细菌菌落 计数.pptx

直接法血球记数板活菌染色：美蓝、吖啶橙、TTC间接法第1页/共10页细菌计数板和血球计数板都用来侧微生物的总菌数。血球计数板用来测较大微生物如酵母菌和霉菌孢子的总数，细菌计数板用来测细菌的总菌数。两种计数板的构造相似，不同的是细菌计数板的深度仅为血球计数板深度的1/5。直接法直接法血球记数板血球记数板第2页/共10页间间 接接 法法n平板菌落计数法(Colony-counting Methods)一个活菌在合适的培养基表面，逐渐生长成一个 肉眼可见的菌落（菌落形成单位，colony forming unit,CFU），从而得知原始活菌含量。涂布平板法Spread Plate浇注平板法Pour Plate第3页/共10页间间 接接 法法平板菌落计数法涂布平板法浇注平板法第4页/共10页方法：1.以无菌操作方法用灭菌吸管吸取 0.9 ml生理盐水，分别 加入6支灭菌EP管中。2.以无菌操作方法吸取0.1ml充分混匀的待检样本，注入盛有0.9ml灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:10稀释液。3.吸取1:10的稀释液0.1ml注入盛有0.9ml灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:100稀释液。按同法依次稀释成1:1000，1:10000稀释液等备用。（如此递增稀释一次，必须更换一支1ml灭菌吸管）4.用灭菌吸管取23个适宜稀释度的稀释菌液0.1ml，分别注入灭菌平皿内，每个稀释度重复做两个平板，涂布均匀后，置37，培养24-48h。123456样本10.1ml1234560.1ml0.1ml0.1ml0.1ml0.1ml0.1ml0.1ml0.1ml0.1ml第5页/共10页第6页/共10页适用领域：1.广泛用于生物制品检验(如活菌制剂)，以及食品、饮料和水(包括水源水)等的含菌指数或污染程度的检测。2.疾病诊断 *泌尿系感染性疾病的诊断-尿培养 3.细菌感染及药物治疗效果 *临床病人 *实验动物 第7页/共10页3、菌落计算方法、菌落计算方法（1）菌落计数方法）菌落计数方法 做做平平板板菌菌落落计计数数时时，可可用用肉肉眼眼观观查查，必必要要时时用用放放大大镜镜检检查查，以以防防遗遗漏漏。在在记记下下各各平平板板的的菌菌落落数数后后，求求出出同同稀稀释释度的各平板平均菌落总数。度的各平板平均菌落总数。（2）菌落计数的报告）菌落计数的报告平板菌落数的选择平板菌落数的选择 选取菌落数在选取菌落数在3030300300之间的平板作为菌落总数测定标之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布又很均匀，菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘即可计算半个平板后乘2 2以代表全皿菌落数。以代表全皿菌落数。第8页/共10页结果：总活细菌数（CFUs/ml）=某一稀释度的平均菌落数 10稀释度*注意事项见实验讲义稀释度稀释度1010-4-41010-5-51010-6-6菌落数菌落数1 12 2平均平均1 12 2平均平均1 12 2平均平均每毫升中每毫升中总活菌数总活菌数第9页/共10页感谢您的观看！第10页/共10页