叶绿体中色素的提取与分离实验培训讲学.ppt

叶绿体中色素的提取和叶绿体中色素的提取和分离分离(fnl)(fnl)化隆四中化隆四中马海龙马海龙 【实 验】第一页，共20页。一、实验原理一、实验原理1.叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂剂:酒精、汽油酒精、汽油(qyu)、苯、石油醚等）、苯、石油醚等）中，所以用丙酮可提取叶绿体中色素。中，所以用丙酮可提取叶绿体中色素。2.色素在层析液中溶解度不同，溶解度高色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。将不同的色素分离。第二页，共20页。实验实验(shyn)(shyn)步步骤骤1.提取提取(tq)叶绿素叶绿素研磨法提取研磨法提取研磨法提取研磨法提取(tq)(tq)光合色素光合色素光合色素光合色素材料剪碎材料剪碎材料剪碎材料剪碎研磨法研磨法研磨法研磨法加入有机溶剂加入有机溶剂加入有机溶剂加入有机溶剂研磨、匀浆研磨、匀浆研磨、匀浆研磨、匀浆过滤过滤过滤过滤提取液提取液提取液提取液第三页，共20页。二、实验二、实验(shyn)程序程序 第四页，共20页。第五页，共20页。第六页，共20页。第七页，共20页。叶绿体中色素叶绿体中色素(ss)(ss)的对比的对比项目项目色素颜色素颜色色吸收光谱主要部吸收光谱主要部位位定性滤纸上显现的色素层析定性滤纸上显现的色素层析图谱图谱叶绿素叶绿素（占（占34）叶绿素叶绿素a蓝绿色蓝绿色红光、蓝紫光红光、蓝紫光位于中下层，呈蓝绿色位于中下层，呈蓝绿色叶绿素叶绿素b黄绿色黄绿色红光、蓝紫光红光、蓝紫光位于最下层，呈黄绿色位于最下层，呈黄绿色类胡萝卜素类胡萝卜素（占（占14）胡萝卜胡萝卜素素橙黄色橙黄色蓝紫光蓝紫光位于最上层，呈橙黄色位于最上层，呈橙黄色叶黄素叶黄素黄色黄色蓝紫光蓝紫光位于中上层，呈黄色位于中上层，呈黄色第八页，共20页。l插入(ch r)第九页，共20页。三、实验三、实验(shyn)关键关键1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片片(ypin)。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准，重复画滤液细线时应以细、齐、直为标准，重复画线时必须等上次画线干燥画线时必须等上次画线干燥(gnzo)后再进后再进行，重复行，重复2-3次。次。3.层析时不要让滤液细线触及层析液层析时不要让滤液细线触及层析液。第十页，共20页。四、注意事项四、注意事项1.因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨机溶剂，所以研磨(ynm)要快，收集的滤液要要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。剂的挥发。2.在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨充分充分(chngfn)，有利于色素的提取；加少许，有利于色素的提取；加少许碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏。中的色素受到破坏。3.分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层析液中，触到层析液，这是因为色素易溶解在层析液中，导致色素带不清晰导致色素带不清晰(qngx)，影响实验效果。，影响实验效果。第十一页，共20页。1在叶绿体中色素在叶绿体中色素(s s)的提取与分离实验中，的提取与分离实验中，扩散速度最快的色素扩散速度最快的色素(s s)是（是（D）A叶绿素叶绿素a B叶绿素叶绿素b C叶黄素叶黄素 D胡萝卜素胡萝卜素第十二页，共20页。2用韭菜做用韭菜做“叶绿体色素的提取和分离实验叶绿体色素的提取和分离实验”，下列不能用作提取剂的是（，下列不能用作提取剂的是（A）A水水 B丙酮丙酮(bn tn)C酒精酒精 DCCl4第十三页，共20页。3 3做色素提取做色素提取(tq)(tq)和分离实验的正确装和分离实验的正确装置是图中（置是图中（D D）第十四页，共20页。4在进行叶绿素提取和分离实验时，不能让在进行叶绿素提取和分离实验时，不能让层析液没及滤液细线的原因是（层析液没及滤液细线的原因是（C）A滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响实滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响实验结果验结果B滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散C色素会溶解在层析液中而使结果不明显色素会溶解在层析液中而使结果不明显(mngxin)D滤纸条上几种色素会混合起来滤纸条上几种色素会混合起来第十五页，共20页。5 5某人做叶绿体中色素分离实验时，使用的是某人做叶绿体中色素分离实验时，使用的是圆形滤纸，装置如下图。实验结束时在圆形滤纸上圆形滤纸，装置如下图。实验结束时在圆形滤纸上形成形成(xngchng)(xngchng)四个同心色素圆环，则最内圈所四个同心色素圆环，则最内圈所呈颜色为（呈颜色为（D D）第十六页，共20页。6叶绿体中色素经层析后，出现在滤叶绿体中色素经层析后，出现在滤纸纸(lzh)上扩散最宽的色素带是（上扩散最宽的色素带是（A），），最窄的色素带是（最窄的色素带是（C），最整齐的色素），最整齐的色素带是（带是（C）A叶绿素叶绿素a B叶绿素叶绿素b C胡萝卜素胡萝卜素 D叶黄素叶黄素第十七页，共20页。7叶绿体的色素能在滤纸条上彼此分离叶绿体的色素能在滤纸条上彼此分离开开(l ki)的原因是（的原因是（C）A色素提取液中的不同色素已分层色素提取液中的不同色素已分层 B阳光的照射使不同的色素彼此分开阳光的照射使不同的色素彼此分开C滤纸对各种色素的吸附力不同滤纸对各种色素的吸附力不同 D丙酮酸使色素溶解并彼此分离的扩散丙酮酸使色素溶解并彼此分离的扩散速度不同速度不同第十八页，共20页。8在叶绿体色素的提取和分离实验中：在叶绿体色素的提取和分离实验中：（1）研磨绿叶时为防止叶绿素被破坏而加入）研磨绿叶时为防止叶绿素被破坏而加入CaCO3的原理是中的原理是中和细胞中的有机酸。和细胞中的有机酸。（2）定性滤纸进行干燥处理的目的是使层析液在滤纸条上均匀）定性滤纸进行干燥处理的目的是使层析液在滤纸条上均匀扩散。扩散。（3）对滤纸剪去两角的目的是使层析液同时）对滤纸剪去两角的目的是使层析液同时(tngsh)到达滤液到达滤液细线。细线。（4）所画滤液细线越细越齐越好，这样可避免）所画滤液细线越细越齐越好，这样可避免 色素带部分重叠色素带部分重叠 以取得较好的分离效果。以取得较好的分离效果。（5）层析装置加盖的目的是避免层析液挥发影响效果并引起中）层析装置加盖的目的是避免层析液挥发影响效果并引起中毒。毒。（6）滤纸条上色素带最宽的颜色是蓝绿色，相邻色素带间距离）滤纸条上色素带最宽的颜色是蓝绿色，相邻色素带间距离最近的是叶绿素最近的是叶绿素a与叶绿素与叶绿素b。第十九页，共20页。第二十页，共20页。