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【人教版】高三生物一轮复习：13.1传统发酵技术的应用、微生物的培养与应用ppt课件第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点第第1 1讲传统发酵技术的应用讲传统发酵技术的应用 微生物的培养与应用微生物的培养与应用第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点3第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点4第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三6第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三(2)果酒和果醋的制作流程挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒醋酸发酵果醋7第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三2.腐乳的制作(1)腐乳的制作原理菌种:起主要作用的是毛霉,其代谢类型是异养需氧型。菌种作用:毛霉等微生物能产生蛋白酶和脂肪酶等。蛋白酶能将蛋白质分解成小分子肽和氨基酸;脂肪酶能将脂肪水解为甘油和脂肪酸。(2)腐乳的制作流程:让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制。8第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三(3)影响腐乳品质的条件盐:析出豆腐中的水,抑制微生物的生长。酒:卤汤中酒的含量控制在12%左右。酒可以抑制微生物的生长,同时使腐乳具有独特的香味。香辛料:既可调制腐乳的风味,又具有防腐杀菌的作用。其他:含水量、发酵温度、发酵时间等。9第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三3.制作泡菜并检测亚硝酸盐的含量(1)泡菜的制作原理在无氧条件下,乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。(2)泡菜的制作流程10第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三(3)操作关键选择气密性好的泡菜坛,以保证无氧条件,防止杂菌污染。腌制条件:控制腌制的时间、温度和食盐的用量。(4)测定亚硝酸盐含量的原理和操作流程亚硝酸盐与人体健康的关系:当摄入总量较多时,可引起中毒或死亡;在特定条件下可转化为致癌物亚硝胺。亚硝酸盐含量的测定原理:+对氨基苯磺酸发生重氮化反应后与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。操作流程:配制溶液制备标准显色液制备样品处理液比色。11第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三 判一判(1)在果酒自然发酵中,需人工添加酵母菌种。()(2)在葡萄酒制作中,采摘的葡萄应反复冲洗,且要先除枝梗再冲洗。()(3)在果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小,果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长。()(4)在果酒和果醋制作过程中,果酒的整个制作过程是在缺氧条件下进行的,而果醋整个制作过程一直处于有氧条件下。()(5)与果醋、果酒制作相比,腐乳的制作所需要的适宜温度较高,所用菌种为乳酸菌。()(6)在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与,加盐和加酒都能抑制微生物的生长。()12第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三(7)泡菜制作的菌种主要是醋酸菌。()(8)泡菜制作的前期通氧,后期应严格厌氧。()(9)用酵母菌发酵酿制果酒,选择酸性重铬酸钾检测产生的酒精。(2015四川)()13第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三答案及解析(1)提示:葡萄表面有天然酵母菌存在,因此果酒自然发酵时无需添加菌种。(2)提示:葡萄应先冲洗再去枝梗,以免去枝梗时葡萄破损,被杂菌污染,且不应反复冲洗。(3)(4)提示:果酒发酵时应先通氧,使酵母菌大量增殖;再控制无氧环境,进行酒精发酵。(5)提示:腐乳制作所需的适宜温度较低,使用的菌种为毛霉等。(6)(7)提示:泡菜制作使用的菌种为乳酸菌。(8)提示:制作泡菜应在无氧条件下进行。(9)14第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三1.与传统发酵有关的几类微生物的比较 15第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三2.果酒和果醋制作的注意事项(1)材料的选择与处理选择新鲜的葡萄,榨汁前先将葡萄冲洗,冲洗后除去枝梗,以防葡萄汁流失及被杂菌污染。冲洗以洗去灰尘为目的,且不要冲洗时间过长,以防洗去野生型酵母菌。(2)防止发酵液被污染榨汁机要清洗干净并晾干。发酵瓶要洗净并用体积分数为70%的酒精消毒,或用洗洁精洗涤。装入葡萄汁后要封闭充气口。16第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三(3)控制好发酵的条件葡萄汁装入发酵瓶时,要留约1/3的空间,目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖,耗尽O2后再进行酒精发酵;防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液溢出。严格控制温度:1825利于酵母菌的繁殖和酒精发酵;3035利于醋酸菌的繁殖和醋酸发酵。充气:酒精发酵为无氧发酵,需封闭充气口;醋酸发酵为有氧发酵,需适时通过充气口充气。17第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三(4)制作果酒和果醋的装置图分析各部位的作用a.充气口:在醋酸发酵时连接充气泵进行充气。b.排气口:排出酒精发酵时产生的CO2;是与排气管相连的长而弯曲的胶管,可有效阻止空气中微生物的进入,避免来自空气的污染。c.出料口:用来取样。该装置的使用方法使用该装置制作果酒时,应该关闭充气口;制作果醋时,应将充气口连接充气泵,通入空气。18第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三4.泡菜制作的注意事项(1)材料的选择及用量蔬菜应新鲜,若放置时间过长,蔬菜中的硝酸盐易被还原成亚硝酸盐。清水和盐的质量比为41,盐水要煮沸后冷却。煮沸有两大作用,一是除去水中的氧气,二是灭菌。(2)防止杂菌污染:每次取样用具要洗净,要迅速封口。(3)氧气需求要选用火候好、无裂纹、无砂眼、坛沿深、盖子吻合好的泡菜坛。盖好坛盖后,在盖子周围注满水,并经常补水,以创造无氧环境,有利于乳酸菌发酵,防止蔬菜腐烂。泡菜坛内要注满水,以保证乳酸菌发酵所需要的无氧环境。(4)温度:发酵过程中温度控制在室温即可,最好在2636。温度过高则易滋生杂菌,温度过低则发酵时间延长。19第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三例题下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题。果酒、果醋制作流程20第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三(1)完成图1中的实验流程,则矩形框内应为。(2)果酒和果醋的制作分别利用了和(填生物名称)两种微生物。由果酒转变成果醋的制作时,需要改变的环境条件是和,主要原因是(答出两点)。(3)图2装置中的充气口在过程中要关闭,而排气口在该过程中应开放,目的是排出产生的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是。(4)果汁发酵后是否有酒精产生,可用来检验,在酸性条件下呈现色证明有酒精产生。(5)葡萄是否需要灭菌?为什么?。21第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三课堂在线1.果酒和果醋的制作分别利用了什么微生物?原理分别是什么?2.果酒和果醋的制作在发酵条件上有什么区别?3.图2装置中的排气口有什么作用?4.葡萄酒自然发酵利用的菌种来源是什么?提示:制作果酒利用了酵母菌的无氧呼吸产生酒精的原理,制作果醋利用了醋酸菌有氧呼吸产生醋酸的原理。提示:酵母菌是兼性厌氧菌,制作果酒时应先通气使酵母菌大量增殖,再密封发酵产生酒精;酵母菌的适宜生长温度为1825。醋酸菌是好氧细菌,只有当氧气充足时,才能进行旺盛的生命活动产生醋酸;醋酸菌的最适生长温度为3035。提示:酵母菌酒精发酵时会产生CO2,可通过排气口排出。提示:葡萄酒的自然发酵利用的是附着在葡萄皮上的酵母菌。22第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三答题步骤第一步,信息提取(提炼题干信息,搜索知识记忆)。回忆果酒和果醋的制作原理及发酵条件;分析果酒和果醋制作的发酵装置,理解其使用时的区别。第二步,找准题眼(明确作答方向)。果酒和果醋的制作过程中化学反应的不同及对氧气需求上的差异是发酵装置在使用时有所区别的原因,因此理解果酒和果醋制作的原理是解答此题的关键。第三步,规范作答(易错、易混提示)。果酒的自然发酵利用的是附着在葡萄皮上的酵母菌,而非添加的人工菌种,故葡萄不需要灭菌。23第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三【答案】(1)醋酸发酵(2)酵母菌醋酸菌通入氧气温度调至3035醋酸菌是好氧细菌,只有当氧气充足时,才能进行旺盛的生命活动;醋酸菌的最适生长温度为3035(3)酒精发酵酵母菌无氧呼吸二氧化碳避免空气中其他微生物进入发酵装置(防止空气中的微生物污染)(4)重铬酸钾灰绿(5)不需要;在葡萄酒的自然发酵过程中,起主要作用的微生物是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌,葡萄灭菌会杀死葡萄皮上附着的酵母菌,使发酵不能进行24第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三对应训练1回答下列有关泡菜制作的问题。(1)制作泡菜时,所用盐水需煮沸,其目的是。为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的作用是。(2)泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的中。(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有、和等。(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内,泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是,原因是。杀灭杂菌增加乳酸菌数量无氧呼吸细胞质温度腌制时间食盐用量乳酸菌数量增多,杂菌数量减少乳酸菌比杂菌更为耐酸25第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三解析:(1)盐水中可能存在微生物,因此需要灭菌;制作泡菜时,加入陈泡菜液,可增加乳酸菌数量。(2)乳酸菌进行无氧呼吸,该过程在细胞质中进行。(3)在泡菜制作过程中,要注意控制腌制时间、温度和食盐用量。温度过高、食盐用量不足、腌制时间过短,都会导致亚硝酸盐含量增加。(4)开始时,乳酸菌和其他杂菌都繁殖,随着时间延长,乳酸菌产生的乳酸逐渐增加,抑制了杂菌繁殖,泡菜坛中乳酸菌逐渐增多,其他杂菌逐渐减少。26第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三对应训练2(2015广东高考理综)泡菜是我国的传统食品之一,但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害。某兴趣小组准备参加“科技创新大赛”,查阅资料得到下图。27第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三(1)制作泡菜时,泡菜坛一般用水密封,目的是,乳酸菌发酵第一阶段的产物有。(2)据左下图,与第3天相比,第8天后的泡菜更适于食用,因为后者;pH值呈下降趋势,原因是。(3)该小组得到一株“优选”乳酸菌(亚硝酸盐还原酶活力比普通乳酸菌高5倍),拟参照资料的实验方案和食盐浓度(4%10%),探究与普通乳酸菌相比用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的高低,并确定其最适条件,请你设计一个实验结果记录表,并推测实验结论。隔绝空气丙酮酸、H、ATP亚硝酸盐含量降低乳酸含量增加28第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三答案:推测结论:随着食盐浓度的升高,发酵产生的亚硝酸盐浓度越高,“优选”乳酸菌降低泡菜中亚硝酸盐效果更明显。29第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点考点一考点二自主梳理核心突破典例精析考点三解析:本题考查泡菜制作过程中亚硝酸盐含量变化的相关实验。(1)制作泡菜利用乳酸菌的无氧呼吸,所以泡菜坛要用水封,目的是隔绝空气,创造无氧环境。乳酸菌发酵第一阶段与有氧呼吸第一阶段相同,产物有丙酮酸、H和ATP。(2)由题图知随着发酵时间延长,亚硝酸盐含量先升高,后降低,由图知第8天较第3天亚硝酸盐含量低,更适合食用。由于乳酸菌进行无氧呼吸,导致乳酸含量增加,所以pH值降低。(3)设计表格时要注意对两种不同菌种在相同食盐浓度下、同一时间点的亚硝酸盐含量进行比较。30第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三微生物的分离与培养1.培养基(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。(2)成分:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。(3)分类:液体培养基和固体培养基(液体培养基中加入凝固剂琼脂即为固体培养基)。31第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三2.无菌技术(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。(2)关键:防止外来杂菌的入侵。(3)措施(连一连)32第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三3.纯化大肠杆菌以及菌种的保藏(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤:计算称量溶化灭菌倒平板。(2)纯化大肠杆菌原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。方法:平板划线法、稀释涂布平板法。(3)菌种的保藏短期保存:固体斜面培养基上4保存,菌种易被污染或产生变异。长期保存:甘油瓶中-20在冷冻箱中保藏。33第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三判一判(1)培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分。()(2)在配制培养基时,除满足营养需求外,还应考虑pH、O2及特殊营养物质的需求。()34第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三1.培养基的种类(1)按物理性质分类35第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三(2)按功能分类36第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三2.培养基的成分 37第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三38第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三3.培养基的配制原则及注意事项(1)配制原则目的要明确:根据微生物的种类、培养目的选择不同的原料配制培养基。营养要协调:配制培养基时要注意各营养物质的浓度和比例。pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范围不同。(2)配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项倒平板的温度一般在50左右,温度过高会烫手,温度过低培养基又会凝固。平板冷凝后需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基而造成污染。39第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三4.微生物的纯化培养平板划线法与稀释涂布平板法40第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三41第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三42第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三例题苯酚(C6H5OH)是广泛存在于化工行业废水中的一种污染物。为了分离和纯化高效分解苯酚的细菌,科研人员进行了如图1所示的实验(实验中的LB培养基能使菌种成倍扩增)。请分析回答下列问题。43第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三(1)该实验中等可放入干热灭菌箱中灭菌。与步骤中培养基的成分相比,步骤中培养基成分的最大区别是以苯酚作为唯一的;步骤中的培养基成为固体的原因是添加了。(2)若经步骤培养后菌落的分布如图2,则接种时甲、乙、丙三个区域划线的操作顺序依次是。多次划线后,最终可得到由个细胞繁殖而来的单个菌落。(3)接种时,在第一区域划线后须将接种环后再划线,在第二次划线时须从第一次划线的末端开始,这样做的目的是。(4)步骤的目的是;经过步骤培养后,应从残余苯酚浓度的培养瓶中再分离、培养目的菌株,若需将获得的菌种长期保存,常采用的方法。44第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三课堂在线1.干热灭菌法适用于哪些灭菌对象?2.平板划线法如何实现对微生物的分离?提示:干热灭菌包括干热空气灭菌和火焰灼烧灭菌等以干热方法杀死细菌达到灭菌的目的的灭菌方法。本法适用于干燥粉末、凡士林、油脂的灭菌,也适用于玻璃器皿(如试管、培养皿、吸管、注射器)和金属器具(如测定效价的钢管、针头、镊子、剪刀等)的灭菌。提示:先用接种环挑取标本在甲区划线数条,将细菌涂布于琼脂平板,再依次于乙、丙区依次划线,每划完一个区域,均将接种环烧灼灭菌1次,冷却后再划下一区域,每一区域的划线均与上一区域的划线交接13次,最终可在丙区分离到单个菌落。45第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三3.平板划线法操作中为什么第一次划线前、每次划线后都需要灼烧接种环?4.步骤中使用的培养基有什么特点,能起到什么作用?提示:第一次划线前灼烧接种环是为了杀死接种环上的微生物,避免杂菌污染培养物;此后每次划线前灼烧接种环是为了杀死残留菌种,保证每次划线菌种来自上次划线末端;最后一次划线后灼烧接种环是为了防止微生物污染环境和感染操作者。提示:步骤中使用的培养基中的唯一碳源是苯酚,因此可将分解苯酚的细菌分离出来。经培养后培养基中的苯酚含量越低,说明细菌分解苯酚的能力越强。46第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三答题步骤第一步,信息提取(提炼题干信息,搜索知识记忆)。回忆平板划线法的操作步骤及注意事项,理解用此法分离微生物的原理。第二步,找准题眼(明确作答方向)。灼烧接种环的目的是杀灭接种环上的微生物,第一次接种前的灼烧是为了消灭杂菌,第二次及之后每次接种前的灼烧是为了杀死上一次接种时的残留菌种,保证每次划线时的菌种来自上次划线的末端。第三步,规范作答(易错、易混提示)。无机固体培养基加苯酚后,苯酚是培养基中的唯一碳源,可将分解苯酚的细菌分离出来,且经培养后培养基中的苯酚含量越低,说明细菌分解苯酚的能力越强。47第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三【答案】(1)锥形瓶、培养皿和接种环碳源琼脂(2)甲、乙、丙一(3)灼烧、冷却(从上一区域)获取菌种(4)分离纯化能分解苯酚的菌株最低甘油管藏48第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三对应训练莠去津是一种含氮农药,在土壤中不易降解,为修复被其污染的土壤,可按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。请据图回答下列问题(已知莠去津在水中溶解度低,含过量莠去津的固体培养基不透明)。49第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三(1)由图推断,从A瓶到C瓶培养的过程称为,目的是。(2)在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行,将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和法,从图中看本实验采用的是(填“前者”或“后者”)。(3)一段时间后,培养基出现无透明带和有透明带两种菌落,我们筛选的目的菌是菌落中的细菌,该菌落生长所需的氮元素主要来源于。(4)为弄清固体培养基中的非目的菌落是来自C瓶菌种还是培养基,应如何设置对照组?。选择培养初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并提高其密度梯度稀释稀释涂布平板后者有透明带莠去津配制的培养基灭菌后不接种菌种,与实验组放在相同条件下培养50第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三解析:(1)A瓶、B瓶和C瓶培养液中含有过量的莠去津,不含其他氮源,其目的是从中选择出能适应该环境的细菌,并进行扩大培养。(2)由于C瓶中细菌的浓度高,所以在接种到固体培养基之前,要进行梯度稀释。将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和稀释涂布平板法;从平板上菌落的分布特征可以看出本实验采用的是稀释涂布平板法。(3)有透明带,说明该细菌能分解莠去津,所以是我们筛选的目的菌;莠去津是一种含氮农药,所以该菌落生长所需的氮元素主要来源于莠去津。(4)对照组配制的培养基灭菌后不接种菌种,与实验组放在相同条件下培养,如果此培养基上能长出非目的菌,说明非目的菌来自培养基;反之,则非目的菌来自C瓶菌种。51第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三微生物的筛选和计数1.土壤中分解尿素的细菌的分离和计数(1)菌种筛选:使用尿素是唯一氮源的选择培养基培养。(2)统计菌落数目:常用方法有稀释涂布平板法、显微镜直接计数法。(3)细菌分离与计数的实验流程:土壤取样配制培养基微生物的培养与观察细菌的计数。52第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三2.分解纤维素的微生物的分离(1)纤维素酶组成:纤维素酶是一种复合酶,它包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。作用53第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三(2)菌种筛选方法:刚果红染色法。原理即使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基,根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。54第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三(3)筛选流程土壤取样:富含纤维素的环境选择培养:用选择培养基培养,以增加纤维素分解菌的数量梯度稀释涂布平板:将样品涂布于鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落:产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈55第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三(4)进一步鉴定为确定得到的菌是否是纤维素分解菌,还需进行发酵产纤维素酶的实验。测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。56第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三判一判(1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。()(2)统计样品中的活菌一般用平板划线法。()(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变蓝,则说明筛选到分解尿素的细菌。()(4)刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。()(5)纤维素酶只包括三种组分:C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。()(6)筛选分解纤维素的微生物的培养基是以纤维素为唯一碳源的选择培养基。()57第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三答案及解析(1)(2)提示:统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。(3)提示:若培养基中有分解尿素的细菌,加入酚红指示剂后会变红。(4)(5)提示:纤维素酶至少包括三种组分:C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。(6)58第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三1.筛选菌株(1)原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。(2)刚果红染色的两种方法的比较。59第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三60第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三2.统计菌落数目的方法(1)显微镜直接计数法原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积样品中的微生物数量。方法:用计数板计数。缺点:不能区分死菌与活菌。61第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三(2)间接计数法(活菌计数法)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。操作:设置重复组,增强实验的说服力与准确性;为了保证结果准确,一般选择菌落数在30300的平板进行计数。计算公式:每克样品中的菌株数=(CV)M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。62第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三3.设置对照(1)判断培养基中是否有杂菌污染,需将未接种的培养基同时进行培养。(2)判断选择培养基是否具有筛选作用,需设立基础培养基进行接种后培养,观察两种培养基上的菌落数目,进行对比得出结论。63第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三例题(2015山东烟台模拟)在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可导致土壤污染。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。64第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行处理。(2)要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、用途方面来看,上述培养皿中培养基的特点是。不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是。(3)接种技术的核心是。在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是或有氧条件抑制了这些细菌的生长。65第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三(4)在培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是,有透明带菌落利用的氮源主要是,据此可筛选出目的菌。实验结果如右图显示的AE五种菌株中,是最理想菌株。66第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三课堂在线1.稀释涂布平板法中怎样计算细菌数目?2.为分离能降解该除草剂的细菌,所使用的培养基应该满足什么要求?3.透明带是怎样形成的?透明带的大小反映了什么?提示:每克样品中的菌株数=(CV)M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。提示:为分离能降解该除草剂的细菌,应使用以该除草剂为唯一氮源的培养基,即在无氮培养基中添加该除草剂。提示:细菌分解除草剂从而在培养基上形成透明带,透明带越大说明细菌的分解能力越强。67第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三4.无透明带菌落能从培养基中获得氮源吗?提示:本实验使用的是以该除草剂为唯一氮源的培养基,不形成透明带说明该部位的细菌不能分解该除草剂,不能从培养基中获得氮源,只能以空气中的氮气为氮源。68第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三答题步骤第一步,信息提取(提炼题干信息,搜索知识记忆)。回忆稀释涂布平板法的操作步骤,进而理解稀释涂布平板法中细菌数目的计算方法;理解选择培养基的筛选原理。第二步,找准题眼(明确作答方向)。以该除草剂为唯一氮源的培养基中,透明带的有无反映了细菌有无分解能力,透明带的大小反映了细菌分解能力的强弱。第三步,规范作答(易错、易混提示)。氮源除来自培养基外,还可来自空气。69第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三【答案】(1)梯度稀释(2)在无氮培养基中添加了该除草剂调pH(3)防止杂菌污染,保证培养物的纯度稀释获得单个菌落培养基中缺少这些细菌可利用的氮源(4)氮气该除草剂E70第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三对应训练烧伤病人容易感染绿脓杆菌,引起化脓性感染,比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,从病人身上获取少量样本,按照一定的实验步骤操作,以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。(1)获取绿脓杆菌单菌落:配制适于绿脓杆菌生长的培养基,培养基中的营养成分一般含有、水和无机盐,调节pH至7,灭菌处理,待培养基冷却至50时,在附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。碳源氮源酒精灯火焰71第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性:取该单菌落适当稀释,用法接种于固体培养基表面,使其均匀生长,布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的同大小的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,适宜条件培养一段时间,结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈,这说明绿脓杆菌对上述抗生素;含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小,这说明_;含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小,且比阿培南透明圈中出现了一个菌落,请推测此菌落产生的可能原因:一是,二是_。(3)根据上述实验结果,为达到抗绿脓杆菌的目的,对于该患者来说最好应选用抗生素。涂布敏感绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比对美罗培南弱杂菌污染抗比阿培南的绿脓杆菌(或绿脓杆菌产生耐药性突变)形成的菌落美罗培南72第第1313单元单元第第1讲传统发酵技酵技术的的应用微生物的培养与用微生物的培养与应用用考情概览核心考点自主梳理核心突破典例精析考点一考点二考点三解析:(1)培养基的成分一般都含有碳源、氮源、水和无机盐;为了防止杂菌污染应该在酒精灯火焰附近倒平板。(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性时,如果含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈,说明绿脓杆菌对比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都敏感;如果含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小,则说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比对美罗培南弱;如果比阿培南透明圈中出现了一个菌落,可能的原因是杂菌污染,或者是绿脓杆菌的耐药性突变个体形成的菌落。(3)分析(2)中的实验结果可知,该病人体内的绿脓杆菌对美罗培南最敏感,美罗培南是该病人首选的抗生素。73