染色体实验室质量控制.ppt

染色体实验室质量控制一、室内质控：主要是培养基，常用试剂的室内质控。二、室间质控：定期与开展染色体检查的实验室合作，对同一血液标本进行实验对比，对 实验中的不足之处进行改进。一、室内质控1、外周血培养基质控程序 目的：新购买的培养基需要做预实验以检测培养基的质量，避免因试剂的质量而影响实验结果。操作程序：1）取新购买的培养基，接种新鲜的外周血标本，每个标本接种两瓶培养基，每瓶培养基中接种.。2）将接种好的培养基放入，培养箱中，培养。3）培养结束前小时，加秋水仙素处理。4）收获细胞。5）将收获的细胞沉淀配成细胞悬液进行滴片，滴好的片放入烘箱中，烘烤。6）胰酶消化，吉姆萨染色。7）将玻片烘干后镜检观察。注意事项：接种过程中注意无菌操作，以免细菌污染导致实验结果异常，影响对培养基质量的判断。2、秋水仙素质控程序目的：新购买的秋水仙素需要做预实验以检测秋水仙素的质量，避免因试剂的质量而影响实验结果。操作程序：1）取培养基，接种新鲜的外周血标本，每个标本接种两瓶培养基，每瓶培养基中接种.2）将接种好的培养基放入，培养箱中，培养。3）培养结束前小时，加新购买的秋水仙素处理。4）收获细胞。5）将收获的细胞沉淀配成细胞悬液进行滴片，滴好的片放入烘箱中，烘烤。6）胰酶消化，吉姆萨染色。7）将玻片烘干后镜检观察。注意事项：秋水仙素处理时要注意加入秋水仙素的量和作用时间。3、固定液质控程序目的：新购买的甲醇和乙酸需要做预实验以检测试剂的质量，避免因试剂的质量而影响实验结果。操作程序：在收获细胞的实验过程中使用新的固定液，制片后分析固定液的效果。1）按甲醇：乙酸=3:1比例配置固定液。2）预固定：加入固定液，固定5min。3）第一次固定：加入8ml固定液，固定30min。4)第二次固定：加入8ml固定液，固定30min。5)配置细胞悬液滴片，80烘烤3h。6)胰酶消化，吉姆萨染色。7)将玻片烘干后镜检观察。8)镜下观察细胞核型较多，染色体形态规则，分布均匀，条带清晰，则固定液效果良好，可以进行正常实验。4、胰胰酶质控程序控程序目的：新配置的胰酶需要做预实验以检测胰酶的质量，避免因试剂的质量而影响实验结果。操作程序：1）配置胰酶工作液（工作液浓度：42ml生理盐水+8ml0.25%胰酶储存液）2）配置吉姆萨染液（储存液用蒸馏水1：10稀释）3）将烘烤好的玻片用胰酶消化，吉姆萨染色。4）将玻片烘干后镜下观察5）镜下观察染色体形态规则，条带清晰，则胰酶效果良好，可以进行正常实验。吉姆吉姆萨染液染液质控程序控程序目的：新配置的吉姆萨染液需要做预实验以检测吉姆萨染液的效果，避免因试剂的质量而影响实验结果。操作程序：1）配置吉姆萨工作液:将吉姆萨染液储存液用蒸馏水1：10稀释。2）将经胰酶消化的玻片放入染缸中染色，一般染色3-5分钟。3）自来水冲洗干净后放入烤箱中烘干。4）镜下观察：细胞着色均匀，染色体的条带清晰，则染液的效果良好，可以进行正常实验。4、室内质控的失控处理在试剂的质控中，若发现试剂的使用效果不好，应重新配制，如果使用的是成品，应立即联系厂家更换产品，严重的要考虑更换厂家。对每一批新到的、新配制的试剂，都必须先做预实验，检测效果可以后才可以使用。二、室间质控为了检测本科室实验方法的准确性，可重复性，实验室必须定期与其它实验室进行室间质控。操作程序：1、随即选取本实验室的几份新鲜血液标本送检其它实验室，进行细胞培养，制片，G显带分析。2、本实验室同样对这几份标本进行细胞培养，制片，G显带分析。3、对每一份标本分析两个实验室的结果，从细胞的形态，染色体的形态，条带等各方面进行分析。4、通过室间质控定期检验本实验室的准确性。三、常见差错处理1、染色体检测的血液标本，都需肝素钠抗凝，如用其它抗凝剂抗凝，需通知相关人员予以重新采集标本，并在标本接收和报告单发放记录本及不合格标本登记本上记录存档；2、凡是待测定的血液标本有凝血的情况，应通知相关人员予以重新采集标本，并在标本接收和报告单发放记录本及不合格标本登记本上记录存档；3、凡是待测定的血液标本有血渗出的情况，应通知相关人员予以重新采集标本，并在标本接收和报告单发放记录本及不合格标本登记本上记录存档；4、染色体标本需严格无菌操作，采用经高温高压消毒的容器盛装，如标本送检不规范，应通知相关人予以重新采集标本，并在标本接收和报告单发放记录本及不合格标本登记本上记录存档；5、经查对标本的病人姓名、年龄、性别、住院号、床号、及检验号等不相符者，应通知相关人员予以重新采集标本，并在标本接收和报告单发放记录本及不合格标本登记本上记录存档。6、有的标本片，分裂相很多，但染色体“瘦小”，是不是培养液营养不良引起？淋巴细胞一定要在良好的营养环境中才能生长增殖，分裂相多，说明了淋巴细胞生长旺盛，染色体“瘦小”，是因为在制片过程中，染色体的蛋白结构发生异固缩造成的，起因可考虑为以下几个原因：秋水仙素浓度是否过高，或处理时间是否过长？加固定液的速度不要过快，有时瞬间的固定，会使蛋白结构产生固缩现象。固定液中的甲醇、冰醋酸是否有质量上的改变。可以适当加大固定液中的冰醋酸的比例，如甲醇冰醋酸7、为什么外周血培养过程中有时会出现凝血现象？在实验过程中下列原因可能会导致培养后的血液出现凝血现象：培养液中的PHA含量过高。培养液中的肝素使用量不足或效价下降。接种后，没有立即将外周血与培养液充分摇匀。8、为什么外周血培养有时会出现溶血情况？在实验过程中下列原因可能会导致培养后的外周血溶血：、细菌污染。、PHA和肝素过量。、外周血样品不新鲜。9、为什么有个别样品出现不明原因的无分裂相的现象？由于有个别病人可能服用过抑制白细胞分裂增殖的药品（如白血病病人），这类病人的样品往往经培养后，白细胞仍受到药物抑制而不进行分裂增殖，因此标本片很难找到分裂相，建议停药一个月以上再作染色体检查。