二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析-20180714.pptx

第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析沈阳药科大学 药学院 80K药物分析二氢吡啶类药物的结构与性质1鉴别试验2有关物质的检查3含量测定4目录目录CONTENTS沈阳药科大学沈阳药科大学二氢吡啶类药物的结构与性质第一节第一节CONTENTS沈阳药科大学沈阳药科大学母核：苯基母核：苯基-1,4-1,4-二氢吡啶二氢吡啶结构特点1沈阳药科大学沈阳药科大学二氢吡啶环二氢吡啶环酯键酯键手性手性C C苯环苯环01代表药物2沈阳药科大学沈阳药科大学遇光不稳定，丙酮或氯仿中易溶，乙醇中微溶，水中几乎不溶遇光不稳定，丙酮、氯仿中易溶，溶于乙醇，微溶于乙醚，几乎不溶于水甲醇中易溶，乙醇和水中微溶遇光易变质，丙酮或氯仿中易溶，甲醇、乙醇中略溶，水中几乎不溶H硝基的氧化性硝基的氧化性02 二氢吡啶环二氢吡啶环的还原性的还原性01稳定性稳定性04质子解离性质子解离性03吸收光谱特性吸收光谱特性06旋光性旋光性05理化性质3可与氧化剂发生氧化还原反应进行鉴别或含量测定苯环上的硝基有氧化性，可被还原为芳伯胺进而用重氮-偶合反应鉴别与碱作用，母核1,4位H均可解离，形成p-共轭而发生颜色变化，可进行鉴别遇光极不稳定，易发生光化学歧化作用，分析应避光操作二氢吡啶环C4为手性碳原子，有旋光性芳环在紫外光区有特征吸收沈阳药科大学沈阳药科大学 鉴别试验第二节第二节CONTENTS沈阳药科大学沈阳药科大学化学鉴别法1分光光度法2色谱法3 1与亚铁盐反应与亚铁盐反应化学鉴别法1沈阳药科大学沈阳药科大学二氢吡啶类药物苯环硝基具有氧化性，可将氢氧化亚铁氧化为二氢吡啶类药物苯环硝基具有氧化性，可将氢氧化亚铁氧化为红棕红棕色色氢氧化铁沉淀氢氧化铁沉淀。ChP2010ChP2010尼莫地平及其制剂均用该反应进行鉴别。尼莫地平及其制剂均用该反应进行鉴别。尼莫地平的鉴别：尼莫地平的鉴别：取本品约取本品约20mg20mg，加乙醇，加乙醇2ml2ml溶解后，加新制的溶解后，加新制的5%5%硫酸亚铁铵溶液硫酸亚铁铵溶液2ml2ml，1.5mol/L1.5mol/L硫酸溶液硫酸溶液1d1d与与0.5mol/L0.5mol/L氢氧化钾溶液氢氧化钾溶液1ml1ml，强烈振摇，强烈振摇，1min1min内沉淀由内沉淀由灰绿色变为红棕色灰绿色变为红棕色。2与氢氧化钠试液反应与氢氧化钠试液反应化学鉴别法1沈阳药科大学沈阳药科大学二氢吡啶类药物的丙酮溶液与氢氧化钠试液反应显二氢吡啶类药物的丙酮溶液与氢氧化钠试液反应显橙红色橙红色。ChP2010ChP2010用该反应鉴别硝苯地平及其制剂、尼群地平及其制剂、尼索地平。用该反应鉴别硝苯地平及其制剂、尼群地平及其制剂、尼索地平。硝苯地平的鉴别：硝苯地平的鉴别：取本品约取本品约25mg25mg，加丙酮，加丙酮1ml1ml溶解，加溶解，加20%20%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液3-5d3-5d，振摇，振摇，溶溶液显橙红色液显橙红色。3沉淀反应沉淀反应化学鉴别法1沈阳药科大学沈阳药科大学1,4-1,4-二氢吡啶结构可与重金属盐类形成沉淀。二氢吡啶结构可与重金属盐类形成沉淀。尼莫地平尼莫地平 +氯化汞氯化汞 白色沉淀白色沉淀尼莫地平注射液的鉴别（尼莫地平注射液的鉴别（ChP2010ChP2010）：）：取本品适量取本品适量(约相当于尼莫地平约相当于尼莫地平20mg20mg）,置分液漏斗中加乙醚置分液漏斗中加乙醚30ml30ml振摇振摇提取，静置，分取乙醚层，置水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醇提取，静置，分取乙醚层，置水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醇2ml2ml，搅，搅拌使溶解，移至试管中，加拌使溶解，移至试管中，加1%1%氯化汞溶液氯化汞溶液3ml3ml，即，即产生白色沉淀产生白色沉淀。制作人：陈丹 3沉淀反应沉淀反应化学鉴别法1沈阳药科大学沈阳药科大学1,4-1,4-二氢吡啶结构可与重金属盐类形成沉淀。二氢吡啶结构可与重金属盐类形成沉淀。尼群地平尼群地平 +碘化铋钾碘化铋钾 橙红色沉淀橙红色沉淀尼群地平软胶囊的鉴别尼群地平软胶囊的鉴别(ChP2010):(ChP2010):取本品内容物约取本品内容物约4g4g，加乙醇稀释至，加乙醇稀释至10ml10ml，加碘化铋钾试液，加碘化铋钾试液1ml1ml，即，即生成橙红色沉淀生成橙红色沉淀。4重氮化重氮化-偶合反应偶合反应化学鉴别法1沈阳药科大学沈阳药科大学二氢吡啶类药物二氢吡啶类药物苯环硝基具有氧化性苯环硝基具有氧化性，在，在酸性环境下被锌粉还原为芳伯胺酸性环境下被锌粉还原为芳伯胺基基，可用重氮化，可用重氮化-偶合反应鉴别。偶合反应鉴别。BP2010BP2010、JP15JP15均用该反应鉴别硝苯地平。均用该反应鉴别硝苯地平。硝苯地平的鉴别硝苯地平的鉴别(BP2010)(BP2010)：取本品取本品25mg25mg，加，加10ml10ml盐酸盐酸-水水-乙醇混合溶液乙醇混合溶液(1.5:3.5:5),(1.5:3.5:5),温热，加入锌温热，加入锌粒粒0.5g0.5g放置放置5min5min，滤过，滤液加亚硝酸钠溶液，滤过，滤液加亚硝酸钠溶液(10g/L)5ml(10g/L)5ml放置放置2min2min，再，再加入氨基磺酸铵溶液加入氨基磺酸铵溶液(50g/L)2ml(50g/L)2ml摇匀，加入盐酸萘乙二胺溶液摇匀，加入盐酸萘乙二胺溶液(5g/L)2ml(5g/L)2ml，即，即显红色显红色（持续（持续5min5min以上）。以上）。1紫外分观光度法分光光度法2沈阳药科大学沈阳药科大学本类药物均具有芳环，在紫外光区有特征吸收，可用此法鉴别本类药物均具有芳环，在紫外光区有特征吸收，可用此法鉴别。各。各国药典均采用该法鉴别二氢吡啶类药物的原料或制剂。国药典均采用该法鉴别二氢吡啶类药物的原料或制剂。尼群地平软胶囊的鉴别（尼群地平软胶囊的鉴别（ChP2010ChP2010）：）：避光操作避光操作。取本品内容物约。取本品内容物约1g1g，置，置100ml100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度摇匀，取刻度摇匀，取10ml10ml置置100ml100ml量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，在量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，在353nm353nm与与303nm303nm波长处分别测定吸光度，两吸光度比值应为波长处分别测定吸光度，两吸光度比值应为2.1-2.32.1-2.3。2红外分观光度法分光光度法2沈阳药科大学沈阳药科大学此法是一种有效而可靠的此法是一种有效而可靠的定性分析定性分析手段，各国药典收载的二氢吡啶手段，各国药典收载的二氢吡啶类药物原料和部分制剂均采用该法鉴别。类药物原料和部分制剂均采用该法鉴别。尼群地平片的鉴别（尼群地平片的鉴别（ChP2010ChP2010）：）：避光操作避光操作。取本品（约相当于尼群地平。取本品（约相当于尼群地平100mg100mg）研细，加丙酮）研细，加丙酮10ml10ml振振摇使溶解，滤过，滤液暗处挥干，残渣经减压干燥，依法测定。本摇使溶解，滤过，滤液暗处挥干，残渣经减压干燥，依法测定。本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集600600，图，图9-19-1）一致。）一致。1高效液相色谱法色谱法3沈阳药科大学沈阳药科大学当药物采用高效液相色谱法测定含量时，可同时进行鉴别。各国药当药物采用高效液相色谱法测定含量时，可同时进行鉴别。各国药典均有许多二氢吡啶类药物用典均有许多二氢吡啶类药物用HPLCHPLC法鉴别。法鉴别。尼莫地平片的鉴别（尼莫地平片的鉴别（ChP2010ChP2010）：）：在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。对照品溶液主峰的保留时间一致。2薄层色谱法色谱法3沈阳药科大学沈阳药科大学薄层色谱法具有分离功能，可排除原料中有关物质、制剂中辅料的干扰，薄层色谱法具有分离功能，可排除原料中有关物质、制剂中辅料的干扰，可用于药物的鉴别。可用于药物的鉴别。硝苯地平的鉴别硝苯地平的鉴别(BP2010)(BP2010)：取本品加甲醇制成每取本品加甲醇制成每1ml1ml约含约含1mg1mg的溶液作为的溶液作为供试品溶液供试品溶液，另取硝苯地平，另取硝苯地平对照品适量，加对照品适量，加加甲醇制成每加甲醇制成每1ml1ml约含约含1mg1mg的溶液作为的溶液作为对照品溶液对照品溶液。吸取上述两种溶液各吸取上述两种溶液各5ul5ul，分别点于同一，分别点于同一硅胶硅胶F F254254薄层板薄层板上，以上，以乙酸乙酯乙酸乙酯-环己烷环己烷(40(40：6060）为展开剂）为展开剂展开，晾干，置展开，晾干，置紫外光灯（紫外光灯（254nm254nm）下检视。下检视。供供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点一致。试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点一致。有关物质的检查第三节第三节CONTENTS沈阳药科大学沈阳药科大学二氢吡啶类药物遇光极不稳定，易发生光化学歧化作用引入杂质，因此各国二氢吡啶类药物遇光极不稳定，易发生光化学歧化作用引入杂质，因此各国药典标准中均规定在药典标准中均规定在避光条件下避光条件下进行有关物质检查，进行有关物质检查，大多采用大多采用HPLCHPLC法法。硝苯地平在硝苯地平在光照和氧化剂光照和氧化剂存在条件下分别生成两种降解氧化产物：存在条件下分别生成两种降解氧化产物：杂质杂质和和杂质杂质。沈阳药科大学沈阳药科大学请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。杂质请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。杂质请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。请在此输入您的文本。硝苯地平具体方法（具体方法（P259-260P259-260）沈阳药科大学沈阳药科大学01供试液供试液和和的制备的制备02有关杂质对照品有关杂质对照品液液和和的制备的制备03色谱条件：色谱条件：填充剂：十八烷基硅烷键填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶合硅胶流动相：甲醇流动相：甲醇-水（水（3:23:2）检测波长：检测波长：235nm235nm04结果：结果：供试品溶液色谱图中如有与杂质供试品溶液色谱图中如有与杂质、峰保留时间一致的色谱峰，峰保留时间一致的色谱峰，按按外标法以峰面积计算外标法以峰面积计算，均不得，均不得超过超过0.1%0.1%，其他单个杂质的峰面，其他单个杂质的峰面积不得大于对照品溶液中硝苯地积不得大于对照品溶液中硝苯地平峰面积（平峰面积（0.2%0.2%），杂质总量不），杂质总量不得超过得超过0.5%0.5%。含量测定第四节第四节CONTENTS沈阳药科大学沈阳药科大学铈量法1紫外-可见分光光度法2高效液相色谱法3沈阳药科大学沈阳药科大学一、铈量法一、铈量法利用二氢吡啶类药物的利用二氢吡啶类药物的还原性还原性，可用铈量法测定含量。，可用铈量法测定含量。铈量法也称硫酸铈法，是以铈量法也称硫酸铈法，是以Ce(SOCe(SO4 4)2 2为标准溶液的氧化还原滴定法。由于酸为标准溶液的氧化还原滴定法。由于酸度较低时，度较低时，CeCe4+4+易水解，故本滴定在易水解，故本滴定在强酸性条件下强酸性条件下进行。进行。终点指示：终点指示：CeCe4+4+为黄色，为黄色，CeCe3+3+为无色，为无色，CeCe4+4+自身可作为指示剂，但不够灵敏；自身可作为指示剂，但不够灵敏；常用常用邻二氮菲作为指示剂邻二氮菲作为指示剂，即稍过量的，即稍过量的CeCe4+4+将指示液中的将指示液中的FeFe2+2+氧化成氧化成FeFe3+3+，使橙红色配合物离子呈无色，以指示终点到达，终点敏锐。，使橙红色配合物离子呈无色，以指示终点到达，终点敏锐。ChP2010ChP2010收载的二氢吡啶类原料药，收载的二氢吡啶类原料药，BP2010BP2010收载的尼莫地平、尼群地平、非收载的尼莫地平、尼群地平、非洛地平、硝苯地平，洛地平、硝苯地平，USP33USP33收载的尼莫地平均采用该法测定含量。收载的尼莫地平均采用该法测定含量。沈阳药科大学沈阳药科大学一、铈量法一、铈量法优点优点：Ce(SOCe(SO4 4)2 2标准溶液稳定标准溶液稳定，长时间放置、曝光、加热都不会引起浓度的变化；，长时间放置、曝光、加热都不会引起浓度的变化；CeCe4+4+还原为还原为CeCe3+3+是是单电子转移单电子转移，不生成中间价态产物，反应简单，副反应少；，不生成中间价态产物，反应简单，副反应少；大部分有机物不与大部分有机物不与Ce(SOCe(SO4 4)2 2作用，不干扰测定；作用，不干扰测定；特别适合于特别适合于糖浆剂、片剂糖浆剂、片剂等制剂的测定。等制剂的测定。硝苯地平的含量测定（硝苯地平的含量测定（ChP2010ChP2010）：）：测定原理：测定原理：沈阳药科大学沈阳药科大学一、铈量法一、铈量法硝苯地平的含量测定（硝苯地平的含量测定（ChP2010ChP2010）：）：取本品约取本品约0.4g0.4g，精密称定，加无水乙醇，精密称定，加无水乙醇50ml50ml微热使溶解，加微热使溶解，加高氯酸溶液高氯酸溶液（取（取70%70%高氯酸高氯酸8.5ml8.5ml，加水至，加水至100ml100ml）50ml50ml、邻二氮菲指示液邻二氮菲指示液3d3d，立即用硫酸铈，立即用硫酸铈滴定液（滴定液（0.1M0.1M）滴定，至近终点时，在水浴中加热至）滴定，至近终点时，在水浴中加热至5050左右，继续缓缓滴左右，继续缓缓滴定至定至橙红色消失橙红色消失，并将滴定结果用，并将滴定结果用空白试验校正空白试验校正。每每1ml1ml硫酸铈滴定液（硫酸铈滴定液（0.1M0.1M）相当于）相当于17.32mg17.32mg的的C C1717H H1818N N2 2O O6 6。终点时：终点时：稍过量的稍过量的CeCe4+4+将指示液中的将指示液中的FeFe2+2+氧氧化成化成FeFe3+3+，使橙红色消失，以指示终点。，使橙红色消失，以指示终点。邻二氮菲指示液应临用新制。邻二氮菲指示液应临用新制。沈阳药科大学沈阳药科大学二、紫外二、紫外-可见分光光度可见分光光度法法尼群地平软胶囊的含量测定（尼群地平软胶囊的含量测定（ChP2010ChP2010）：）：避光操作避光操作取本品取本品1010粒置小烧杯中，用剪刀剪破囊壳，加无水乙醇少量，振摇使溶解粒置小烧杯中，用剪刀剪破囊壳，加无水乙醇少量，振摇使溶解后，将后，将内容物与囊壳全部转移内容物与囊壳全部转移至具塞锥形瓶中，用至具塞锥形瓶中，用无水乙醇反复冲洗无水乙醇反复冲洗剪刀及剪刀及小烧杯，洗液并入锥形瓶中，密塞，置小烧杯，洗液并入锥形瓶中，密塞，置4040水浴加热水浴加热15min15min，并时时振摇；，并时时振摇；将内容物移入将内容物移入100ml100ml量瓶中，用量瓶中，用无水乙醇无水乙醇反复冲反复冲洗囊壳和锥形瓶，洗液并洗囊壳和锥形瓶，洗液并入量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度摇匀；入量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度摇匀；精密量取精密量取2ml2ml置置100ml100ml量瓶中，量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度摇匀，在用无水乙醇稀释至刻度摇匀，在353nm353nm波长波长处测定吸光度。处测定吸光度。另取另取尼群地平对照品尼群地平对照品适量，精密称定，用无水乙醇溶解并定量稀释制成适量，精密称定，用无水乙醇溶解并定量稀释制成1ml1ml中约含中约含2020g g的溶液，同法测定，计算即得。的溶液，同法测定，计算即得。沈阳药科大学沈阳药科大学三、高效液相色谱法三、高效液相色谱法高效液相色谱法通过分离可消除有关物质及制剂中辅料的干扰，准确测定药高效液相色谱法通过分离可消除有关物质及制剂中辅料的干扰，准确测定药物含量。各国药典二氢吡啶类药物的原料及制剂大多采用本法测定含量。物含量。各国药典二氢吡啶类药物的原料及制剂大多采用本法测定含量。尼莫地平分散片的含量测定（尼莫地平分散片的含量测定（ChP2010ChP2010）：）：(1)(1)色谱条件与系统适应性试验：色谱条件与系统适应性试验：填充剂：填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：流动相：甲醇甲醇-乙腈乙腈-水（水（35:38:2735:38:27）；检测波长：检测波长：235nm235nm；理论塔板数按尼莫地平峰计算不低于理论塔板数按尼莫地平峰计算不低于80008000；尼莫地平峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。尼莫地平峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。沈阳药科大学沈阳药科大学三、高效液相色谱法三、高效液相色谱法尼莫地平分散片的含量测定（尼莫地平分散片的含量测定（ChP2010ChP2010）：）：(2)(2)测定法：测定法：避光操作避光操作 取本品取本品2020片精密称定，研细，精密称取适量（约相当于尼莫地平片精密称定，研细，精密称取适量（约相当于尼莫地平10mg10mg），），置置50ml50ml量瓶中，量瓶中，加流动相适量加流动相适量，超声处理超声处理15min15min使尼莫地平溶解，放冷，使尼莫地平溶解，放冷，用流用流动相稀释动相稀释至刻度，摇匀，至刻度，摇匀，离心离心10min(3000r/min)10min(3000r/min)；精密量取上清液精密量取上清液5ml5ml，置置50ml50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取密量取1010l l注入液相色谱仪，记录色谱图；注入液相色谱仪，记录色谱图；另取另取尼莫地平对照品尼莫地平对照品，精密称定，用流动相，精密称定，用流动相溶解并定量稀释制成每溶解并定量稀释制成每1ml1ml中约含中约含2020g g的溶液，同法测定。的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。按外标法以峰面积计算，即得。沈阳药科大学沈阳药科大学