微生物基础知识及卫生管理培训.ppt

微生物基础知识与微生物基础知识与卫生卫生管理管理培训培训08 三月 20231药品生产质量管理规范药品生产质量管理规范附录中第二十条附录中第二十条 凡在洁净区工作的人员凡在洁净区工作的人员（包括清洁工和设备维修工）应当定期培训，使无菌药品的操作符合（包括清洁工和设备维修工）应当定期培训，使无菌药品的操作符合要求。培训的内容应当包括要求。培训的内容应当包括卫生和微生物方面的基础知识卫生和微生物方面的基础知识。未受培训。未受培训的外部人员（如外部施工人员或维修人员）在生产期间需进入洁净区的外部人员（如外部施工人员或维修人员）在生产期间需进入洁净区时，应当对他们进行特别详细的指导和监督。时，应当对他们进行特别详细的指导和监督。第二十九条第二十九条 所有人员都应当接受所有人员都应当接受卫生要求卫生要求的培训，企业应当建立人员的培训，企业应当建立人员卫生操作规程，最大限度地降低人员对药品生产造成污染的风险卫生操作规程，最大限度地降低人员对药品生产造成污染的风险第三十一条第三十一条 企业应当对人员健康进行管理，并建立企业应当对人员健康进行管理，并建立健康档案健康档案。直接接。直接接触药品的生产人员上岗前应当接受健康检查，以后触药品的生产人员上岗前应当接受健康检查，以后每年至少进行一每年至少进行一次次健康检查。健康检查。第三十二条第三十二条 企业应当采取适当措施，避免体表有企业应当采取适当措施，避免体表有伤口、患有传染病或伤口、患有传染病或其他可能污染药品疾病的其他可能污染药品疾病的人员从事直接接触药品的生产。人员从事直接接触药品的生产。第三十五条第三十五条 进入洁净生产区的人员不得进入洁净生产区的人员不得化妆和佩带饰物化妆和佩带饰物。第三十六条第三十六条 生产区、仓储区应当生产区、仓储区应当禁止吸烟和饮食，禁止存放食品、饮禁止吸烟和饮食，禁止存放食品、饮料、香烟和个人用药品等非生产用物品料、香烟和个人用药品等非生产用物品。08 三月 20232微生物的定义微生物的定义 微生物微生物:存在于自然界中的一群体型细小、结构简单、存在于自然界中的一群体型细小、结构简单、肉眼看不见，必须借助于特殊仪器放大后才能观肉眼看不见，必须借助于特殊仪器放大后才能观察到的微小生物。察到的微小生物。按其结构、化学组成及生活习性可分为按其结构、化学组成及生活习性可分为:原核类:仅有原始核质，无核仁或核膜，细胞器很不完善。如细菌、仅有原始核质，无核仁或核膜，细胞器很不完善。如细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、螺旋体放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体、螺旋体 真核类:细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌）、整。如真菌（酵母菌和霉菌）、原生动物、藻类原生动物、藻类非细胞类:体积微小，能通过除菌过滤器。如病毒和朊病毒等体积微小，能通过除菌过滤器。如病毒和朊病毒等按其致病性可分为按其致病性可分为:病原性微生物非病原性微生物08 三月 20233微生物分布广泛江河、湖海、土壤、空气中都存在种类不一、数量不等的微生物，人体体表、体内亦有多种微生物的存在土壤中微生物最丰富，1克土壤中可有几亿到几十亿个大多数微生物对人类是有益的，而且是必需的自然界中N、C、S等多种元素要靠微生物的代谢活动来循环 固氮菌。农业制造菌肥。工业用于食品发酵、皮革、石油化工、医药。正常情况下，寄生在人体的微生物是无害的，有些尚具有拮抗病原微生物的作用，肠道正常菌群，大肠杆菌等提供人体必需的硫胺素、核黄素、氨基酸等。没有微生物，植物就不能新陈代谢，人类和动物也难以生存08 三月 20234微生物学（microbiology)：研究微生物在一定条件下的形态、结构、生命活动和规律、进化、分类以及与人类、动物、植物、自然界相互关系等问题的一门科学微生物学的发展历史（一）经验时期制酒（公元前两千年前，制酒）制醋（二）实验微生物学时期列文虎克 显微镜巴斯德 有机物发酵与腐败与微生物 防酒发酵成醋-巴氏消毒08 三月 20235微生物学的开山祖微生物学的开山祖列文虎克列文虎克 1674年荷兰人列文虎克用自己 制造的能放大 200-300 倍的显 微镜观察了污水、牙垢、腐败有机物等，发现了许许多多肉眼看不见的微小的生 物，为微生物的存在提供了有力的证据。08 三月 20236微生物学的发展历史微生物学的奠基人微生物学的奠基人巴斯德巴斯德：从1862年起法国科学家巴斯德解决了葡萄酒变酸问题、发明了巴斯德灭菌法、医治了蚕病、炭疽病和疯狗病而成为伟大的微生物奠基人。微生物方法学和医学微生物学的奠基人微生物方法学和医学微生物学的奠基人科赫科赫：德国科学家科赫发现了炭疽杆菌、结核杆菌、霍乱弧菌、鼠疫杆菌，并第一次用科学的方法证明某种特定的微生物是某种特定疾病的病原。于1905年，获得了诺贝尔医学和生理学奖，主要是为了表彰他在肺结核研究方面的贡献。08 三月 20237微生物学的发展历史（三）现代微生物学时期随化学、物理学、生化、遗传学、细胞生物学、分子生物学等学科的发展，以及电子显微镜、组织化学、细胞培养、免疫荧光、免疫酶、同位素标记、分子杂交等新技术的应用，微生物学得到极为迅速的发展细菌细胞和病毒结构的研究提高到亚超微结构水平分子遗传学 使基因的DNA片段移植到细菌中去，通过质粒载体转移到大肠杆菌，在大肠杆菌中表达，制备药物克隆技术的应用08 三月 20238自然界中的主要微生物真菌真菌：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌（湿疹）：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌（湿疹）细菌细菌：肺炎球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌：肺炎球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌支原体支原体：肺炎支原体：肺炎支原体衣原体衣原体：沙眼：沙眼立克次体立克次体：斑疹伤寒：斑疹伤寒螺旋体螺旋体：梅毒：梅毒病毒病毒：甲、乙肝病毒，麻疹病毒，狂犬病毒，流：甲、乙肝病毒，麻疹病毒，狂犬病毒，流感病毒。感病毒。08 三月 20239常见污染微生物常见污染微生物1.葡萄球菌：可引起局部感染葡萄球菌：可引起局部感染2.大肠杆菌：胆道及尿道感染大肠杆菌：胆道及尿道感染3.绿脓杆菌：化脓性感染、中耳炎、肺炎绿脓杆菌：化脓性感染、中耳炎、肺炎4.枯草杆菌：结膜炎枯草杆菌：结膜炎5.酵母菌：使糖分解，药液产生有机酸酵母菌：使糖分解，药液产生有机酸6.霉菌：使制剂霉坏、酸败变质霉菌：使制剂霉坏、酸败变质08 三月 202310 1、体积小，面积大、体积小，面积大微生物的个体极其微小，必须借助显微镜放大几倍、几百倍、上千倍，微生物的个体极其微小，必须借助显微镜放大几倍、几百倍、上千倍，乃至数万倍才能看清。乃至数万倍才能看清。杆菌的宽度是杆菌的宽度是0.5微米，因此微米，因此80个杆菌个杆菌“肩并肩肩并肩”地排列成横队，也地排列成横队，也只有一根头发丝的宽度。杆菌的长度约只有一根头发丝的宽度。杆菌的长度约2微米，故微米，故1500个杆菌头尾个杆菌头尾衔接起来仅有一颗芝麻长。衔接起来仅有一颗芝麻长。物体的表面积和体积之比称为比表面积。大肠杆菌的比表面积是人的物体的表面积和体积之比称为比表面积。大肠杆菌的比表面积是人的30万倍。万倍。微生物的数量和种类是十分惊人的。一滴水，一颗土粒往往都是一个微生物的数量和种类是十分惊人的。一滴水，一颗土粒往往都是一个微生物微生物“社会社会”。其中以土壤内的生存密度最大，。其中以土壤内的生存密度最大，1克较肥活的土壤克较肥活的土壤常含有几亿到几十亿个微生物；贫瘠土壤每克也含有几百万到几千万常含有几亿到几十亿个微生物；贫瘠土壤每克也含有几百万到几千万个，一只肮脏的苍蝇，全身能携带个，一只肮脏的苍蝇，全身能携带5亿多个细菌，三对足能粘附亿多个细菌，三对足能粘附700万至万至1000万个细菌，可见微生物的密集度之大。万个细菌，可见微生物的密集度之大。08 三月 2023112、吸收多，转化快、吸收多，转化快微生物的食谱非常广泛，凡是动植物能利用的营养，微生物都能利用，大量的动植物不能利用的物质，甚至剧毒的物质，微生物照样可以视为美味佳肴。如大肠杆菌在合适条件下，每小时可以消耗相当于自身重量2000倍的糖，而人体则需要40年之久。08 三月 2023123、生长旺，繁殖快、生长旺，繁殖快 微生物以惊人的速度微生物以惊人的速度“生儿育女生儿育女”。例如大肠杆菌在合适的生长条件下，例如大肠杆菌在合适的生长条件下，12.520分钟便可繁殖一代，每小时可分裂分钟便可繁殖一代，每小时可分裂3次，由次，由1个变个变成成8个。每昼夜可繁殖个。每昼夜可繁殖72代，由代，由1个细菌变成重个细菌变成重约约4722吨，细菌数量的翻番只能维持几个小时，吨，细菌数量的翻番只能维持几个小时，不可能无限制地繁殖。因而在培养液中繁殖细菌，不可能无限制地繁殖。因而在培养液中繁殖细菌，它们的数量一般仅能达到每毫升它们的数量一般仅能达到每毫升1-10亿个，最多亿个，最多达到达到100亿。中等大小的细菌，亿。中等大小的细菌，1000个叠加在个叠加在一起只有句号那么大。想像一下一滴牛奶，每毫一起只有句号那么大。想像一下一滴牛奶，每毫升腐败的牛奶中约有升腐败的牛奶中约有5千万个细菌。千万个细菌。08 三月 2023134、适应强，易变异、适应强，易变异多数细菌能耐0196的低温；在海洋深处的某些硫细菌可在250300的高温条件下正常生长；一些嗜盐细菌甚至能在饱和盐水中正常生活；产芽孢细菌和真菌孢子在干燥条件下能保藏几十年、几百年。由于微生物繁殖快，也可在短时间内产生大量变异的后代。正是由于这个特性，人们才能够按照自己的要求不断改良正是由于这个特性，人们才能够按照自己的要求不断改良在生产上应用的微生物，在生产上应用的微生物，如青霉素生产菌的发酵水平由每毫升20单位上升到近10万单位，利用变异和育种得到如此大幅度的产量提高。08 三月 2023145、分布广，种类多、分布广，种类多微生物在地球上几乎无处不有，无孔不入，人的皮肤上，微生物在地球上几乎无处不有，无孔不入，人的皮肤上，口腔，肠道里都有许多微生物。口腔，肠道里都有许多微生物。微生物聚集最多的地方是土壤微生物聚集最多的地方是土壤，土壤是各种微生物生长繁土壤是各种微生物生长繁殖的大本营，约占微生物总量的殖的大本营，约占微生物总量的70-90%，任意取一把，任意取一把土或一粒土，就是一个微生物世界，不论数量或种类均最土或一粒土，就是一个微生物世界，不论数量或种类均最多。在肥沃的土壤中，每克土含有多。在肥沃的土壤中，每克土含有20亿个微生物，即使亿个微生物，即使是贫瘠的土壤，每克土中也含有是贫瘠的土壤，每克土中也含有35亿个微生物。亿个微生物。空气里悬浮着无数细小的尘埃和水滴，它们是微生物在空空气里悬浮着无数细小的尘埃和水滴，它们是微生物在空气中的藏身之地。哪里的尘埃多，哪里的微生物就多。气中的藏身之地。哪里的尘埃多，哪里的微生物就多。迄今为止，我们知道的微生物约有迄今为止，我们知道的微生物约有10万种，目前已知的万种，目前已知的种类只占地球上实际存在的微生物总数的种类只占地球上实际存在的微生物总数的20%，人类生，人类生产和生活中仅开发利用了已发现微生物种数的产和生活中仅开发利用了已发现微生物种数的1%。08 三月 202315微生物的特点微生物的特点个体小个体小,面积大：面积大：小于小于0.1mm。肉眼不可见。肉眼不可见。吸收多，转化快：吸收多，转化快：发酵乳糖的细菌在发酵乳糖的细菌在1小时内可分小时内可分解其自重解其自重100010000倍的乳糖；产朊假丝酵倍的乳糖；产朊假丝酵母合成蛋白质的能力比食用公牛强母合成蛋白质的能力比食用公牛强10万倍万倍生长旺，繁殖快：生长旺，繁殖快：微生物有惊人的繁殖速度，大微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代适应性强，易变异适应性强，易变异（耐药性产生的原因）（耐药性产生的原因）分布广分布广,种类多（种类多（10万多种）万多种）：自然界中到处都：自然界中到处都有，如水、空气、土壤等有，如水、空气、土壤等,土壤中的数量最多。土壤中的数量最多。08 三月 202316葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌 酵母菌（芽痕）酵母菌（芽痕）酵母菌（芽痕）酵母菌（芽痕）棒状杆菌棒状杆菌棒状杆菌棒状杆菌大肠杆菌大肠杆菌大肠杆菌大肠杆菌弧状菌弧状菌弧状菌弧状菌链球菌链球菌链球菌链球菌08 三月 202317菌落单位菌落单位菌落单位菌落单位-CFU 由单个菌细胞或几个同种菌细胞在培养基上长成由单个菌细胞或几个同种菌细胞在培养基上长成肉眼可见的菌落，每个菌落就是肉眼可见的菌落，每个菌落就是1CFU光滑型菌落光滑型菌落粗糙型菌落粗糙型菌落08 三月 202318微生物的菌落形态微生物的菌落形态08 三月 202319微生物的分布微生物的分布土壤：土壤：是微生物生活的最适环境是微生物生活的最适环境水：水：仅次于土壤的微生物分布、定居的第二仅次于土壤的微生物分布、定居的第二场所场所空气空气：空气中的微生物主要来源于带有微生空气中的微生物主要来源于带有微生物菌体及孢子的灰尘，这类微生物大多数物菌体及孢子的灰尘，这类微生物大多数是腐生性的，还来源于人和动物，它们大是腐生性的，还来源于人和动物，它们大多数是通过呼吸道排出的，其中也包含有多数是通过呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，悬浮在大气中。病原微生物，悬浮在大气中。08 三月 202320人体中的微生物人体中的微生物人自出生后，外界的微生物就逐渐进入人体。在人自出生后，外界的微生物就逐渐进入人体。在正常人体皮肤、粘膜及外界相通的各种腔道（如正常人体皮肤、粘膜及外界相通的各种腔道（如口腔、鼻咽腔、肠道和泌尿道）等部位，存在着口腔、鼻咽腔、肠道和泌尿道）等部位，存在着对人体无害的微生物群，包括细菌、真菌、螺旋对人体无害的微生物群，包括细菌、真菌、螺旋体、支原体等，称为体、支原体等，称为正常菌群。正常菌群。能使宿主致病的为能使宿主致病的为致病菌或病原菌致病菌或病原菌，不能造成宿，不能造成宿主感染的为主感染的为非致病菌或非病原菌非致病菌或非病原菌。有些细菌在正。有些细菌在正常情况下并不致病，但当在某些条件改变的特殊常情况下并不致病，但当在某些条件改变的特殊情况下可以致病，这类菌称为条件致病菌或机会情况下可以致病，这类菌称为条件致病菌或机会致病菌致病菌08 三月 202321人体内外微生物人体内外微生物人的头皮上有人的头皮上有140万个万个/cm2，两手，两手上约有上约有440万个，万个，1g指甲污垢有指甲污垢有38亿个，亿个，1g粪便可达粪便可达101000亿个。亿个。可以说微生物是无处不在，无处不有。可以说微生物是无处不在，无处不有。08 三月 202322人是最大的污染源？人是最大的污染源？人是洁净室最大的污染源，占人是洁净室最大的污染源，占90%90%左右。一般男性左右。一般男性每人每分钟向周围排放每人每分钟向周围排放10001000个以上的含菌粒子，个以上的含菌粒子，女性为女性为750750个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量为为10300个个/min/min，一般活动时发菌量为，一般活动时发菌量为1501000个个/min/min，行走时发菌量为，行走时发菌量为9002500个个/min/min。咳嗽一次发菌量为。咳嗽一次发菌量为70700个个/min/min，喷嚏一次为，喷嚏一次为400060000个个/min/min。所以在洁净室中，人的数量和活动应有特。所以在洁净室中，人的数量和活动应有特别严格的限制。别严格的限制。08 三月 202323如何阻断人体污染源如何阻断人体污染源进入洁净室（区）的人员不得化妆和佩带饰进入洁净室（区）的人员不得化妆和佩带饰物，不得裸手直接接触产品。物，不得裸手直接接触产品。无菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚无菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物。部，并能阻留人体脱落物。08 三月 202324人体中的微生物人体中的微生物 部位部位 常见菌种常见菌种u皮肤皮肤 表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、耻垢杆菌等表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、耻垢杆菌等u口腔口腔 链球菌（甲型或乙型）、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆菌、链球菌（甲型或乙型）、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏 球菌、类白喉杆菌球菌、类白喉杆菌u胃胃 正常一般无菌正常一般无菌u肠道肠道 类杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、厌氧性链球菌、粪链球类杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、厌氧性链球菌、粪链球 菌、菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸杆菌、变形杆菌、破葡萄球菌、白色念球菌、乳酸杆菌、变形杆菌、破 伤风杆菌、产气荚膜杆菌等伤风杆菌、产气荚膜杆菌等u鼻咽腔鼻咽腔 甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链 球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等u眼结膜眼结膜 皮表葡萄球菌、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等皮表葡萄球菌、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等08 三月 202325防范措施：防范措施：防范措施：防范措施：1.建立个人健康档案建立个人健康档案 新员工入厂全面体检，直接接触药品的生产人员每年至少体检一次，新员工入厂全面体检，直接接触药品的生产人员每年至少体检一次，如发现有传染疾病应立即隔离。如发现有传染疾病应立即隔离。2.清洁的个人卫生清洁的个人卫生 勤洗澡、理发、剪指甲勤洗澡、理发、剪指甲 正确的正确的洗手、更衣流程洗手、更衣流程及防护方式及防护方式3.洁净区内的自我约束洁净区内的自我约束 不佩带首饰，不化妆不佩带首饰，不化妆 进出次数应可能地少，在操作过程中应减小动作幅度进出次数应可能地少，在操作过程中应减小动作幅度 规范各类操作及避免违规行为规范各类操作及避免违规行为08 三月 202326防范措施：防范措施：防范措施：防范措施：一次更鞋一次更鞋：阻断外界粘在鞋底的垃圾、颗粒及微生物。相对：阻断外界粘在鞋底的垃圾、颗粒及微生物。相对 而言，脚底是最脏的部分。而言，脚底是最脏的部分。脱去外套脱去外套：阻断外界沉降在外套上的颗粒和微生物。：阻断外界沉降在外套上的颗粒和微生物。一更洗手一更洗手：规范的洗手能消除手部皮肤的污垢和大部分的微：规范的洗手能消除手部皮肤的污垢和大部分的微 生物。洗手一定要用洗手液和充足的流水。生物。洗手一定要用洗手液和充足的流水。二更二更带口罩带口罩：阻断鼻腔、呼吸道的微生物发散，洁净区内不能脱：阻断鼻腔、呼吸道的微生物发散，洁净区内不能脱 下口罩。下口罩。带发套带发套：阻断头发、头皮表面的微生物发散。保证发套完整：阻断头发、头皮表面的微生物发散。保证发套完整 的包裹头发。的包裹头发。穿连体服穿连体服：阻断体表皮肤的微生物发散。洁净区内不能解开：阻断体表皮肤的微生物发散。洁净区内不能解开 连体服。连体服。手消毒手消毒：再次消除手部的细菌和微生物。：再次消除手部的细菌和微生物。75%75%的酒精能杀灭的酒精能杀灭 手部手部95%95%以上的微生物。以上的微生物。08 三月 202327 设备的卫生应从设备的设计开始，要求设备的卫生应从设备的设计开始，要求产尘少、脱落粒产尘少、脱落粒子少、易清洗、消毒和灭菌子少、易清洗、消毒和灭菌。设备与物料的接触面不得与物。设备与物料的接触面不得与物料反应，不得吸附物料，设备的内表面材质要料反应，不得吸附物料，设备的内表面材质要平整、光滑平整、光滑，凹凸不平的区域不仅不易清洗，而且易存留残液等，它将成凹凸不平的区域不仅不易清洗，而且易存留残液等，它将成为微生物繁殖滋生的场所。管道的安装要避免批与批之间的为微生物繁殖滋生的场所。管道的安装要避免批与批之间的交叉污染交叉污染，管道要能定期清洗消毒。，管道要能定期清洗消毒。防范措施：防范措施：建立相应的设备清洁保养制度及规程建立相应的设备清洁保养制度及规程保持一贯的清洁状态，发现污渍、污水、残余物等应立即清除保持一贯的清洁状态，发现污渍、污水、残余物等应立即清除机修人员在线维修设备时，应注意操作尽量减少对药品产生污染机修人员在线维修设备时，应注意操作尽量减少对药品产生污染对直接接触药品的设备进行清洁验证对直接接触药品的设备进行清洁验证设备与微生物设备与微生物08 三月 202328物料与微生物物料与微生物 对于物料卫生的问题，从供应商的审计、物料进厂后的检对于物料卫生的问题，从供应商的审计、物料进厂后的检验、使用全过程，均要严格按照验、使用全过程，均要严格按照GMP规定的卫生要求进行。规定的卫生要求进行。物料主要包括：原辅料、玻瓶、工艺用水。物料主要包括：原辅料、玻瓶、工艺用水。防范措施：防范措施：正确的原辅料的正确的原辅料的脱包、消毒、运送脱包、消毒、运送(容器容器)及投加操作及投加操作。正确的胶塞清洗流程。正确的胶塞清洗流程。对精洗残余水、清洗水及工艺用水的定期监测。对精洗残余水、清洗水及工艺用水的定期监测。原辅料使用前的抽检。原辅料使用前的抽检。08 三月 202329操作方法与微生物操作方法与微生物 洁净区人员的操作是否规范，影响药品灭菌前的微生物洁净区人员的操作是否规范，影响药品灭菌前的微生物负荷，最终将影响产品的无菌保证值负荷，最终将影响产品的无菌保证值(SAL)。F06D121+D121lgN0 F0:标准灭菌时间标准灭菌时间;N0：产品灭菌前的带菌量；：产品灭菌前的带菌量；D121：在：在121下杀灭下杀灭90%微生物所需时间。微生物所需时间。防范措施：防范措施：制定日常操作的规范并严格执行。制定日常操作的规范并严格执行。直接与药品有接触的操作应带无菌手套并频繁冲洗，操作过程中动作不宜过大。直接与药品有接触的操作应带无菌手套并频繁冲洗，操作过程中动作不宜过大。加强对微生物知识的了解，增强无菌操作意识。加强对微生物知识的了解，增强无菌操作意识。08 三月 202330环境与微生物环境与微生物环境中的微生物种类繁多环境中的微生物种类繁多，主要有附着于尘埃上的从主要有附着于尘埃上的从地面飞起的球菌属（包括八地面飞起的球菌属（包括八叠球菌属在内的好氧菌）；叠球菌属在内的好氧菌）；形形成孢子的好氧性杆菌（如枯成孢子的好氧性杆菌（如枯草芽孢杆菌）；青霉等霉草芽孢杆菌）；青霉等霉菌的菌的孢子等。微生物的存在严重孢子等。微生物的存在严重影响着药品生产的安全，影响着药品生产的安全，依次依次必须加以严格控制。必须加以严格控制。新版新版GMP对洁净区微生物的动态要求对洁净区微生物的动态要求08 三月 202331防范措施：防范措施：防范措施：防范措施：1.合理的厂房布局及高效的空气过滤系统合理的厂房布局及高效的空气过滤系统2.完善的洁净区日常卫生管理完善的洁净区日常卫生管理3.每天进行空气消毒每天进行空气消毒(臭氧、甲醛、过氧化氢熏蒸臭氧、甲醛、过氧化氢熏蒸)4.定期对洁净环境进行监测定期对洁净环境进行监测08 三月 202332微生物的作用及危害微生物的作用及危害 1.微生物的作用微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。类、抗生素、疫苗等。2.微生物的危害微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。等），均是由病原微生物引起的。从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。08 三月 202333微生物的类群和形态结构微生物的类群和形态结构 一、细菌一、细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。性繁殖的原核微生物，分布广泛。1.细菌的形态与结构细菌的形态与结构 （1）球菌球菌 多数球菌直径在多数球菌直径在1微米左右，外观呈球微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。排列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。（2）杆菌杆菌 形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。链状杆菌、球杆菌等。（3）螺形菌螺形菌 菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。螺杆菌。细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结胞膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。构。08 三月 202334球菌球菌(coccus)脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌双球菌双球菌(diplococcus)肺炎链球菌肺炎链球菌08 三月 202335链球菌链球菌(streptococcus)球菌球菌(coccus)08 三月 202336球菌球菌(coccus)葡萄球菌葡萄球菌(streptococcus)08 三月 202337球菌球菌(coccus)四联球菌四联球菌(tetrad)08 三月 202338球菌球菌(coccus)八叠球菌八叠球菌(sarcina)08 三月 202339杆菌杆菌(bacillus)不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌 3-10 m3-10 m大大中中大肠埃希菌大肠埃希菌 2-3 m2-3 m小小布鲁菌布鲁菌 0.6-1.5 m0.6-1.5 m08 三月 202340杆菌的形态多样杆菌的形态多样杆菌杆菌(bacillus)两端齐平炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌两端尖细白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌08 三月 202341杆菌杆菌(bacillus)杆菌的形态多样杆菌的形态多样分枝杆菌分枝杆菌双歧杆菌双歧杆菌08 三月 202342螺形菌螺形菌(spiral bacterium)弧菌弧菌螺菌螺菌螺杆菌螺杆菌08 三月 2023432 2、细菌的繁殖、细菌的繁殖、细菌的繁殖、细菌的繁殖 细菌生长速度很快，一般约细菌生长速度很快，一般约20min分分裂一次。若按此速度计算，细菌群体将庞裂一次。若按此速度计算，细菌群体将庞大到难以想象的程度。但事实上由于细菌大到难以想象的程度。但事实上由于细菌繁殖中营养物质的逐渐消耗，有害代谢产繁殖中营养物质的逐渐消耗，有害代谢产物的逐渐积累，细菌不可能始终保持高速物的逐渐积累，细菌不可能始终保持高速度的无限繁殖。经过一段时间后，细菌繁度的无限繁殖。经过一段时间后，细菌繁殖速度逐渐减慢，死亡菌数增多，活菌增殖速度逐渐减慢，死亡菌数增多，活菌增长率随之下降并趋于停滞。长率随之下降并趋于停滞。08 三月 202344微生物的生长规律微生物的生长规律微生物整个生长过程可以分微生物整个生长过程可以分为为4个阶段：个阶段：延滞期延滞期：细胞变大，细胞内细胞变大，细胞内RNA含量增高，含量增高，培养基不丰富培养基不丰富 时延滞期较长。时延滞期较长。对数期对数期：细胞分裂最快，代谢旺：细胞分裂最快，代谢旺盛，生长速率由营养成分决定。盛，生长速率由营养成分决定。稳定期稳定期：总体数量保持不变，开：总体数量保持不变，开始产生代谢产物或开始形成芽始产生代谢产物或开始形成芽孢。孢。衰亡期衰亡期：由于代谢毒素的积累，：由于代谢毒素的积累，死亡数超过新生数。死亡数超过新生数。最易处理期最易处理期08 三月 202345 细菌细菌：是一类：是一类细胞细而短、直径一般为细胞细而短、直径一般为0.55.0m，结，结构简单、细胞壁坚韧，以构简单、细胞壁坚韧，以二分裂二分裂方式无性繁殖的原核微生物，方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。生长最适温度为分布广泛。生长最适温度为3035，主要去除方法有紫外杀，主要去除方法有紫外杀菌法、滤膜过滤法及高温杀灭法等。菌法、滤膜过滤法及高温杀灭法等。个别细菌如：个别细菌如：嗜热脂肪芽孢杆菌嗜热脂肪芽孢杆菌，能在，能在121条件，可耐受条件，可耐受45min。灭菌柜验证中作为生物指示剂灭菌柜验证中作为生物指示剂最适合生长条件为最适合生长条件为556008 三月 202346二、真菌二、真菌真菌是一类有细胞壁，无叶绿素，以寄生或腐生真菌是一类有细胞壁，无叶绿素，以寄生或腐生方式生存，少数为单细胞，多数为多细胞，能进方式生存，少数为单细胞，多数为多细胞，能进行无性或有性繁殖的一类真核细胞型微生物。行无性或有性繁殖的一类真核细胞型微生物。真菌包括单细胞与多细胞两类。单细胞真菌呈圆真菌包括单细胞与多细胞两类。单细胞真菌呈圆形或卵圆形，称为形或卵圆形，称为酵母菌酵母菌；多细胞真菌由菌丝和；多细胞真菌由菌丝和孢子组成，并交织成团，称孢子组成，并交织成团，称丝状菌丝状菌或或霉菌霉菌。真菌生长的最适的温度为真菌生长的最适的温度为2228，最适的，最适的pH值为值为46。其繁殖能力强，但生长速度比细菌慢，。其繁殖能力强，但生长速度比细菌慢，常需常需1-4周才形成菌落。真菌对热的抵抗力不强，周才形成菌落。真菌对热的抵抗力不强，一般加热一般加热6070 1小时即被杀死，但对干燥、小时即被杀死，但对干燥、日光、紫外线和一些化学消毒剂有抵抗力，但对日光、紫外线和一些化学消毒剂有抵抗力，但对2.5碘酒、碘酒、10甲醛则较敏感。甲醛则较敏感。08 三月 202347三、病毒三、病毒病毒属非细胞型微生物，在自然界分布非常广泛，病毒属非细胞型微生物，在自然界分布非常广泛，可在人、动物、植物、真菌和细菌中寄居并引起可在人、动物、植物、真菌和细菌中寄居并引起感染。感染。病毒是体积最小、结构最简单的微生物，病毒是体积最小、结构最简单的微生物，它仅有一种核酸（它仅有一种核酸（DNA或或RNA）作其遗传物质。）作其遗传物质。病毒必须在宿主活细胞内寄生，依靠细胞提供的病毒必须在宿主活细胞内寄生，依靠细胞提供的能量、营养物质及生物大分子合成机制，完成病能量、营养物质及生物大分子合成机制，完成病毒的复制过程。毒的复制过程。病毒与人类的关系极为密切，人类的传染病约病毒与人类的关系极为密切，人类的传染病约75是由病毒引起的。有些病毒传染性强，可引起是由病毒引起的。有些病毒传染性强，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。世界大流行（如流感、艾滋病等）。08 三月 202348病毒猪流感病毒猪流感猪流感(Swine influenza，SI)是由是由A型流感病毒引起的一种急型流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病。性呼吸道传染病。H1N1亚型流感病毒亚型流感病毒 流感病毒属于正黏病毒科。流感病毒属于正黏病毒科。A型流感病毒可以感染多型流感病毒可以感染多种动物，包括许多禽类和种动物，包括许多禽类和哺乳动物。哺乳动物。禽流感病毒亚型主要为禽流感病毒亚型主要为H5N1、H9N2、H7N7 猪流感症状人感染猪流猪流感症状人感染猪流感后的症状与感冒类似，感后的症状与感冒类似，患者会出现发烧、咳嗽、患者会出现发烧、咳嗽、疲劳、食欲不振等。疲劳、食欲不振等。猪流感病毒病毒是最常见的致病病毒是最常见的致病微生物，人类传染病微生物，人类传染病中大约中大约75%是由病毒是由病毒引起的。引起的。乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒08 三月 202349肝炎病毒病毒性肝炎是危害人类健康的最严重的疾病之一。主要分为病毒性肝炎是危害人类健康的最严重的疾病之一。主要分为甲型、乙型、丙型、丁型。其中甲型肝炎病毒由消化道传甲型、乙型、丙型、丁型。其中甲型肝炎病毒由消化道传播，引起急性肝炎，不转为慢性肝炎或慢性携带者。乙型与播，引起急性肝炎，不转为慢性肝炎或慢性携带者。乙型与丙型肝炎病毒均由输血、血制品或注射器污染而传播，除急丙型肝炎病毒均由输血、血制品或注射器污染而传播，除急性肝炎外，可致慢性肝炎，并与肝硬化以及肝癌有关，故危性肝炎外，可致慢性肝炎，并与肝硬化以及肝癌有关，故危害性极为严重。丁型肝炎病毒必须在乙型肝炎病毒等辅助下害性极为严重。丁型肝炎病毒必须在乙型肝炎病毒等辅助下方能复制，故其传播途径与乙型肝炎病毒相同。方能复制，故其传播途径与乙型肝炎病毒相同。08 三月 2023501.甲型肝炎病毒（HAV）在体外抵抗力较强，在-20条件下保存数年，其传染性不变，能耐受5630分钟的温度及PH3的酸度。甲型肝炎病毒引起甲型肝炎，这种肝炎的传染源主要是病人。其病毒通常由病人粪便排出体外，通过被污染的手、水、食物、食具等传染，严重时会引起甲型肝炎流行。如1988年1月，上海市出现了较大规模的流行性甲型肝炎，主要原因是人们食用了被甲肝病毒污染的毛蚶。甲型肝炎病毒图08 三月 202351乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒2.乙型肝炎病毒（HBV）HBV在体外抵抗力很强，紫外线照射，加热604小时及一般浓度的化学消毒剂(如苯酚，硫柳汞等)均不能使之灭活，在干燥或冰冻环境下能生存数月到数年，加热60持续10小时，煮沸(100)20分钟，高压蒸汽12210分钟或过氧乙酸(05%)7.5分钟以上则可以灭活。传播途径主要为：血液、血制品传播，母婴传播。08 三月 202352.肝炎病毒常用的家庭消毒方法 肝炎病毒常用的家庭消毒方法有物理消毒法与药物消毒法两种。物理消毒法：1）高压蒸汽消毒法：通常采用98.066千帕压力与121-126C温度10-15分钟，可杀灭各型肝炎病毒；采用蒸笼蒸煮或家用高压锅，待冒气盖阀后20分钟，即可达到消毒效果2）煮沸消毒法：在100C的温度下煮1分钟，就能使乙、丙、丁、戊型及甲型肝炎病毒失去活力和传染性；煮沸15-20分钟以上，可将各型肝炎病毒杀灭。本法适合于食具、护理用具及棉织品的消毒。至于塑料制品、合成纤维及皮毛制品则不适合。新洁尔灭、氯已定（洗必泰）不能肯定，度米芬、来苏、石炭酸、米醋、熏醋对乙型肝炎病毒无作用。此外，肝炎患者的剩饭剩莫须有最好也要煮沸消毒后再弃去。3）阳光曝洒法：凡不能蒸煮的物品，则宜采用本法，一般曝晒6小时以上。4）焚烧法：患者污染并丢弃的杂物、一次性医护用品、垃圾（包括月经纸、手纸）等均应焚烧掉，以达彻底消毒之目的。08 三月 202353HIVHIV1.传染源和传播途径 HIV感染者是传染源，曾从血液、精液、阴道分泌液、眼泪、乳汁等分离得HIV。传播途径有：性传播：通过男性同性恋之间及异性间的性接触感染。血液传播：通过输血、血液制品或没有消毒好的注射器传播，静脉嗜毒者共用不经消毒的注射器和针头造成严重感染，据我国云南边境静脉嗜毒者感染率达60%。母婴传播：包括经胎盘、产道和哺乳方式传播。08 三月 202354病毒病毒呼吸道病毒、肠道病毒、肝炎病毒呼吸道病毒、肠道病毒、肝炎病毒虫媒病毒、疱疹病毒、逆转录病毒虫媒病毒、疱疹病毒、逆转录病毒HIV病毒腺病毒08 三月 202355热原与内毒素热原与内毒素许多细菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能产生热许多细菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能产生热原。原。热原是微量即可引起恒温动物体温异常升高热原是微量即可引起恒温动物体温异常升高的物质的总称。的物质的总称。主要物质为细菌内毒素、胞壁酰主要物质为细菌内毒素、胞壁酰二肽及其他抗原抗体复合物、半抗体原物质和某二肽及其他抗原抗体复合物、半抗体原物质和某些药物（