紫外分光光度法详解ppt课件.ppt

在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确紫外-可见分光光度计在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确目录一、基本原理二、组成结构三、分光光度计的类型四、分光光度计的使用五、注意事项在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确一、基本原理 采用一个可以采用一个可以产生多个波长产生多个波长的装置，通过的装置，通过系列分光系列分光装置，得到一束平行的波长范围很窄的装置，得到一束平行的波长范围很窄的单色光单色光，透过一定厚，透过一定厚度的试样溶液后，部分光被吸收，剩余的光照射到光电元件度的试样溶液后，部分光被吸收，剩余的光照射到光电元件上，产生光电流，在仪器上可读取相应的上，产生光电流，在仪器上可读取相应的吸光度或透光率吸光度或透光率，完成测定。完成测定。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 利用一定频率的紫外利用一定频率的紫外-可见光照射分析物，它将有选择可见光照射分析物，它将有选择地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。地被吸收。吸收光谱可以反映出物质的特征。溶液对光的作用示意图溶液对光的作用示意图在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确光吸收遵循朗伯光吸收遵循朗伯-比尔定律：比尔定律：I I0 0 入射光辐射强度入射光辐射强度I I 透射光辐射强度透射光辐射强度T T 透射比透射比a a 吸光系数吸光系数 摩尔吸光系数摩尔吸光系数在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确二、组成构成光源光源单色单色器器吸收池吸收池检测器检测器显示器显示器在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（1 1）光源）光源光源是提供入射光的装置。光源是提供入射光的装置。要求要求发射射连续的具有足的具有足够强强度和度和稳定的紫外及可定的紫外及可见光，光，并且并且辐射射强强度随波度随波长的的变化尽可能小，使用寿命化尽可能小，使用寿命长。可可见区常用的光源区常用的光源为钨灯，可用波灯，可用波长范范围为 320-1000nm在紫外区常用的光源在紫外区常用的光源为氢灯或灯或氘灯，灯，发射的射的连续光波光波长范范围为 185-375nm氘灯的灯的辐射射强强度大，度大，稳定性好，寿命也定性好，寿命也长。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（2 2）单色器）单色器单色器是将光源辐射的复合光色散成单色光的光学装置。单色器是将光源辐射的复合光色散成单色光的光学装置。一般由一般由狭缝狭缝、色散元件色散元件及及透镜透镜系统组成。系统组成。最常用的色散元件是光栅和棱镜。最常用的色散元件是光栅和棱镜。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 棱镜棱镜根据光的折射原理而将复合光色散为不同波长的单根据光的折射原理而将复合光色散为不同波长的单色光，然后再让所需波长的光通过一个很窄的狭缝照射到吸色光，然后再让所需波长的光通过一个很窄的狭缝照射到吸收池上。收池上。由玻璃或石英制成。玻璃棱镜用于可见光范围，石英棱由玻璃或石英制成。玻璃棱镜用于可见光范围，石英棱镜则在紫外和可见光范围均可使用。镜则在紫外和可见光范围均可使用。入射狭缝入射狭缝准直透镜准直透镜棱镜棱镜聚焦透镜聚焦透镜出射狭缝出射狭缝白光白光红红紫紫1 12 2在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 光栅光栅是根据光的衍射和干涉原理将复合光色散为不同是根据光的衍射和干涉原理将复合光色散为不同波长的单色光，然后再让所需波长的光通过狭缝照射到吸波长的单色光，然后再让所需波长的光通过狭缝照射到吸收池上。它的分辨率比棱镜大，可用的波长范围也较宽。收池上。它的分辨率比棱镜大，可用的波长范围也较宽。M1M2出出射射狭狭缝缝光屏光屏透透镜镜平面透平面透射光栅射光栅光栅衍射示意图光栅衍射示意图在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（3 3）吸收池）吸收池用于盛放试液的装置用于盛放试液的装置一般可见光区使用玻璃吸收池，紫外光区使用石英吸收一般可见光区使用玻璃吸收池，紫外光区使用石英吸收池。池。使用比色皿时应注意使用比色皿时应注意手持两侧毛边手持两侧毛边，保持清洁、透明，保持清洁、透明，避免磨损透光面。避免磨损透光面。盛放液体高度占四分之三盛放液体高度占四分之三。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（4 4）检测器）检测器将光信号转变成电信号的装置。将光信号转变成电信号的装置。要求灵敏度高，响应时间短，噪声水平低且有良好的稳定要求灵敏度高，响应时间短，噪声水平低且有良好的稳定性。性。常用的检测器有常用的检测器有光电管光电管、光电倍增管光电倍增管和和光电二极管阵列检光电二极管阵列检测器测器。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确 光光电管管能将所能将所产生的光生的光电流放大，可用来流放大，可用来测量很弱的光。量很弱的光。常用的光常用的光电管有管有蓝敏和敏和红敏光敏光电管两种。前者适用波管两种。前者适用波长范范围 210-625nm；后者适用范；后者适用范围 625-1000nm 光光电倍增管倍增管比普通光比普通光电管更灵敏，是利用二次管更灵敏，是利用二次电子子发射来射来放大光放大光电流。是目前高中档分光光度流。是目前高中档分光光度计中常用的一种中常用的一种检测器。器。光光电二极管二极管阵列列检测器器是紫外是紫外-可可见光度光度检测器的一个重要器的一个重要进展。展。这类检测器用光器用光电二极管二极管阵列作列作检测元件。通元件。通过单色器色器的光含有全部的吸收信息，在的光含有全部的吸收信息，在阵列上同列上同时被被检测，并用，并用电子学子学方法及方法及计算机技算机技术对二极管二极管阵列快速列快速扫描采集数据，由于描采集数据，由于扫描描速度非常快，可以得到三速度非常快，可以得到三维光光谱图。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确（5 5）显示器）显示器常用的装置有电表指示、图表指示及数字显示等。常用的装置有电表指示、图表指示及数字显示等。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确三、分光光度计的类型 单光束分光光度计单光束分光光度计双光束分光光度计双光束分光光度计双波长分光光度计双波长分光光度计在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确0.575光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测器检测器显示显示单光束分光光度计单光束分光光度计简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描一般不能作全波段光谱扫描在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确双光束分光光度计双光束分光光度计比值比值比值比值光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测器检测器显示显示光束分器光束分器自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵 敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。价格较高。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确岛津津UV-2550紫外可紫外可见分光光度分光光度计在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确双波长分光光度计双波长分光光度计光源单色器单色器切光源检测器吸收池不需要参比溶液；可以消除背景吸收干扰；适合多组分混不需要参比溶液；可以消除背景吸收干扰；适合多组分混合物、浑浊试样的定量分析，可进行导数光谱分析。价格合物、浑浊试样的定量分析，可进行导数光谱分析。价格昂贵昂贵在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确四、分光光度计的使用波长扫描波长扫描定量测定定量测定在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确波长扫描波长扫描开始方法设定样品名输入将空白样品分别放入参比池和样品池进行用户基线校正将样品放入样品池开始测量开始测量打印数据在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确开始方法设定样品名输入将空白样品分别放入参比池和样品池将样品放入样品池开始测量开始测量打印数据进行用户基线校正定量测定定量测定在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确五、注意事项1.1.开机预热开机预热1515分钟左右。分钟左右。2.2.测定时应注意：测定时应注意：参照池和吸收池应是一对经校正好的匹配的吸收参照池和吸收池应是一对经校正好的匹配的吸收池，材料和规格一致。池，材料和规格一致。使用前后应将洗手池洗净，测量时不能用手接触使用前后应将洗手池洗净，测量时不能用手接触窗口。窗口。已匹配好的比色皿不能用炉子和火焰干燥，不能已匹配好的比色皿不能用炉子和火焰干燥，不能加热，以免引起光程长度上的改变。加热，以免引起光程长度上的改变。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确3.3.测量条件的选择：测量条件的选择：选择适宜波长的入射光选择适宜波长的入射光:由于有色物质对光有选择性吸收由于有色物质对光有选择性吸收,为了使测定结果有较高的灵敏度为了使测定结果有较高的灵敏度,必须选择溶液最大吸收必须选择溶液最大吸收波长的入射光。波长的入射光。控制吸光度控制吸光度A A的准确的读数范围的准确的读数范围:由朗伯由朗伯-比耳定律可知比耳定律可知,吸吸光度只有控制在光度只有控制在0.20.70.20.7读数范围内时读数范围内时,测量的准确度较高测量的准确度较高.选择参比溶液：参比溶液是用来调节仪器工作零点的。若选择参比溶液：参比溶液是用来调节仪器工作零点的。若样品溶液，试剂，显色剂无色可用蒸馏水作参比溶液；反样品溶液，试剂，显色剂无色可用蒸馏水作参比溶液；反之应采用不加显色剂的样品液作参比溶液。之应采用不加显色剂的样品液作参比溶液。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确4.4.用完后先关程序，再关仪器开关，关电源，关闭计算机。用完后先关程序，再关仪器开关，关电源，关闭计算机。5.5.正确登记，将仪器及实验台擦干净。正确登记，将仪器及实验台擦干净。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确紫外紫外-可见分光光度计的优缺点可见分光光度计的优缺点优点优点：灵敏度高灵敏度高,主要用于微量分析；主要用于微量分析；准确度高准确度高,浓度测量相对误差仅有浓度测量相对误差仅有1-3%1-3%；操作简便、迅速，所需设备并不复杂；操作简便、迅速，所需设备并不复杂；应用广泛。应用广泛。缺点缺点：仅适合微量分析；仅适合微量分析；所需仪器相对昂贵。所需仪器相对昂贵。在整堂课的教学中，刘教师总是让学生带着问题来学习，而问题的设置具有一定的梯度，由浅入深，所提出的问题也很明确谢谢大家！