功能的恢复、及神经细胞死亡的减少有关。改善、神经生理功能的恢复、及神经细胞死亡的减少有关。新近，因为其副作用，都柏林的新近，因为其副作用，都柏林的ElanElan已声明终止了一项临已声明终止了一项临床试验床试验l另另外外的的一一种种策策略略是是基基于于免免疫疫激激发发针针对对A肽肽的的EFRHEFRH表表位位（A肽的肽的3-63-6氨基酸序列）的抗体氨基酸序列）的抗体自身免疫性疾病自身免疫性疾病 1 1 多发性硬化症（多发性硬化症（MSMS）Copolymer Copolymer 1 1 是是丙丙氨氨酸酸、谷谷氨氨酰酰胺胺、赖赖氨氨酸酸、酪酪氨氨酸酸的的随随机机合合成成物物以以模模拟拟MBPMBP。Copolymer Copolymer 1 1进进入入体体内内首首先先结结合合MHC-MHC-IIII，和和髓髓磷磷脂脂在在结结合合MHC-IIMHC-II和和结结合合TCRTCR水水平平发发生生竞竞争争。一一方方面面，它它可可作作为为TCRTCR拮拮抗抗剂剂，另另一一方方面面诱诱导导Th2Th2细细胞胞产产生生、抑抑制制病病变变器器官官炎炎性性细细胞胞因因子子如如IFN-IFN-的的产产生生。在在临临床床试试验验中中，证证明明有有73%73%的的有有效效率率。目目前前已已在在欧欧共共体体、北北美美的的4040多多个国家使用个国家使用2 2 重症肌无力（重症肌无力（MGMG）MGMG是主要是主要由由T T细胞调节失调性的疾病，主要由抗细胞调节失调性的疾病，主要由抗乙酰胆碱受体的抗体发挥病理效应。有多项研究采用乙酰胆碱受体的抗体发挥病理效应。有多项研究采用肽疫苗治疗肽疫苗治疗MGMG。其中，有三项研究证明有较好前景：。其中，有三项研究证明有较好前景：一一是使用重组表达的多肽通过黏膜系统给药有效诱导是使用重组表达的多肽通过黏膜系统给药有效诱导 了免疫耐受和免疫抑制效应。了免疫耐受和免疫抑制效应。二二是使用一组多肽通过口服和鼻腔给药可预防实验性是使用一组多肽通过口服和鼻腔给药可预防实验性 MGMG（EAMAEAMA）的发生。的发生。三三采用乙酰胆碱受体采用乙酰胆碱受体-亚基的亚基的2 2个优势个优势T T细胞表位细胞表位 （195-212195-212，259-271259-271），证明能抑制），证明能抑制MGMG特异性特异性T T细胞细胞 株的增殖，诱导株的增殖，诱导T T细胞失能。后者在动物模型已取得细胞失能。后者在动物模型已取得 良好效果，被认为有希望成为治疗性疫苗良好效果，被认为有希望成为治疗性疫苗 3 3 系统性红斑狼疮（系统性红斑狼疮（SLESLE）基于自身抗体之CDR的多肽在体外试验和SLE动