医学实验室生物安全防护(详细)教案资料.ppt

医学实验室生物安全防护(详细)BIOHAZARDBIOHAZARD生物危害标识生物危害标识动物实验中的生物安全事故动物实验中的生物安全事故动物约有动物约有200200种传染病、种传染病、8080种寄生虫病，种寄生虫病，其中半数可以感染给人其中半数可以感染给人动物感染实验，有病原体随尿粪、唾液动物感染实验，有病原体随尿粪、唾液排出，有感染性气溶胶扩散的危险排出，有感染性气溶胶扩散的危险剖检动物时，有接触病原体的危险，还剖检动物时，有接触病原体的危险，还可能被动物咬伤或注射器、手术刀的创可能被动物咬伤或注射器、手术刀的创伤等伤等肿瘤病毒引起的潜在致癌性等生物危害肿瘤病毒引起的潜在致癌性等生物危害国内外曾多次发生因饲养野鼠或大白鼠而国内外曾多次发生因饲养野鼠或大白鼠而发生肾综合征出血热流行发生肾综合征出血热流行19991999年广州中医药大学博士后张某从事年广州中医药大学博士后张某从事“九五九五”国家攻关课题国家攻关课题“补肾法治疗老年性补肾法治疗老年性痴呆痴呆”的实验时接触大鼠，的实验时接触大鼠，3 3个月后感染流个月后感染流行性出血热，行性出血热，20032003年被诊断为肾功能衰竭，年被诊断为肾功能衰竭，20062006年进行肾移植手术年进行肾移植手术20022002年年,湖北省药检学校的一名毕业生在某湖北省药检学校的一名毕业生在某药厂从事动物实验工作，由于接触了带出药厂从事动物实验工作，由于接触了带出血热病毒的实验动物而感染流行性出血热血热病毒的实验动物而感染流行性出血热不治死亡不治死亡20012001年年6 6月月，北北京京发发生生了了因因使使用用质质量量不不合合格格实实验验动动物物和和动动物物实实验验不不规规范范致致使使鼠鼠源源性性人人兽兽共共患患病病流流行行性性出出血血热热感感染染：一一名名院院士士死死亡亡和和700700多多师师生生紧紧急预防接种急预防接种20062006年年，东东北北三三省省由由于于个个体体户户养养殖殖、贩贩运运不不合合格格实实验验动动物物，导导致致几几十十名名教教学学科科研研人人员员感感染染流流行行性性出血热出血热广广东东省省，19901990年年和和19971997年年分分别别出出现现因因使使用用不不合合格格实验动物而感染人畜共患病的严重生物安全事故实验动物而感染人畜共患病的严重生物安全事故SARSSARS病毒蛋白模型病毒蛋白模型病毒蛋白模型病毒蛋白模型HIVHIV病毒病毒病毒病毒生物安全生物安全防范处理防范处理微生物微生物及其及其毒素毒素对人体危对人体危害的综合性措施害的综合性措施危害的来源：危害的来源：生物实验室生物实验室 生物恐怖活动生物恐怖活动实验室生物安全防护实验室生物安全防护实实验验室室工工作作人人员员所所处处理理的的实实验验对对象象含含有有致致病病的的微微生生物物及及其其毒毒素素时时，通通过过在在实实验验室室设设计计建建造造、使使用用个个体体防防护护装装置置、严严格格遵遵从从标标准准化化的的工工作作及及操操作作程程序序和和规规程程等等方方面面采采取取综综合合措措施施，确确保保实实验验室室工工作作人人员员不不受受实实验验对象侵染，确保周围环境不受其污染对象侵染，确保周围环境不受其污染生物安全的重要性应对公共卫生突发事件的需要应对公共卫生突发事件的需要防止外来生物危险因子侵入的需要防止外来生物危险因子侵入的需要实验室工作的需要实验室工作的需要防止医院感染的需要防止医院感染的需要防止人畜共患病的需要防止人畜共患病的需要反生物恐怖的需要反生物恐怖的需要生物安全的内容生物安全的内容生物危险度的分级生物危险度的分级生物危险度的分级生物危险度的分级生物安全分级生物安全分级生物安全分级生物安全分级生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室实验室设备实验室设备实验室设备实验室设备生物安全管理和操作技术生物安全管理和操作技术生物安全管理和操作技术生物安全管理和操作技术个人生物安全防护装备个人生物安全防护装备个人生物安全防护装备个人生物安全防护装备卫生保健和医学监测卫生保健和医学监测卫生保健和医学监测卫生保健和医学监测生物危险（生物危险（risk）的分级）的分级I级：个体和群体低危险级：个体和群体低危险II级：中等个体危险，有限群体危险级：中等个体危险，有限群体危险III级：高个体危险，低群体危险级：高个体危险，低群体危险IV级：高度的个体和群体危险级：高度的个体和群体危险当实验室使用传染性或有潜在传染性材料前，必须进行微当实验室使用传染性或有潜在传染性材料前，必须进行微当实验室使用传染性或有潜在传染性材料前，必须进行微当实验室使用传染性或有潜在传染性材料前，必须进行微生物危害评估。生物危害评估。生物危害评估。生物危害评估。应依据传染性微生物致病能力的程度、传播应依据传染性微生物致病能力的程度、传播应依据传染性微生物致病能力的程度、传播应依据传染性微生物致病能力的程度、传播途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实验对象途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实验对象途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实验对象途径、稳定性、感染剂量、操作时的浓度和规模、实验对象的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防和治疗方的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防和治疗方的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防和治疗方的来源、是否有动物实验数据、是否有有效的预防和治疗方法等诸因素进行微生物危害评估法等诸因素进行微生物危害评估法等诸因素进行微生物危害评估法等诸因素进行微生物危害评估 通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生物安通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生物安通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生物安通过微生物危害评估确定对象微生物应在哪一级的生物安全防护实验室中进行操作全防护实验室中进行操作全防护实验室中进行操作全防护实验室中进行操作 根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制度和紧急事故处理办法，形成书面文件并严格遵守执行度和紧急事故处理办法，形成书面文件并严格遵守执行度和紧急事故处理办法，形成书面文件并严格遵守执行度和紧急事故处理办法，形成书面文件并严格遵守执行微生物危害评估微生物危害评估 第一级第一级第一级第一级：不引起健康成年人疾病：不引起健康成年人疾病：不引起健康成年人疾病：不引起健康成年人疾病 第二级第二级第二级第二级：可通过：可通过：可通过：可通过破损皮肤、消化道及粘膜暴露破损皮肤、消化道及粘膜暴露破损皮肤、消化道及粘膜暴露破损皮肤、消化道及粘膜暴露等方式等方式等方式等方式引起人类疾病引起人类疾病引起人类疾病引起人类疾病 第三级第三级第三级第三级：本土或外来的微生物，通过：本土或外来的微生物，通过：本土或外来的微生物，通过：本土或外来的微生物，通过吸入途径吸入途径吸入途径吸入途径暴露时暴露时暴露时暴露时可以造成严重或潜在致死性疾病可以造成严重或潜在致死性疾病可以造成严重或潜在致死性疾病可以造成严重或潜在致死性疾病 第四级第四级第四级第四级：可以引起：可以引起：可以引起：可以引起严重且威胁生命严重且威胁生命严重且威胁生命严重且威胁生命的人类疾病，可通的人类疾病，可通的人类疾病，可通的人类疾病，可通过过过过气溶胶气溶胶气溶胶气溶胶传播，或相关的传播危险性不明的微生物传播，或相关的传播危险性不明的微生物传播，或相关的传播危险性不明的微生物传播，或相关的传播危险性不明的微生物 生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为为为为四四四四个生物安全防护级别个生物安全防护级别个生物安全防护级别个生物安全防护级别美国美国美国美国CDC/NIHCDC/NIHCDC/NIHCDC/NIH对对对对微生物微生物微生物微生物指导性指导性指导性指导性分级分级分级分级我国对我国对病原微生物病原微生物的分类的分类 第一类第一类第一类第一类：能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物非常严重疾病非常严重疾病非常严重疾病非常严重疾病的微生的微生的微生的微生物，以及我国物，以及我国物，以及我国物，以及我国尚未发现尚未发现尚未发现尚未发现或者或者或者或者已经宣布消灭已经宣布消灭已经宣布消灭已经宣布消灭的微生物的微生物的微生物的微生物 第二类第二类第二类第二类：能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物严重疾病严重疾病严重疾病严重疾病，比较容易，比较容易，比较容易，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物播的微生物播的微生物播的微生物 第三类第三类第三类第三类：能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物能够引起人类或者动物疾病疾病疾病疾病；不构成严重危；不构成严重危；不构成严重危；不构成严重危害，传播风险有限；具备有效治疗和预防措施害，传播风险有限；具备有效治疗和预防措施害，传播风险有限；具备有效治疗和预防措施害，传播风险有限；具备有效治疗和预防措施 第四类第四类第四类第四类：通常情况下通常情况下通常情况下通常情况下不会引起人类或者动物疾病不会引起人类或者动物疾病不会引起人类或者动物疾病不会引起人类或者动物疾病的微的微的微的微生物生物生物生物第一类和第二类病原微生物统称为第一类和第二类病原微生物统称为第一类和第二类病原微生物统称为第一类和第二类病原微生物统称为高致病性病高致病性病高致病性病高致病性病原微生物原微生物原微生物原微生物实验室生物安全防护的基本原则实验室生物安全防护的基本原则实验室生物安全防护的内容包括实验室生物安全防护的内容包括安全设备安全设备、个体防护个体防护装装置和措施（置和措施（一级屏障一级屏障一级屏障一级屏障）；）；实验室的特殊设计和建设实验室的特殊设计和建设（分（分区、单向气流）区、单向气流）要求（要求（二级屏障二级屏障二级屏障二级屏障）；严格的管理制度和）；严格的管理制度和标准化的操作程序及规程（标准化的操作程序及规程（三级屏障三级屏障三级屏障三级屏障）应将每一特定实验室从立项、建设到使用维护的全过程应将每一特定实验室从立项、建设到使用维护的全过程中有关生物安全防护综合措施的内容编入各实验室的生中有关生物安全防护综合措施的内容编入各实验室的生物安全手册中。必须设有专职的生物安全负责人物安全手册中。必须设有专职的生物安全负责人 生物安全防护实验室生物安全防护实验室生物安全防护实验室生物安全防护实验室根据不同的微生物和防护要求分为根据不同的微生物和防护要求分为四四四四个生物安全防护级别个生物安全防护级别管理制度管理制度实验室内设置和准入实验室内设置和准入 在主实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染区在主实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染区在主实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染区在主实验室内应合理设置清洁区、半污染区和污染区 非实验有关人员和物品不得进入实验室非实验有关人员和物品不得进入实验室非实验有关人员和物品不得进入实验室非实验有关人员和物品不得进入实验室 实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室的批准入实验室及其岗位之前必须经过实验室的批准入实验室及其岗位之前必须经过实验室的批准入实验室及其岗位之前必须经过实验室的批准实验室工作人员资格和培训实验室工作人员资格和培训实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。实验室的工作人员必须是受过专业教育的技术人员。在独立工作前须在中高级实验技术人员指导下进行在独立工作前须在中高级实验技术人员指导下进行上岗培训上岗培训，达到合格标准，方可开始工作，达到合格标准，方可开始工作实验室的工作人员必须被告知实验室工作的实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危潜在危险险并接受实验室安全教育，并接受实验室安全教育，自愿自愿从事实验室工作从事实验室工作实验室的工作人员必须实验室的工作人员必须遵守遵守遵守遵守实验室的所有实验室的所有制度制度、规、规定和定和操作规程操作规程实验室特殊管理实验室特殊管理对可能的危险因素，制订保证安全的对可能的危险因素，制订保证安全的对可能的危险因素，制订保证安全的对可能的危险因素，制订保证安全的SOPSOP事前进行有效的培训和模拟训练事前进行有效的培训和模拟训练事前进行有效的培训和模拟训练事前进行有效的培训和模拟训练对于意外事故要能够提供包括对于意外事故要能够提供包括对于意外事故要能够提供包括对于意外事故要能够提供包括紧急救助紧急救助紧急救助紧急救助或专或专或专或专业性业性业性业性保健治疗保健治疗保健治疗保健治疗的措施，足以应付紧急情况的措施，足以应付紧急情况的措施，足以应付紧急情况的措施，足以应付紧急情况实验室事故处理及上报实验室事故处理及上报实验室事故处理及上报实验室事故处理及上报 安全设备安全设备安全设备安全设备和和和和个体防护个体防护个体防护个体防护是确保实验室工作人员不与致病微是确保实验室工作人员不与致病微是确保实验室工作人员不与致病微是确保实验室工作人员不与致病微生物及其毒素直接接触的生物及其毒素直接接触的生物及其毒素直接接触的生物及其毒素直接接触的一级屏障一级屏障一级屏障一级屏障。生物安全柜生物安全柜生物安全柜生物安全柜是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏是最重要的安全设备，形成最主要的防护屏障。实验室应按要求分别配备障。实验室应按要求分别配备障。实验室应按要求分别配备障。实验室应按要求分别配备、级生物安全柜。级生物安全柜。级生物安全柜。级生物安全柜。所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操所有可能使致病微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行作，除实际上不可实施外，都必须在生物安全柜内进行 不得用不得用不得用不得用超净工作台超净工作台超净工作台超净工作台代替代替代替代替生物安全柜生物安全柜生物安全柜生物安全柜安全设备和个体防护安全设备和个体防护（一级屏障一级屏障）必要时实验室应配备其它安全设备，如设置配有排风必要时实验室应配备其它安全设备，如设置配有排风必要时实验室应配备其它安全设备，如设置配有排风必要时实验室应配备其它安全设备，如设置配有排风净净净净化装置化装置化装置化装置的排气罩等，或采用其它不使致病微生物逸出确的排气罩等，或采用其它不使致病微生物逸出确的排气罩等，或采用其它不使致病微生物逸出确的排气罩等，或采用其它不使致病微生物逸出确保安全的设备保安全的设备保安全的设备保安全的设备 实验室所配备的实验室所配备的实验室所配备的实验室所配备的离心机离心机离心机离心机应在生物安全柜或其它安全设备应在生物安全柜或其它安全设备应在生物安全柜或其它安全设备应在生物安全柜或其它安全设备中使用，否则必须使用安全中使用，否则必须使用安全中使用，否则必须使用安全中使用，否则必须使用安全密封的专用离心头（杯）密封的专用离心头（杯）密封的专用离心头（杯）密封的专用离心头（杯）必须给实验室工作人员配备必要的必须给实验室工作人员配备必要的必须给实验室工作人员配备必要的必须给实验室工作人员配备必要的个体防护用品个体防护用品个体防护用品个体防护用品，如，如，如，如个个个个人防护服、防毒面具、安全眼镜或眼罩人防护服、防毒面具、安全眼镜或眼罩人防护服、防毒面具、安全眼镜或眼罩人防护服、防毒面具、安全眼镜或眼罩生生物物安安全全柜柜（biosafety cabinet）是是处处理理危危险险性性微微生生物物时时所所用用的的箱箱型型空空气气净净化安全装置化安全装置 生物安全柜生物安全柜I级生物安全柜级生物安全柜（class I biosafety cabinet）至少装置一个高效空气过滤器对排气进至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，外部空气由操作窗行净化，外部空气由操作窗吸进吸进，而不可，而不可能由操作窗口能由操作窗口逸出；逸出；100%由密接排气导由密接排气导管排到室外管排到室外（类似于通风厨类似于通风厨）工作状态时保证工作状态时保证工作人员工作人员不受侵害，但不不受侵害，但不保证保证实验对象实验对象不受污染不受污染。现已很少使用现已很少使用 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为气。工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为观察窗，下部为操作窗口。外部空气由操作窗吸观察窗，下部为操作窗口。外部空气由操作窗吸进，而不可能由操作窗口逸出进，而不可能由操作窗口逸出 工作状态下遵守操作规程时既保证工作状态下遵守操作规程时既保证工作人员工作人员工作人员工作人员不受侵不受侵害，又保证害，又保证实验对象实验对象实验对象实验对象及及环境环境环境环境不受污染不受污染级生物安全柜级生物安全柜（class biosafety cabinet）II II 级级级级生生生生物物物物安安安安全全全全柜柜柜柜根根根根据据据据结结结结构构构构以以以以及及及及气气气气流流流流分分分分配配配配不不不不同同同同主主主主要要要要是外排气流不同分为：是外排气流不同分为：是外排气流不同分为：是外排气流不同分为：A1A1型型型型:（0.38m/s 0.38m/s，30%30%排在室内排在室内排在室内排在室内 ）A2A2型型型型:（0.5m/s0.5m/s，30%30%外排，原外排，原外排，原外排，原B3 B3 型型型型）B1B1型型型型:（0.5m/s0.5m/s，70%70%接管道外排）接管道外排）接管道外排）接管道外排）B2B2型型型型:（0.5m/s 0.5m/s，100%100%接管道外排）接管道外排）接管道外排）接管道外排）级生物安全柜级生物安全柜（class biosafety cabinet）至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。正面上部为观察窗，下部空气。正面上部为观察窗，下部空气。正面上部为观察窗，下部空气。正面上部为观察窗，下部手套箱式操作口手套箱式操作口手套箱式操作口手套箱式操作口 箱内对外界保持负压箱内对外界保持负压箱内对外界保持负压箱内对外界保持负压可确保人体与柜内物品完可确保人体与柜内物品完可确保人体与柜内物品完可确保人体与柜内物品完全隔绝全隔绝全隔绝全隔绝 全封闭的、气密结构的通风柜全封闭的、气密结构的通风柜 通过与柜体联结的通过与柜体联结的橡胶手套橡胶手套进行操作；进行操作；柜内保持至少柜内保持至少120Pa120Pa的负压的负压(0.50wg)(0.50wg)；供气通过供气通过HEPAHEPA抽入内；抽入内；外外排排的的气气流流经经过过双双层层HEPA过过滤滤或或经经HEPA后再经燃烧处理。后再经燃烧处理。隔离器隔离器IIIIII高效空气高效空气高效空气高效空气过滤过滤过滤过滤工作人员工作人员工作人员工作人员安全安全安全安全无涡流单无涡流单无涡流单无涡流单向流空气向流空气向流空气向流空气实验对象实验对象实验对象实验对象不受污染不受污染不受污染不受污染手套箱式手套箱式手套箱式手套箱式操作口操作口操作口操作口I级级有有是是否否否否否否II级级有有是是是是是是否否III级级有有是是是是是是是是个人生物安全防护装备个人生物安全防护装备实验室防护服实验室防护服面部防护面部防护手套手套呼吸防护呼吸防护微生物和生物安全实验室微生物和生物安全实验室生物安全实验室不同于其它普通实验室，生物安全实验室不同于其它普通实验室，是从事对人可能产生危害的生物实验场所是从事对人可能产生危害的生物实验场所 尤其是三级和四级生物安全实验室主要用尤其是三级和四级生物安全实验室主要用于对人、畜有高度传染性的烈性传染病的于对人、畜有高度传染性的烈性传染病的研究（如反恐）和检测（如研究（如反恐）和检测（如SARS）的工作）的工作实验室设施结构和通风设计实验室设施结构和通风设计实验室分区实验室分区:清洁区清洁区 半污染区半污染区 污染区污染区单向气流单向气流(负压负压):外界外界 HEPA 清洁区清洁区 半污染区半污染区 污染区污染区 HEPA 外界外界生物安全实验室的分类分级生物安全实验室的分类分级实验室分类实验室分类 一般生物安全防护实验室一般生物安全防护实验室(不使用实验脊椎动物和昆虫不使用实验脊椎动物和昆虫)实验脊椎动物生物安全防护实验室实验脊椎动物生物安全防护实验室（A）实验室生物安全防护分级实验室生物安全防护分级 一级生物安全防护实验室，一级生物安全防护实验室，一级生物安全防护实验室，一级生物安全防护实验室，简称简称简称简称BSL1BSL1或或或或P1P1二级生物安全防护实验室，二级生物安全防护实验室，二级生物安全防护实验室，二级生物安全防护实验室，简称简称简称简称BSL2BSL2或或或或P2P2三级生物安全防护实验室，三级生物安全防护实验室，三级生物安全防护实验室，三级生物安全防护实验室，简称简称简称简称BSL3BSL3或或或或P3P3四级生物安全防护实验室，四级生物安全防护实验室，四级生物安全防护实验室，四级生物安全防护实验室，简称简称简称简称BSL4BSL4或或或或P4P4 一级最低，四级最高一级最低，四级最高 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对于对于对于对健康成年人已知无致病作用的微生物健康成年人已知无致病作用的微生物健康成年人已知无致病作用的微生物健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于，如用于，如用于，如用于教学的普通微生物实验室等。教学的普通微生物实验室等。教学的普通微生物实验室等。教学的普通微生物实验室等。包含微生物举例包含微生物举例包含微生物举例包含微生物举例 大肠杆菌大肠杆菌 格鲁伯耐格里原虫格鲁伯耐格里原虫 感染性犬肝炎病毒感染性犬肝炎病毒 枯草杆菌枯草杆菌一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室实验室应设洗手池（靠近出口处）实验室应设洗手池（靠近出口处）实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙，不得铺设地毯滑、无缝隙，不得铺设地毯实验室中的家具应牢固。应有专门放置生物废实验室中的家具应牢固。应有专门放置生物废弃物容器的台（架）弃物容器的台（架）实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室实验室设计及建造实验室设计及建造实验室设计及建造实验室设计及建造 工作过程中禁止非工作人员进入实验室。工作过程中禁止非工作人员进入实验室。接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手套后和离开实验室前要洗手禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及存储食物化妆及存储食物一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室标准微生物操作规程标准微生物操作规程 使用机械移液器吸取液体，禁止口吸使用机械移液器吸取液体，禁止口吸使用机械移液器吸取液体，禁止口吸使用机械移液器吸取液体，禁止口吸 制定尖锐器具的安全操作规程制定尖锐器具的安全操作规程制定尖锐器具的安全操作规程制定尖锐器具的安全操作规程 按实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生按实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生按实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生按实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出要随时每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出要随时每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出要随时每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出要随时消毒消毒消毒消毒 所有培养物、废弃物在运出实验室前须进行灭活所有培养物、废弃物在运出实验室前须进行灭活所有培养物、废弃物在运出实验室前须进行灭活所有培养物、废弃物在运出实验室前须进行灭活（如高压）；需运出实验室灭活的物品须放在专用（如高压）；需运出实验室灭活的物品须放在专用（如高压）；需运出实验室灭活的物品须放在专用（如高压）；需运出实验室灭活的物品须放在专用密闭容器内密闭容器内密闭容器内密闭容器内一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室 安全设施和个体防护安全设施和个体防护一般无须使用生物安全柜等专用安全设备一般无须使用生物安全柜等专用安全设备一般无须使用生物安全柜等专用安全设备一般无须使用生物安全柜等专用安全设备工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物对人或环境具有中等潜在危害的微生物对人或环境具有中等潜在危害的微生物对人或环境具有中等潜在危害的微生物n n包含微生物举例包含微生物举例包含微生物举例包含微生物举例 麻疹病毒麻疹病毒 沙门氏菌沙门氏菌 乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒 HIV 血清学检测血清学检测 衣原体衣原体 志贺氏菌志贺氏菌二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室设计和建造的特殊要求设计和建造的特殊要求 消毒设施（高压灭菌锅、化学消毒装置等）消毒设施（高压灭菌锅、化学消毒装置等）洗眼装置洗眼装置 可自动关闭的门锁可自动关闭的门锁 门口有发光指示装置门口有发光指示装置 换气装置（换气装置（3-4次次/小时）小时）满足一级实验室满足一级实验室(标准微生物操作规程标准微生物操作规程)各各款要求，在此基础上特别注意：款要求，在此基础上特别注意：制定出入制度制定出入制度实验室人口贴上实验室人口贴上生物危险标志生物危险标志制定实验室特定的生物安全操作规则制定实验室特定的生物安全操作规则每年一次最新培训制度每年一次最新培训制度二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室特殊微生物操作规程特殊微生物操作规程特殊微生物操作规程特殊微生物操作规程使用使用使用使用塑料器材塑料器材塑料器材塑料器材代替代替代替代替玻璃器材玻璃器材玻璃器材玻璃器材禁止禁止禁止禁止用手处理破碎的玻璃器具用手处理破碎的玻璃器具用手处理破碎的玻璃器具用手处理破碎的玻璃器具培养基、组织、体液及其它具有培养基、组织、体液及其它具有培养基、组织、体液及其它具有培养基、组织、体液及其它具有 潜在危险性潜在危险性潜在危险性潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒、灭菌消毒、灭菌消毒、灭菌消毒、灭菌v用过的针头用过的针头用过的针头用过的针头禁止禁止禁止禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽，折弯、剪断、折断、重新盖帽，折弯、剪断、折断、重新盖帽，折弯、剪断、折断、重新盖帽，禁止禁止禁止禁止用手直接从注射器取下。用手直接从注射器取下。用手直接从注射器取下。用手直接从注射器取下。v用过的针头用过的针头用过的针头用过的针头必须必须必须必须直接放入防穿透的容器中。直接放入防穿透的容器中。直接放入防穿透的容器中。直接放入防穿透的容器中。v非一次性利器非一次性利器非一次性利器非一次性利器必须必须必须必须放入厚壁容器中并运送到特放入厚壁容器中并运送到特放入厚壁容器中并运送到特放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒定区域消毒，最好进行高压消毒定区域消毒，最好进行高压消毒定区域消毒，最好进行高压消毒工作人员应接受必要的工作人员应接受必要的免疫接种免疫接种免疫接种免疫接种和检测和检测(如如乙型乙型肝炎疫苗肝炎疫苗，卡介苗卡介苗等等)必要时收集从事危险性工作人员的必要时收集从事危险性工作人员的本底血清本底血清严格执行实验室工作人员年度采血检测严格执行实验室工作人员年度采血检测 HIV 抗抗体和备案制度。每半年进行一次体和备案制度。每半年进行一次 HIV 抗体检测，抗体检测，并保留样品并保留样品对从事艾滋病实验室工作的人员，因工作中意外对从事艾滋病实验室工作的人员，因工作中意外事故造成事故造成HIV 职业暴露者，所在单位应负责解决职业暴露者，所在单位应负责解决抗病毒及其它相应治疗的医疗费用抗病毒及其它相应治疗的医疗费用实验设备在运出修理或维护前必须进行实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒消毒人员暴露于感染性物质时，及时向实验人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案方案禁止将无关动物带入实验室禁止将无关动物带入实验室处理以下致病微生物时应在生物安全柜处理以下致病微生物时应在生物安全柜(级级)中进行中进行，包括，包括:高浓度高浓度 大容量大容量 有喷溅可能性有喷溅可能性上述材料的离心操作如使用密封的离心机转子或安全离上述材料的离心操作如使用密封的离心机转子或安全离心杯，且只在生物安全柜中开闭，可在实验室中进行心杯，且只在生物安全柜中开闭，可在实验室中进行级生物安全柜必须每年进行一次年度现场检测级生物安全柜必须每年进行一次年度现场检测二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室安全设施和个体防护安全设施和个体防护当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行时，须使当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行时，须使用用面部保护装置面部保护装置应有相应的应有相应的SOP在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服，不得穿着在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服，不得穿着外出。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一外出。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃洗涤或丢弃当手可能接触感染材料、污染的设备时应戴手套。如当手可能接触感染材料、污染的设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方可除去不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方可除去不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方可除去不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用手套。一次性手套不得清洗和再次使用手套。一次性手套不得清洗和再次使用手套。一次性手套不得清洗和再次使用下列操作必须在下列操作必须在P2实验室或全排式实验室或全排式生物安全柜中进行生物安全柜中进行l l、含漱液、血清和血液等样品的诊断检测、含漱液、血清和血液等样品的诊断检测2 2、溶解、固定或用其他方法处理灭活的病毒和、溶解、固定或用其他方法处理灭活的病毒和(或或)无传染性无传染性 的病毒基因片段的病毒基因片段 3 3、常规的细菌和毒素检查、常规的细菌和毒素检查4 4、可能产生气溶胶的样品处理、可能产生气溶胶的样品处理5 5、临床样品的包装、分装、临床样品的包装、分装6 6、离心管和离心机转头的封闭和开启、离心管和离心机转头的封闭和开启n n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素的致病微生物及其毒素的致病微生物及其毒素的致病微生物及其毒素。通常已有预防的疫苗。通常已有预防的疫苗。通常已有预防的疫苗。通常已有预防的疫苗n包含微生物举例包含微生物举例 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 牛分枝杆菌牛分枝杆菌 鼠疫杆菌鼠疫杆菌 炭疽杆菌炭疽杆菌 Q Q热病原体热病原体 HIV(HIV(血清学检测除外血清学检测除外)澳大利亚立克次氏体澳大利亚立克次氏体 加拿大立克次氏体加拿大立克次氏体 三级生物安全防护实验室三级生物安全防护实验室下列操作必须在下列操作必须在P3实验室中进行实验室中进行l l、用细胞培养的方法分离病毒用细胞培养的方法分离病毒2 2、收集或浓缩病毒或其培养产物、收集或浓缩病毒或其培养产物 3 3、用活病毒或病毒的全基因接种动物、用活病毒或病毒的全基因接种动物4 4、咽拭子样品的诊断检测、咽拭子样品的诊断检测P3实验室示意图n实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对对人体具有人体具有高度的危险性高度的危险性高度的危险性高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素及其毒素n与上述情况类似的与上述情况类似的不明微生物不明微生物不明微生物不明微生物，也必须在，也必须在四级四级四级四级生物安全生物安全防护实验室中进行，带有充分数据后再决定此种微生物防护实验室中进行，带有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理n n包含微生物举例包含微生物举例包含微生物举例包含微生物举例 黄病毒黄病毒 埃博拉病毒埃博拉病毒 中欧蜱传脑炎病毒中欧蜱传脑炎病毒 四级生物安全防护实验室四级生物安全防护实验室美国国立卫生研美国国立卫生研究所究所美国疾病控制美国疾病控制中心中心病病 源源操操 作作一级屏障一级屏障二级屏障二级屏障P1BSL1不会经常引发健康成人疾病标准的微生物操作不要求开放实验台、洗手池P2BSL2人类病源菌，因皮肤伤口、吸入、黏膜曝露而发生危险BSL1操作外加：1、限制进入2、有生物危险警告标志3、“锐器”安全措施4、生物安全手册，其中规定废物消毒和医疗观察1级、2级生物安全柜实验服、手套、若需要则采取面部保护措施 BSL-1外加：高压灭菌锅P3BSL3内源性和外源性病源，可通过气溶胶传播，能导致严重后果或生命危险 BSL-3 BSL-2操作外加：1、控制进入2、所有废物消毒3、洗涤前，实验服消毒4、有基础血清1级、2级生物安全柜保护性实验服、手套、若需要则采取呼吸保护措施BSL-2外加：1、和进入走廊隔开2、双门进入，门自动关闭3、排出的空气不循环4、实验室内负压P4BSL4对生命有高度危险的危险性病源或外源性病源：致命、通过气溶胶而致实验室感染：或未知传播风险的有关病源BSL3操作外加：1、进入前换衣服2、出实验室前淋浴3、带出设施的所有材料消毒3级生物安全柜或1级、2级生物安全柜加全身的、供应空气的正压防护