抗双链DNA抗体(dsDNA抗体)检测及临床应用.pdf

龙源期刊网 http:/抗双链抗双链 DNADNA 抗体（抗体（dsDNAdsDNA 抗体）检测及临抗体）检测及临床应用床应用作者：周福利来源：医学信息2015 年第 02 期摘要：目的 探讨抗双链 DNA抗体（dsDNA抗体）检测在系统性红斑狼疮（SLE）诊断中的意义。方法 酶联免疫吸附法联合间接免疫荧光发检测抗双链DNA抗体（dsDNA抗体）。结果 SLE组、其他风湿病组和健康对照组抗双链DNA抗体水平比较，差异均有统计学意义（P关键词：SLE dsDNA抗体系统性红斑狼疮（SLE）：是一种自身免疫性疾病，它的发病与家族遗传、紫外线照射、体内雌激素水平、某些药物、食物及感染有关210。我们分析 96例 SLE患者抗双链 DNA抗体（dsDNA抗体）检测结果，以探讨抗双链DNA抗体（dsDNA抗体）在 SLE诊断治疗中的临床应用 1资料与方法 1.1一般资料 我院 2011年 10月2014年 3月风湿免疫科门诊及病房SLE患者 96例（SLE组），SLE诊断标准符合美国风湿病学会SLE分类标准（2009年），年龄 4572岁，平均年龄（558）岁，其中男 25例，女 71例；其他风湿疾病对照组40例，年龄 4065岁，平均年龄（458）岁，其中男 15例，女 25例；健康对照组为 100名健康体检者，年龄4070 岁，平均年龄（5010）岁，其中男 25例，女 75例。1.2方法和试剂 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测抗双链DNA抗体（dsDNA抗体），采用间接免疫荧光法检测抗双链DNA抗体（dsDNA抗体）。试剂盒由欧蒙公司提供。测定严格按试剂说明书操作。酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测抗双链 DNA抗体步骤：取 5l血清用 1.0ml样本缓冲液稀释并混匀，1：201倍稀释。按加样方案向相应微孔分别加100l标准品、阳性对照、阴性对照或稀释后的样本，加样时间不要超过15min。室温温育30min（+18到+25）。倒掉微孔板内液体，用稀释后的清洗缓冲液洗三次，300ul/次.滴加100ul酶结合物至每一微孔，室温温育30min（+18到+25）。倒掉微孔板内液体，如上述步骤清洗。滴加 100ul色原/底物液至每一微孔，室温避光温育30min（+18到+25）。倒掉微孔板内液体，如上述步骤清洗。滴加100ul终止也至每一微孔。450nm比色，参考波长620nm。采用欧蒙试剂，间接免疫荧光法（IIF）检测 dsDNA。加 1：10稀释的待检血清、阴性和阳性血清对照各 25ul到反应区。置于室温 30min后，放置 PBS洗液缸浸泡 5min。在每个反应