病原生物学-教程-ppt课件第十八章-螺旋体.ppt

第十八第十八章章 螺旋体螺旋体 病原生物学病原生物学学习目标1.掌握掌握：钩端螺旋体、梅毒螺旋体的端螺旋体、梅毒螺旋体的传播途径；播途径；致病特点。致病特点。2.熟悉熟悉：钩端螺旋体、梅毒螺旋体的主要生物学端螺旋体、梅毒螺旋体的主要生物学特性。特性。3.了解了解：钩端螺旋体、梅毒螺旋体的微生物学端螺旋体、梅毒螺旋体的微生物学检查与防治原与防治原则。v螺旋体是一螺旋体是一类细长，柔，柔软，弯曲呈螺旋状，运，弯曲呈螺旋状，运动活活泼的原核的原核细胞型微生物胞型微生物。v其其生物学特性生物学特性类似似细菌，有菌，有细胞壁、原始核胞壁、原始核质，以二，以二分裂方式生分裂方式生长繁殖和繁殖和对抗生素敏感抗生素敏感。v无无鞭毛，但在鞭毛，但在细胞壁与胞壁与细胞膜之胞膜之间有有轴丝，轴丝的屈的屈曲和收曲和收缩使螺旋体运使螺旋体运动活活泼。表表18-1 对人致病的螺旋体属人致病的螺旋体属 表表18-1 对人致病的螺旋体属人致病的螺旋体属 第一第一节 钩端螺旋体端螺旋体一、生物学性状一、生物学性状（一）形（一）形态与染色与染色钩端螺旋体端螺旋体细长，一端或两端弯曲呈，一端或两端弯曲呈钩状，螺旋状，螺旋细密密规则。长约612，直径，直径为0.l0.2m，革，革兰阴性，但着色阴性，但着色较难。常用常用Fontana镀银染色法，菌体染成棕褐色染色法，菌体染成棕褐色。用用暗暗视野野显微微镜观察察，活活的的钩端端螺螺旋旋体体如如同同细小小闪亮亮的的珍珍珠珠，运运动活活泼。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体（二）培养特性（二）培养特性常用常用Korthof培养基培养基进行培养，需氧，最适生行培养，需氧，最适生长温度温度为28，生，生长缓慢，慢，经培养培养12周后，液体培养基中呈云周后，液体培养基中呈云雾状生状生长。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体（三）抵抗力（三）抵抗力钩体体对热抵抵抗抗力力弱弱，56 10min即即死死亡亡，在在24环境境中中可存活可存活2周以上周以上。在在湿湿土土或或水水中中下下可可存存活活数数月月，这与与钩端端螺螺旋旋体体病病的的传播播有有重重要意要意义。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体（四）抗原构造与分（四）抗原构造与分类钩端螺旋体具有位于菌体表面的型特异性抗原和存在于菌体端螺旋体具有位于菌体表面的型特异性抗原和存在于菌体内部的群特异性抗原，借此分群、分型内部的群特异性抗原，借此分群、分型。我国我国至少存在至少存在19个血清群，个血清群，74个血清型个血清型。我国我国目前使用的目前使用的问号号钩端螺旋体参考菌株有端螺旋体参考菌株有14群群15型。型。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（一）致病物（一）致病物质1内毒素内毒素样物物质 作用作用类似革似革兰阴性菌的内毒素。阴性菌的内毒素。2溶血素溶血素 其其能破坏能破坏红细胞膜而溶血。注入小羊体内，可出胞膜而溶血。注入小羊体内，可出现贫血、出血、血血、出血、血尿、肝大与黄疸等症状与体征尿、肝大与黄疸等症状与体征。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（一）致病物（一）致病物质3细胞毒性因子胞毒性因子 存在存在于于钩体患者或感染体患者或感染动物的血物的血浆中。将之注射小鼠中。将之注射小鼠12h，可出，可出现肌肉肌肉痉挛、呼吸困、呼吸困难而死亡。无毒株不而死亡。无毒株不产生生CTF。4致致细胞病胞病变作用作用物物质 56经30min被破坏。被破坏。给家兔注射，可形成家兔注射，可形成红斑和水斑和水肿。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体（二）所致疾病（二）所致疾病钩端螺旋体病是一种人畜共患端螺旋体病是一种人畜共患传染病染病。我我国国已已从从50多多种种动物物中中检出出致致病病性性钩端端螺螺旋旋体体，其其中中以以鼠鼠类和和猪猪为主要主要储存宿主。存宿主。动物物感感染染钩端端螺螺旋旋体体后后多多呈呈隐性性感感染染，螺螺旋旋体体在在动物物肾脏中中长期存在，并持期存在，并持续随尿不断排菌，随尿不断排菌，污染水源和土壤染水源和土壤。人人类主要是接触了被主要是接触了被钩端螺旋体端螺旋体污染的疫水、土壤而受感染染的疫水、土壤而受感染。钩端端螺螺旋旋体体也也可可通通过胎胎盘垂垂直直感感染染胎胎儿儿，导致致流流产；偶偶有有经哺哺乳乳传给婴儿或吸血昆虫儿或吸血昆虫传播播。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体（二）所致疾病（二）所致疾病钩端端螺螺旋旋体体经黏黏膜膜、皮皮肤肤破破损处或或眼眼结膜膜侵侵入入人人体体后后，即即在在局局部部迅迅速速繁殖，并繁殖，并经淋巴系淋巴系统或直接或直接进入血循入血循环引起菌血症引起菌血症。由由于于钩端端螺螺旋旋体体的的血血清清型型别不不同同、毒毒力力不不一一，宿宿主主免免疫疫水水平平差差异异，临床床表表现轻重重相相差差甚甚大大。轻者者似似感感冒冒，仅出出现轻微微的的自自限限性性发热；重重者者可有明可有明显的肝、的肝、肾、中枢神、中枢神经系系统损害，肺大出血，甚至死亡害，肺大出血，甚至死亡。钩端端螺螺旋旋体体病病的的特特点点是是起起病病急急、高高热、乏乏力力、全全身身酸酸痛痛、眼眼结膜膜充充血血、腓腓肠肌肌压痛、浅表淋巴痛、浅表淋巴结肿大等大等。临床床上上根根据据损伤脏器器不不同同相相应的的分分为流流感感伤寒寒型型、肺肺出出血血型型、黄黄疸疸出出血型、血型、肾衰竭型等。衰竭型等。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体（三）免疫性（三）免疫性病后或病后或隐性感染后，机体可性感染后，机体可获得得对同型同型钩端螺旋体的持久免疫力。端螺旋体的持久免疫力。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体三、微生物学三、微生物学检查（一）病原体（一）病原体检查发病病10天天内内取取血血，1周周后后取取尿尿，有有脑膜膜刺刺激激者者取取脑脊脊液液进行行检查。1直接直接镜检 将将标本本行行差差速速离离心心集集菌菌后后作作暗暗视野野检查，或或用用Fontana镀银法染色后法染色后镜检。也也可用免疫可用免疫荧光法或免疫光法或免疫酶染色法染色法检查。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体三、微生物学三、微生物学检查2分离与分离与鉴定定 将将标本本接接种种至至Korthof培培养养基基，置置28孵孵育育24周周，多多数数阳阳性性标本本可可见培培养养液液呈呈轻度度混混浊，以以暗暗视野野显微微镜检查有有无无钩端端螺螺旋旋体体，并用血清学方法并用血清学方法鉴定定。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体三、微生物学三、微生物学检查3动物接种物接种 是是分分离离钩端端螺螺旋旋体体的的敏敏感感方方法法，尤尤其其适适用用于于有有杂菌菌污染染的的标本本。将将标本接种于幼本接种于幼龄豚鼠或金地鼠腹腔豚鼠或金地鼠腹腔。接种接种35d后，后，检查腹腔液、血、腹腔液、血、脏器有无器有无钩端螺旋体。端螺旋体。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体三、微生物学三、微生物学检查4分子生物学方法分子生物学方法 用用特特异异DNA探探针杂交交法法检出出标本本中中钩端端螺螺旋旋体体，其其特特异异性性、敏敏感感性性均均优于培养法，且得出于培养法，且得出结果快速。果快速。第一第一节 钩端端螺旋体螺旋体四、防治原四、防治原则钩端螺旋体病的端螺旋体病的预防主要是防鼠、防主要是防鼠、灭鼠，加鼠，加强对带菌家畜的菌家畜的管理，保管理，保护水源水源。钩端螺旋体疫苗，人体接种后效果好、副作用端螺旋体疫苗，人体接种后效果好、副作用轻微微。治治疗首首选青霉素。青霉素。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体梅毒螺旋体，亦称梅毒螺旋体，亦称苍白密螺旋体，引起人白密螺旋体，引起人类梅毒。梅毒。一一、生物学性状、生物学性状（一）形（一）形态与染色与染色梅毒螺旋体梅毒螺旋体细长，约0.l0.2615m，螺旋致密而，螺旋致密而规则，两，两端尖直。革端尖直。革兰染色阴性，但不易着色，常用染色阴性，但不易着色，常用镀银染色法，菌染色法，菌体染成棕褐色体染成棕褐色。新新鲜标本不用染色，可在暗本不用染色，可在暗视野野显微微镜下直接下直接观察其形察其形态和和运运动。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体（二）培养特性二）培养特性体外人工培养未体外人工培养未获得成功得成功。有有毒株能通毒株能通过接种家兔睾丸或眼前房保持其繁殖和毒力，繁接种家兔睾丸或眼前房保持其繁殖和毒力，繁殖殖缓慢慢。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体（三）抵抗力三）抵抗力抵抗力极弱，抵抗力极弱，对温度、干燥特温度、干燥特别敏感。敏感。50，5min死亡，离死亡，离体后干燥体后干燥1 2h即死即死。4存放存放3天失去感染性天失去感染性。对化学消毒化学消毒剂敏感，如敏感，如1%2%石炭酸数分石炭酸数分钟内可将其内可将其杀死死。对抗生素如青霉素、抗生素如青霉素、红霉素、四霉素、四环素或砷素或砷剂都敏感。都敏感。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（一）致病物（一）致病物质梅梅毒毒螺螺旋旋体体有有毒毒株株产生生的的外外膜膜蛋蛋白白具具有有黏黏附附宿宿主主细胞胞的的作作用用；其其产生的透明生的透明质酸酸酶有利于螺旋体的有利于螺旋体的扩散散。螺螺旋旋体体表表面面具具有有荚膜膜样的的粘粘多多糖糖，能能保保护螺螺旋旋体体免免受受环境境中中不良因素的不良因素的伤害。害。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体（二）所致疾病（二）所致疾病苍白密螺旋体白密螺旋体苍白白亚种是梅毒的病原体，梅毒是一种慢性全种是梅毒的病原体，梅毒是一种慢性全身性身性传染病，属于性染病，属于性传播疾病播疾病。自然自然情况下只感染人情况下只感染人类，人是其惟一的，人是其惟一的传染源染源。根据根据梅毒梅毒传播途径的不同，分播途径的不同，分为获得性梅毒和先天性梅毒。得性梅毒和先天性梅毒。前者主要通前者主要通过两性的直接接触，此外通两性的直接接触，此外通过输入梅毒患者的新入梅毒患者的新鲜血，也可血，也可发生生传染。后者从母体通染。后者从母体通过胎胎盘传给胎儿。胎儿。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体1获得性梅毒得性梅毒 是是由由皮皮肤肤或或黏黏膜膜感感染染梅梅毒毒螺螺旋旋体体而而引引起起，其其特特点点是是症症状状反反复复出出现。根据其特点和根据其特点和经过，分，分为三期：三期：（1）I期梅毒期梅毒：临床床症状主要症状主要为无痛性硬下疳，感染后无痛性硬下疳，感染后3周左右周左右发生生。下下疳疳多多发生生于于外外生生殖殖器器，其其溃疡渗渗出出物物中中含含有有大大量量梅梅毒毒螺螺旋旋体，用暗体，用暗视野野显微微镜容易容易查见，传染性极染性极强。一般一般4 8周后，下疳常自然愈合，不留周后，下疳常自然愈合，不留遗痕痕。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体1获得性梅毒得性梅毒 （2）期梅毒期梅毒：发生生在在硬硬下下疳疳出出现后后的的28周周，主主要要表表现为全全身身皮皮肤肤黏黏膜膜出出现梅梅毒毒疹疹，全全身身淋淋巴巴结肿大大，有有时也也累累及及骨骨、关关节、眼眼及及其其他器官他器官。在在梅毒疹和淋巴梅毒疹和淋巴结中，也有大量中，也有大量螺旋体。螺旋体。梅梅毒毒疹疹经一一定定时期期后后会会自自然然消消退退，但但潜潜伏伏一一段段时间后后可可又又出出现新的皮疹新的皮疹。一一期与二期梅毒又称早期梅毒，期与二期梅毒又称早期梅毒，传染性染性强，破坏性小，破坏性小。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体1获得性梅毒得性梅毒 （3）期梅毒期梅毒：发生生于于感感染染2年年以以后后，长的的可可达达1015年年，病病变不不仅限限于于皮皮肤肤黏膜，并可累及全身黏膜，并可累及全身组织器官器官。主主要要病病理理改改变为慢慢性性肉肉芽芽肿，局局部部因因动脉脉内内膜膜炎炎引引起起缺缺血血而而导致致组织坏死坏死。严重重的的是是感感染染引引起起心心血血管管及及中中枢枢神神经系系统的的病病变，导致致动脉脉瘤、脊髓瘤、脊髓痨或全身麻痹等或全身麻痹等。此此期期病病灶灶中中的的螺螺旋旋体体不不易易找找到到，传染染性性小小；但但病病程程长，破破坏坏性大，可危及生命。性大，可危及生命。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体2先天性梅毒先天性梅毒 是是患梅毒的孕患梅毒的孕妇，其体内的螺旋体通，其体内的螺旋体通过胎胎盘进入胎儿血流，入胎儿血流，引起胎儿的全身性感染引起胎儿的全身性感染。梅毒梅毒螺旋体在胎儿的肝、脾、螺旋体在胎儿的肝、脾、肾上腺等内上腺等内脏中大量繁殖，中大量繁殖，导致流致流产、早、早产或死胎；出生活的梅毒儿，呈或死胎；出生活的梅毒儿，呈现马鞍鼻，鞍鼻，锯齿形牙，形牙，间质性角膜炎，先天性耳性角膜炎，先天性耳聋等特殊体征。等特殊体征。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体（三）免疫性（三）免疫性梅梅毒毒的的免免疫疫为感感染染性性免免疫疫，即即当当体体内内有有螺螺旋旋体体存存在在时才才有有免免疫力疫力。以以细胞免疫胞免疫为主主。感感染染梅梅毒毒螺螺旋旋体体后后，患患者者体体内内产生生两两种种类型型抗抗体体：一一类是是抗抗梅梅毒毒螺螺旋旋体体的的抗抗体体，在在补体体参参与与下下能能杀死死或或溶溶解解螺螺旋旋体体，并并对吞吞噬噬细胞胞发挥调理理作作用用。另另一一类是是抗抗心心肌肌磷磷脂脂抗抗体体，即即反反应素，素，该抗体无免疫防御作用，只用于梅毒血清学抗体无免疫防御作用，只用于梅毒血清学诊断。断。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体三、微生物学三、微生物学检查（一）病原体（一）病原体检查I期梅毒取硬下疳渗出液，期梅毒取硬下疳渗出液，期梅毒取梅毒疹渗出液或局部淋期梅毒取梅毒疹渗出液或局部淋巴巴结抽出液抽出液。立即立即在暗在暗视野野显微微镜下下观察有无螺旋体及其运察有无螺旋体及其运动。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体三、微生物学三、微生物学检查(二二)血清学血清学诊断断1非特异性非特异性试验 用用正常牛心肌的心脂正常牛心肌的心脂质作作为抗原，抗原，测定患者血清中的反定患者血清中的反应素素（抗脂（抗脂质抗体）抗体）。由于由于采用的抗原是非特异的，在采用的抗原是非特异的，在风疹、水痘、疹、水痘、类风湿性关湿性关节炎、麻炎、麻风、疟疾、吸毒者可呈假阳性，判定疾、吸毒者可呈假阳性，判定时需注意需注意。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体三、微生物学三、微生物学检查(二二)血清学血清学诊断断2.特异性特异性试验 采用采用密螺旋体抗原，密螺旋体抗原，测定血清中的特异抗体，可用作梅毒定血清中的特异抗体，可用作梅毒证实试验。近年近年也有用蛋白也有用蛋白质印迹法印迹法检测抗体。用聚合抗体。用聚合酶链反反应检测标本中梅本中梅毒螺旋体的特异毒螺旋体的特异DNA片段。片段。第二第二节 梅毒梅毒螺旋体螺旋体四、防治原四、防治原则梅毒是一种性病，梅毒是一种性病，应加加强卫生教育并生教育并严格格执行社会管理行社会管理。梅毒梅毒确确诊后，后，应及早及早彻底治底治疗，主要用青霉素，主要用青霉素。血血清清学学试验在在治治疗后后3个个月月到到1年年后后抗抗体体转阴阴者者是是为治治愈愈，否否则要要继续治治疗。第三第三节 回回归热螺旋体与螺旋体与奋森螺旋体森螺旋体回回归热疏螺旋体以疏螺旋体以节肢肢动物物为媒介引起回媒介引起回归热。表表现为高高热，全身肌肉酸痛，全身肌肉酸痛，1次或多次复次或多次复发，肝、脾，肝、脾肿大，重症可大，重症可出出现黄疸和出血黄疸和出血倾向向。流行性流行性回回归热主要通主要通过人体虱在人人体虱在人类中中传播。当虱吸吮患者血液后，播。当虱吸吮患者血液后，螺旋体从中螺旋体从中肠进入血淋巴大量繁殖，不入血淋巴大量繁殖，不进入唾液或卵巢入唾液或卵巢。人人被虱叮咬后，因抓痒将虱被虱叮咬后，因抓痒将虱压碎，螺旋体碎，螺旋体经皮肤皮肤创伤进人人体人人体。蜱蜱传回回归热主要通主要通过软蜱蜱传播，播，储存宿主是存宿主是啮齿类动物物。螺旋体螺旋体在蜱的体腔、唾液、在蜱的体腔、唾液、粪便中均可存在，且便中均可存在，且经卵卵传代代。故故蜱叮咬人后，病原体可直接从皮肤蜱叮咬人后，病原体可直接从皮肤创口口进入体内入体内。预防防本病主要是本病主要是灭虱，防止蜱叮咬。治虱，防止蜱叮咬。治疗用青霉素、金霉素用青霉素、金霉素。第三第三节 回回归热螺旋体与螺旋体与奋森螺旋体森螺旋体奋森螺旋体人森螺旋体人类口腔中的正常菌群口腔中的正常菌群。正常正常情况下，与梭形梭杆菌寄居于口腔牙情况下，与梭形梭杆菌寄居于口腔牙龈部，机体免疫功部，机体免疫功能下降能下降时，则这两种菌大量繁殖，两种菌大量繁殖，协同引起同引起奋森咽峡炎、牙森咽峡炎、牙龈炎、口腔坏疽等炎、口腔坏疽等。微生物学微生物学检查法可采取局部病法可采取局部病变材料，直接涂片，革材料，直接涂片，革兰染色染色或或刚果果红染色染色负染染镜检。可可观察到螺旋体和梭杆菌并存，两者均呈革察到螺旋体和梭杆菌并存，两者均呈革兰阴性反阴性反应。