实验动物的基本技术和方法.pptx

会计学1实验动物的基本技术和方法实验动物的基本技术和方法n n第一节第一节第一节第一节 动物实验前的准备动物实验前的准备动物实验前的准备动物实验前的准备n n第二节实验动物的分组和标记第二节实验动物的分组和标记第二节实验动物的分组和标记第二节实验动物的分组和标记n n第三节第三节第三节第三节 实验动物的抓取与固定实验动物的抓取与固定实验动物的抓取与固定实验动物的抓取与固定n n第四节第四节第四节第四节 实验动物麻醉方法实验动物麻醉方法实验动物麻醉方法实验动物麻醉方法n n第五节第五节 实验动物的给药、采血方实验动物的给药、采血方法法第1页/共92页第一节第一节 动物实验前的准备动物实验前的准备 动物实验前要进行一系列的准备工作，动物实验前要进行一系列的准备工作，包括理论准备、条件准备、预备实验。包括理论准备、条件准备、预备实验。理论准备主要指了解动物实验的基础理论准备主要指了解动物实验的基础理论知识，选题立项和设定假设、研理论知识，选题立项和设定假设、研究计划和方案的制定、实验方法及实究计划和方案的制定、实验方法及实验动物的选择、参考文献的查阅等。验动物的选择、参考文献的查阅等。条件准备指仪器设备的备置和校准、条件准备指仪器设备的备置和校准、药品的配制、器械的准备、实验动物药品的配制、器械的准备、实验动物的购入、实验场所消毒与器具配套等。的购入、实验场所消毒与器具配套等。预备实验是正式实验的预演。预备实验是正式实验的预演。第2页/共92页动物实验前的理论准备动物实验前的理论准备有关理论知识的学习有关理论知识的学习有关理论知识的学习有关理论知识的学习查找有关动物实验的基础知识查找有关动物实验的基础知识查找有关动物实验的基础知识查找有关动物实验的基础知识常用实验动物的生物学特点及其应用常用实验动物的生物学特点及其应用常用实验动物的生物学特点及其应用常用实验动物的生物学特点及其应用实验动物的选择原则实验动物的选择原则实验动物的选择原则实验动物的选择原则第3页/共92页动物实验前的条件准备动物实验前的条件准备 动物饲养室、动物实验室及饲养器具的动物饲养室、动物实验室及饲养器具的准备准备应检查动物笼器具的数量、饲养室卫应检查动物笼器具的数量、饲养室卫生及消毒情况。生及消毒情况。环境控制：理化因素、居住因素、营环境控制：理化因素、居住因素、营养因素、生物因素。养因素、生物因素。第4页/共92页动物实验室及相关设施动物实验室及相关设施 动物实验设施是指以研究、试验、教学、生物制品和药动物实验设施是指以研究、试验、教学、生物制品和药动物实验设施是指以研究、试验、教学、生物制品和药动物实验设施是指以研究、试验、教学、生物制品和药品生产等为目的，进行实验动物饲养、试验的建筑物、设品生产等为目的，进行实验动物饲养、试验的建筑物、设品生产等为目的，进行实验动物饲养、试验的建筑物、设品生产等为目的，进行实验动物饲养、试验的建筑物、设备以及运营管理在内的总和，包括：一般动物实验环境设备以及运营管理在内的总和，包括：一般动物实验环境设备以及运营管理在内的总和，包括：一般动物实验环境设备以及运营管理在内的总和，包括：一般动物实验环境设施、特殊动物实验设施、实验仪器设备。施、特殊动物实验设施、实验仪器设备。施、特殊动物实验设施、实验仪器设备。施、特殊动物实验设施、实验仪器设备。用于一般动物实验的环境根据对饲养动物的微生物控制程用于一般动物实验的环境根据对饲养动物的微生物控制程用于一般动物实验的环境根据对饲养动物的微生物控制程用于一般动物实验的环境根据对饲养动物的微生物控制程度和空气净化程度，分为：度和空气净化程度，分为：度和空气净化程度，分为：度和空气净化程度，分为：普通环境（普通环境（普通环境（普通环境（Conventional conditionConventional conditionConventional conditionConventional condition）普通级动物实验普通级动物实验普通级动物实验普通级动物实验 屏障环境（屏障环境（屏障环境（屏障环境（Barrier ConditionBarrier ConditionBarrier ConditionBarrier Condition）SPFSPFSPFSPF级动物实验级动物实验级动物实验级动物实验 隔离环境（隔离环境（隔离环境（隔离环境（Isolation condition)Isolation condition)Isolation condition)Isolation condition)悉生和无菌动物实验悉生和无菌动物实验悉生和无菌动物实验悉生和无菌动物实验第5页/共92页（一）普通动物实验观察室环境设施（一）普通动物实验观察室环境设施条件要求条件要求1 1 环境特点环境特点普通环境设施符合动物饲养的基本要求，普通环境设施符合动物饲养的基本要求，不能完全控制传染因子；不能完全控制传染因子；没有进行严格的没有进行严格的环境控制和微生物控制，但也应达到普通动环境控制和微生物控制，但也应达到普通动物环境条件的基本要求；物环境条件的基本要求；普通环境室内空普通环境室内空气与外界直接相通；气与外界直接相通；适用于普通动物实验适用于普通动物实验的饲养观察的饲养观察2 2饲养观察室内需要的基本设备饲养观察室内需要的基本设备第6页/共92页（二）清洁动物实验观察室环境设施条件要求（二）清洁动物实验观察室环境设施条件要求1 1、清清洁洁级级动动物物实实验验要要求求饲饲养养在在温温湿湿度度恒恒定定的的（半半）屏障系统中。屏障系统中。其特点是其特点是：与外界隔离，有缓冲间。与外界隔离，有缓冲间。物品经灭菌处理后进入屏障系统中。物品经灭菌处理后进入屏障系统中。实验人员进出要严格按屏障系统操作规程操作实验人员进出要严格按屏障系统操作规程操作 2 2、屏障系统饲养观察室内的基本设备、屏障系统饲养观察室内的基本设备 必需设备：超净工作台必需设备：超净工作台第7页/共92页(三）三）SPFSPF级以上动物实验观察室环境设施级以上动物实验观察室环境设施 条件要求条件要求1.SPF1.SPF级级以以上上的的动动物物观观察察饲饲养养在在屏屏障障系系统统或或隔隔离离系系统统中中 其特点是其特点是：空气、饲料、水、垫料和实验器具均应无菌空气、饲料、水、垫料和实验器具均应无菌.实验人员要严格按隔离系统操作规程操作。实验人员要严格按隔离系统操作规程操作。2 2隔离环境观察室内的基本设备隔离环境观察室内的基本设备 必需设备：超净工作台必需设备：超净工作台第8页/共92页空气层流架的操作规程空气层流架的操作规程n n使用前，使用前，使用前，使用前，清洁层流架的内环境，消毒，灭清洁层流架的内环境，消毒，灭清洁层流架的内环境，消毒，灭清洁层流架的内环境，消毒，灭菌。菌。菌。菌。n n进入层流架的一切物品必须经过灭菌处理。进入层流架的一切物品必须经过灭菌处理。进入层流架的一切物品必须经过灭菌处理。进入层流架的一切物品必须经过灭菌处理。n n打开层流架门之前，应加大层流架内的送打开层流架门之前，应加大层流架内的送打开层流架门之前，应加大层流架内的送打开层流架门之前，应加大层流架内的送风量，以避免架内环境污染。风量，以避免架内环境污染。风量，以避免架内环境污染。风量，以避免架内环境污染。n n实验操作时，须在超净工作台内进行。实验操作时，须在超净工作台内进行。实验操作时，须在超净工作台内进行。实验操作时，须在超净工作台内进行。第9页/共92页第10页/共92页IVCIVC系统的操作规程系统的操作规程1 1、IVCIVC系统的安装和消毒系统的安装和消毒2 2、IVCIVC系统上的动物饲养盒必须在超系统上的动物饲养盒必须在超 净工作台净工作台 内打开，无菌内打开，无菌 操操 作。作。3 3、实验完毕，动物饲养盒必须在超净、实验完毕，动物饲养盒必须在超净 工作台内盖好上盖工作台内盖好上盖 后，方能离开超后，方能离开超净工作台，放在净工作台，放在IVCIVC系统上。系统上。4 4、检查进气孔和排气孔是否成功对接、检查进气孔和排气孔是否成功对接第11页/共92页第12页/共92页二二.实验药品、试剂的准备实验药品、试剂的准备三三.实验器械的准备实验器械的准备 实实验验器器械械准准备备得得充充分分、适适当当，有有助助于于实实验验的的顺顺利完成。利完成。不不同同类类型型、部部位位的的实实验验使使用用的的实实验验器器械械种种类类、数量不尽一致。数量不尽一致。实实验验器器械械包包括括完完成成实实验验所所需需要要的的检检测测仪仪器器、实实验时动物的固定器械、动物外科手术器械。验时动物的固定器械、动物外科手术器械。第13页/共92页(一一)常用动物外科手术器械常用动物外科手术器械（二）手术器械的消毒二）手术器械的消毒 手手术术器器械械常常用用的的消消毒毒方方法法有有：煮煮沸沸灭灭菌菌法法、高压蒸气灭菌法和化学药品灭菌法。高压蒸气灭菌法和化学药品灭菌法。（三三）敷敷料料、手手术术巾巾、手手术术衣衣、帽帽、口口罩罩的的消消毒毒.第14页/共92页四四.手术人员的准备手术人员的准备 为为了了保保证证无无菌菌手手术术的的进进行行,手手术术人人员员应应作作一一系系列列的的无无菌菌的的准准备备。虽虽然然实实验验动动物物有有不不同同的的微微生生物物控控制制等等级级，但但手手术术人人员员不不管管做做什什么么等等级级动动物物的的手手术术，都都应应该该遵遵循循无无菌菌手手术术的的基基本本原原则则。因因此此手手术术人人员员在在术术前应作下列准备前应作下列准备:（(一）手术所需人数一）手术所需人数 （二）（二）更衣更衣 （三）（三）手、臂的清洁和消毒手、臂的清洁和消毒 第15页/共92页 特殊实验动物设施包括三类：特殊实验动物设施包括三类：特殊实验动物设施包括三类：特殊实验动物设施包括三类：感染（生物感染（生物感染（生物感染（生物危害）实验设施、化学污染动物实验设施、危害）实验设施、化学污染动物实验设施、危害）实验设施、化学污染动物实验设施、危害）实验设施、化学污染动物实验设施、放射性污染设施。放射性污染设施。放射性污染设施。放射性污染设施。生物危害特殊动物实验设施是指用病原体生物危害特殊动物实验设施是指用病原体生物危害特殊动物实验设施是指用病原体生物危害特殊动物实验设施是指用病原体对动物进行实验感染的一种特殊屏障设施。对动物进行实验感染的一种特殊屏障设施。对动物进行实验感染的一种特殊屏障设施。对动物进行实验感染的一种特殊屏障设施。目前，国内外根据病原微生物对人和动物目前，国内外根据病原微生物对人和动物目前，国内外根据病原微生物对人和动物目前，国内外根据病原微生物对人和动物的危害程度把感染动物实验设施分：的危害程度把感染动物实验设施分：的危害程度把感染动物实验设施分：的危害程度把感染动物实验设施分：BSL1(P1)BSL1(P1)BSL1(P1)BSL1(P1)、BSL2(P2)BSL2(P2)BSL2(P2)BSL2(P2)、BSL3(P3)BSL3(P3)BSL3(P3)BSL3(P3)、BSL4(P4)BSL4(P4)BSL4(P4)BSL4(P4)级。级。级。级。第16页/共92页动物设施的防护水平：实验操作和安全设备汇总动物设施的防护水平：实验操作和安全设备汇总 危险度等级危险度等级 防护水平防护水平 实验操作和安全设备实验操作和安全设备 1 1级级 ABSL-1 ABSL-1 限制出入，穿戴防护服和手套限制出入，穿戴防护服和手套 2 2级级 ABSL-2 ABSL-1ABSL-2 ABSL-1的操作加：危险警告标志。的操作加：危险警告标志。可产生气溶胶的操作应使用可产生气溶胶的操作应使用级或级或 级级BSCBSC。废物和饲养笼舍在清洗前先。废物和饲养笼舍在清洗前先 清除污染。清除污染。3 3级级 ABSL-3 ABSL-2ABSL-3 ABSL-2的操作加：准入控制。所有的操作加：准入控制。所有 操作均在操作均在BSCBSC内进行，并穿着特殊防内进行，并穿着特殊防 护服。护服。4 4级级 ABSL-4 ABSL-3ABSL-4 ABSL-3的操作加：严格限制出入。进的操作加：严格限制出入。进 入前更衣。配备入前更衣。配备级级BSCBSC或正压服所或正压服所 有废物在清除设施前需先清除污染。有废物在清除设施前需先清除污染。ABSL：动物生物安全水平；：动物生物安全水平；BSC：生物安全柜。：生物安全柜。第17页/共92页动物的引进动物的引进在在动动物物实实验验的的各各项项准准备备工工作作中中，动动物物的的引引进进是是一一个个重重要要的的环环节节。在在引引进进动动物物前前，应应确确定定引引进进动动物物的的种种类类、品品系系、规规格格、数数量量及及动动物物微微生生物物控控制制等等级级等等。引引进进动动物物前前，应应检检查查各各项项准准备备工工作作是是否否就就绪绪，如如饲饲养养动动物物的的器器具具、器器材材是是否否准准备备好好，饲饲养养室室的的卫卫生生和和消消毒毒情情况况；此此外外，还还应应检检查查动动物物的的笼笼卡卡、实实验验记记录录本本、垫垫料料、饲饲料料、秤秤等等实实验验必必须须品品是否准备好。是否准备好。第18页/共92页购入动物时应注意以下几个方面的问题购入动物时应注意以下几个方面的问题:1.1.购买动物时应向供应部门索取动物的相关资料，购买动物时应向供应部门索取动物的相关资料，如动物的遗传背景和微生物资料（动物质量合格证）如动物的遗传背景和微生物资料（动物质量合格证），以及动物品系、年龄、体重、胎次等。，以及动物品系、年龄、体重、胎次等。2.2.购买动物时应仔细观察动物的状态，对动物进购买动物时应仔细观察动物的状态，对动物进行外观的健康检查：皮毛是否有光泽、眼有没有眼行外观的健康检查：皮毛是否有光泽、眼有没有眼屎、四肢有无肿胀溃烂、肛门周围有无脏物等。同屎、四肢有无肿胀溃烂、肛门周围有无脏物等。同时要核对动物的数量等是否符合实验要求。时要核对动物的数量等是否符合实验要求。3.3.根据试验观察时间长短的需要，同时购入或领取根据试验观察时间长短的需要，同时购入或领取相应数量的饲料和垫料。相应数量的饲料和垫料。第19页/共92页动物的运输动物的运输n n若是从外地购入动物若是从外地购入动物购入动物时，无购入动物时，无论运输距离的远近，都应考虑运输环论运输距离的远近，都应考虑运输环境的温度、湿度、饮食以及途中污染境的温度、湿度、饮食以及途中污染和窒息死亡等问题。和窒息死亡等问题。n n需若是购入或领取清洁级以上的实验需若是购入或领取清洁级以上的实验动物，动物，应注意运输工具。应注意运输工具。应采取带有应采取带有空气过滤膜的无菌运输罐或带过滤帽空气过滤膜的无菌运输罐或带过滤帽的笼盒运输，严格检查其密封状况。的笼盒运输，严格检查其密封状况。n n新购进的动物最好不要立刻进行动物新购进的动物最好不要立刻进行动物实验，应将动物雌雄分开，并分笼在实验，应将动物雌雄分开，并分笼在隔离区饲养一段时间，以便动物得以隔离区饲养一段时间，以便动物得以恢复体能并适应新的环境。恢复体能并适应新的环境。第20页/共92页第二节实验动物的分组和标记第二节实验动物的分组和标记在实验前对动物进行随机分组和编号标记。在实验前对动物进行随机分组和编号标记。在实验前对动物进行随机分组和编号标记。在实验前对动物进行随机分组和编号标记。分分 组组 方方 法法随机化分组方法随机化分组方法单纯随机抽样单纯随机抽样均衡随机抽样均衡随机抽样随机化方法随机化方法抽签法：用带数字的卡片（如纸牌）抽签法：用带数字的卡片（如纸牌）随机抽取。若分两组，可用奇偶数为随机抽取。若分两组，可用奇偶数为代表；若分四组，可用代表；若分四组，可用4 4种花色为代种花色为代表随机分组表随机分组 第21页/共92页抽卡片法随机分组抽卡片法随机分组 动物编号动物编号动物编号动物编号随机分组随机分组随机分组随机分组 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 151 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15抽卡数字抽卡数字抽卡数字抽卡数字 8 6 4 7 10 13 7 7 6 2 11 4 2 12 9 8 6 4 7 10 13 7 7 6 2 11 4 2 12 9 除以除以除以除以3 3的余数的余数的余数的余数 2 0 1 1 1 2 1 1 0 2 2 1 2 0 02 0 1 1 1 2 1 1 0 2 2 1 2 0 0初步分组初步分组初步分组初步分组 c a b b b c b b a c c b c a ac a b b b c b b a c c b c a a 表表表表中中中中b b组组组组为为为为6 6只只只只，a a组组组组为为为为4 4只只只只，需需需需再再再再调调调调整整整整。再再再再重重重重新新新新抽抽抽抽一一一一卡卡卡卡片片片片，将将将将其其其其数数数数字字字字除除除除以以以以6 6得得得得余余余余数数数数为为为为几几几几即即即即挑挑挑挑第第第第几几几几只只只只放放放放入入入入第第第第三三三三组。组。组。组。随机数字表法：基本同上随机数字表法：基本同上随机数字表法：基本同上随机数字表法：基本同上第22页/共92页动物的标记动物的标记 良好的标记方法应保证号码清楚，简便易认、耐久适用，对良好的标记方法应保证号码清楚，简便易认、耐久适用，对良好的标记方法应保证号码清楚，简便易认、耐久适用，对良好的标记方法应保证号码清楚，简便易认、耐久适用，对动物无毒性，操作简便且长时间能够识别。动物无毒性，操作简便且长时间能够识别。动物无毒性，操作简便且长时间能够识别。动物无毒性，操作简便且长时间能够识别。染色法：大、小鼠、豚鼠常用染色法：大、小鼠、豚鼠常用染色法：大、小鼠、豚鼠常用染色法：大、小鼠、豚鼠常用3.5-53.5-53.5-53.5-5苦味酸溶液涂成黄色；苦味酸溶液涂成黄色；苦味酸溶液涂成黄色；苦味酸溶液涂成黄色；兔、猫、犬用兔、猫、犬用兔、猫、犬用兔、猫、犬用2 2 2 2硝酸银溶液涂成咖啡色。硝酸银溶液涂成咖啡色。硝酸银溶液涂成咖啡色。硝酸银溶液涂成咖啡色。烙印法：大、中型动物烙印法：大、中型动物烙印法：大、中型动物烙印法：大、中型动物针刺法：兔针刺法：兔针刺法：兔针刺法：兔号牌法：犬、猴、猫等大动物号牌法：犬、猴、猫等大动物号牌法：犬、猴、猫等大动物号牌法：犬、猴、猫等大动物穿耳孔法（耳缘剪孔）：小鼠穿耳孔法（耳缘剪孔）：小鼠穿耳孔法（耳缘剪孔）：小鼠穿耳孔法（耳缘剪孔）：小鼠断趾编号：小鼠断趾编号：小鼠断趾编号：小鼠断趾编号：小鼠剪尾编号：大、小鼠，仅限与两组动物区分剪尾编号：大、小鼠，仅限与两组动物区分剪尾编号：大、小鼠，仅限与两组动物区分剪尾编号：大、小鼠，仅限与两组动物区分被毛剪号：大动物被毛剪号：大动物被毛剪号：大动物被毛剪号：大动物笼子标号：笼子标号：笼子标号：笼子标号：第23页/共92页小鼠的标记小鼠的标记第24页/共92页第25页/共92页213456789102030407050806090第26页/共92页动物的管理动物的管理qq经经常常性性管管理理：保保证证动动物物正正常常饲饲养养所所必必须须的的一一切切条条件件。每每天天观观察察动动物物的的状状态态并并认认真真做做好好记记录录，搞搞好好动动物物的的饮饮食食卫卫生生（每每日日添添加加新新鲜鲜的的饲饲料料和和饮饮水水，每每周周更更换换两两次次干干净净的的垫垫料料，做做好好常常规规消消毒毒工工作作），防防止止动动物物的的非非正正常常死死亡亡或或意外损伤。意外损伤。qq特殊管理：在给动物施加一定的实验特殊管理：在给动物施加一定的实验因素时，如麻醉、手术等，要对动物因素时，如麻醉、手术等，要对动物进行特殊管理。进行特殊管理。“三分治，七分养三分治，七分养”，对动物也一样。防止动物窒息，控，对动物也一样。防止动物窒息，控制伤口感染，消毒实验环境，麻醉过制伤口感染，消毒实验环境，麻醉过程中实施保温等措施在不同的情况下程中实施保温等措施在不同的情况下都需要进行都需要进行 。第27页/共92页动物的性别判定动物的性别判定判断方法判断方法 根据动物的生殖器与肛门之间的距根据动物的生殖器与肛门之间的距离远近进行判断，距离长的是雄性，离远近进行判断，距离长的是雄性，短的为雌性。短的为雌性。雄雄 雌雌第28页/共92页小鼠的性别判定小鼠的性别判定第29页/共92页第三节第三节 实验动物的抓取与固定实验动物的抓取与固定 注意自我防护注意自我防护注意自我防护注意自我防护动物在保定过程中如果逃逸，要及时抓捕。动物在保定过程中如果逃逸，要及时抓捕。动物在保定过程中如果逃逸，要及时抓捕。动物在保定过程中如果逃逸，要及时抓捕。避免损伤动物。避免损伤动物。避免损伤动物。避免损伤动物。第30页/共92页小鼠的抓取与固定小鼠的抓取与固定手固定手固定手固定手固定-灌胃、腹腔给药、取血等灌胃、腹腔给药、取血等灌胃、腹腔给药、取血等灌胃、腹腔给药、取血等固定器固定固定器固定固定器固定固定器固定-静脉给药、尾静脉取血静脉给药、尾静脉取血静脉给药、尾静脉取血静脉给药、尾静脉取血固定板固定固定板固定固定板固定固定板固定-外科手术等外科手术等外科手术等外科手术等第31页/共92页小鼠的抓取小鼠的抓取第32页/共92页小鼠的固定小鼠的固定第33页/共92页第34页/共92页第35页/共92页大鼠大鼠的固定的固定第36页/共92页家兔的抓取与固定家兔的抓取与固定1.1.手固定手固定2.2.固定器固定固定器固定3.3.手术固定台固定手术固定台固定第37页/共92页兔的兔的抓取抓取第38页/共92页第39页/共92页兔的固定兔的固定第40页/共92页豚鼠的抓取与固定豚鼠的抓取与固定第41页/共92页豚鼠的抓取豚鼠的抓取第42页/共92页第43页/共92页犬的抓取与固定犬的抓取与固定n n犬的捉拿保定方法较多。未经训练和调教的犬性情凶恶，犬的捉拿保定方法较多。未经训练和调教的犬性情凶恶，犬的捉拿保定方法较多。未经训练和调教的犬性情凶恶，犬的捉拿保定方法较多。未经训练和调教的犬性情凶恶，为防止在保定时被其咬伤，应对其头部进行保定。捉拿犬为防止在保定时被其咬伤，应对其头部进行保定。捉拿犬为防止在保定时被其咬伤，应对其头部进行保定。捉拿犬为防止在保定时被其咬伤，应对其头部进行保定。捉拿犬时可用铁钳固定犬的颈部，用长一米左右的绷带，打一个时可用铁钳固定犬的颈部，用长一米左右的绷带，打一个时可用铁钳固定犬的颈部，用长一米左右的绷带，打一个时可用铁钳固定犬的颈部，用长一米左右的绷带，打一个猪蹄扣套在鼻面部，使绷带两端位于下颌处并向后引至颈猪蹄扣套在鼻面部，使绷带两端位于下颌处并向后引至颈猪蹄扣套在鼻面部，使绷带两端位于下颌处并向后引至颈猪蹄扣套在鼻面部，使绷带两端位于下颌处并向后引至颈部打结固定。还有一种使用网口的方法也较简单，即用皮部打结固定。还有一种使用网口的方法也较简单，即用皮部打结固定。还有一种使用网口的方法也较简单，即用皮部打结固定。还有一种使用网口的方法也较简单，即用皮革、金属丝或棉麻制成的口网，套在犬口部，并将其附带革、金属丝或棉麻制成的口网，套在犬口部，并将其附带革、金属丝或棉麻制成的口网，套在犬口部，并将其附带革、金属丝或棉麻制成的口网，套在犬口部，并将其附带结于耳后颈部防止脱落。结于耳后颈部防止脱落。结于耳后颈部防止脱落。结于耳后颈部防止脱落。如实验需要麻醉时，可麻醉后去除铁钳仰卧于如实验需要麻醉时，可麻醉后去除铁钳仰卧于如实验需要麻醉时，可麻醉后去除铁钳仰卧于如实验需要麻醉时，可麻醉后去除铁钳仰卧于VVVV型犬实验型犬实验型犬实验型犬实验台上，拉出犬舌，最好用一塑料棒闩于犬上下臼齿之间并台上，拉出犬舌，最好用一塑料棒闩于犬上下臼齿之间并台上，拉出犬舌，最好用一塑料棒闩于犬上下臼齿之间并台上，拉出犬舌，最好用一塑料棒闩于犬上下臼齿之间并用绷带固定好。拉出的犬舌上应放一块沾有生理盐水的纱用绷带固定好。拉出的犬舌上应放一块沾有生理盐水的纱用绷带固定好。拉出的犬舌上应放一块沾有生理盐水的纱用绷带固定好。拉出的犬舌上应放一块沾有生理盐水的纱布，以免损伤犬舌。头部和四肢的保定与兔相似，可根据布，以免损伤犬舌。头部和四肢的保定与兔相似，可根据布，以免损伤犬舌。头部和四肢的保定与兔相似，可根据布，以免损伤犬舌。头部和四肢的保定与兔相似，可根据具体实验条件而定。具体实验条件而定。具体实验条件而定。具体实验条件而定。第44页/共92页猕猴的抓取与固定猕猴的抓取与固定第45页/共92页其它动物的抓取与固定其它动物的抓取与固定第46页/共92页羊的固定羊的固定第47页/共92页两栖类动物的抓取与固定两栖类动物的抓取与固定第48页/共92页AB第49页/共92页鸟类的抓取与固定鸟类的抓取与固定第50页/共92页第四节第四节 实验动物麻醉方法实验动物麻醉方法 恰恰恰恰当当当当的的的的麻麻麻麻醉醉醉醉方方方方法法法法对对对对保保保保证证证证动动动动物物物物试试试试验验验验的的的的顺顺顺顺利利利利进进进进行行行行和和和和获获获获得得得得满满满满意意意意的的的的试试试试验验验验结结结结果果果果有有有有着着着着非非非非常常常常重重重重要要要要的的的的作作作作用用用用。有有有有全全全全身身身身麻麻麻麻醉醉醉醉和和和和局局局局部部部部麻麻麻麻醉醉醉醉，局局局局麻麻麻麻仅仅仅仅适适适适用用用用大大大大、小小小小鼠鼠鼠鼠，沙沙沙沙鼠鼠鼠鼠，且且且且对对对对豚豚豚豚鼠鼠鼠鼠和和和和兔兔兔兔也也也也很很很很少使用，在这里就不述。少使用，在这里就不述。少使用，在这里就不述。少使用，在这里就不述。全全全全身身身身麻麻麻麻醉醉醉醉分分分分为为为为药药药药物物物物麻麻麻麻醉醉醉醉和和和和气气气气体体体体吸吸吸吸入入入入麻麻麻麻醉醉醉醉两两两两种种种种。药药药药物物物物麻麻麻麻醉醉醉醉虽虽虽虽可可可可以以以以长长长长时时时时间间间间保保保保持持持持深深深深麻麻麻麻醉醉醉醉期期期期，但但但但如如如如不不不不精精精精确确确确的的的的考考考考虑虑虑虑动动动动物物物物的的的的种种种种类类类类、品品品品系系系系、年年年年龄龄龄龄、性性性性别别别别以以以以及及及及健健健健康康康康状状状状况况况况而而而而给给给给药药药药，就就就就会会会会导导导导致致致致动动动动物物物物的的的的死死死死亡亡亡亡；吸吸吸吸入入入入麻麻麻麻醉醉醉醉保保保保持持持持深深深深麻麻麻麻醉醉醉醉期期期期较较较较短短短短，还还还还必必必必须须须须辅以其它辅助麻醉方法，比较繁杂。辅以其它辅助麻醉方法，比较繁杂。辅以其它辅助麻醉方法，比较繁杂。辅以其它辅助麻醉方法，比较繁杂。第51页/共92页麻醉前的准备麻醉前的准备在麻醉前几天要注意观察动物的采在麻醉前几天要注意观察动物的采食情况。对猫、犬、猪或非人灵长食情况。对猫、犬、猪或非人灵长类大动物，在麻醉前类大动物，在麻醉前8-12h8-12h应禁食，应禁食，以免麻醉或手术过程中发生呕吐，以免麻醉或手术过程中发生呕吐，家兔和啮齿类动物无呕吐反射，术家兔和啮齿类动物无呕吐反射，术前无需禁食。动物在麻醉前给予一前无需禁食。动物在麻醉前给予一定量的饮水。定量的饮水。大动物实验前要给予一定量的安定大动物实验前要给予一定量的安定剂和阿脱品类药物，减轻动物的过剂和阿脱品类药物，减轻动物的过度紧张和减少唾液分泌以利于气管度紧张和减少唾液分泌以利于气管插管操作。插管操作。根据实验部位和种类，给予动物脱根据实验部位和种类，给予动物脱毛等毛等。第52页/共92页常用麻醉药物常用麻醉药物全身麻醉药：全身麻醉药：乙醚乙醚 戊巴比妥钠戊巴比妥钠 水合氯醛水合氯醛 氯安酮氯安酮局部麻醉剂：局部麻醉剂：普鲁卡因普鲁卡因/利多卡因利多卡因第53页/共92页麻醉方法麻醉方法全身麻醉：全身麻醉：全身麻醉：全身麻醉：吸入麻醉吸入麻醉吸入麻醉吸入麻醉 腹腔或静脉麻醉腹腔或静脉麻醉腹腔或静脉麻醉腹腔或静脉麻醉局部麻醉局部麻醉局部麻醉局部麻醉第54页/共92页注意事项注意事项乙醚为易燃物品，要注意防火；乙醚为易燃物品，要注意防火；准确计算麻醉剂量，避免麻醉过量致准确计算麻醉剂量，避免麻醉过量致使动物中毒死亡，有些动物存在个体使动物中毒死亡，有些动物存在个体差异，应具体对待。差异，应具体对待。注射时，一般要求缓慢，随时观察动注射时，一般要求缓慢，随时观察动物的反应，适可而止，当动物肌肉松物的反应，适可而止，当动物肌肉松弛，角膜反射消失，足爪紧张性下降弛，角膜反射消失，足爪紧张性下降时，应慢速或停止注射药物。时，应慢速或停止注射药物。麻醉时需注意保温。麻醉时需注意保温。作慢性实验时，在寒冷季节，要将麻作慢性实验时，在寒冷季节，要将麻醉剂加温至动物体温水平。醉剂加温至动物体温水平。麻醉过量时应采取立即抢救措施。麻醉过量时应采取立即抢救措施。注意人员安全注意人员安全 第55页/共92页实验动物的除毛方法实验动物的除毛方法拔毛法：拔毛法：拔毛法：拔毛法：剪毛法：急性实验常用剪毛法：急性实验常用剪毛法：急性实验常用剪毛法：急性实验常用剃毛法：剃毛法：剃毛法：剃毛法：脱毛法：脱毛液脱毛法：脱毛液脱毛法：脱毛液脱毛法：脱毛液8%8%8%8%硫化钠水溶液硫化钠水溶液硫化钠水溶液硫化钠水溶液 第56页/共92页第五节第五节 实验动物的给药、采血实验动物的给药、采血方法方法 实验动物的给药方法有：摄入法实验动物的给药方法有：摄入法实验动物的给药方法有：摄入法实验动物的给药方法有：摄入法 （用于消化道）、（用于消化道）、（用于消化道）、（用于消化道）、注射法、涂布法（用于皮肤）、吸入法（用于呼吸注射法、涂布法（用于皮肤）、吸入法（用于呼吸注射法、涂布法（用于皮肤）、吸入法（用于呼吸注射法、涂布法（用于皮肤）、吸入法（用于呼吸道）等。道）等。道）等。道）等。第57页/共92页摄入法给药摄入法给药自动口服给药自动口服给药-将药物放入饲料或饮水中将药物放入饲料或饮水中使动物自由饮食。使动物自由饮食。强制灌胃法强制灌胃法-大小鼠：用灌胃针头直接灌大小鼠：用灌胃针头直接灌入胃中，小鼠入胃中，小鼠0.21ml0.21ml，大鼠，大鼠14ml14ml，豚鼠，豚鼠15ml15ml。犬、兔、猫：动物被固定后使用开口器固定犬、兔、猫：动物被固定后使用开口器固定在动物口中，再用灌胃管插入胃中，推入在动物口中，再用灌胃管插入胃中，推入药液即可。实验过程中要注意别将灌胃管药液即可。实验过程中要注意别将灌胃管误入气管误入气管 。第58页/共92页小鼠胃内给药小鼠胃内给药第59页/共92页家兔胃管给药家兔胃管给药第60页/共92页犬的胃管给药犬的胃管给药第61页/共92页猪的胃管给药猪的胃管给药第62页/共92页注射法给药注射法给药皮下注射：一般选择在动物的背部进行皮下注射：一般选择在动物的背部进行皮下注射：一般选择在动物的背部进行皮下注射：一般选择在动物的背部进行皮内注射：局部脱毛消毒后用结核菌素注射器皮内注射：局部脱毛消毒后用结核菌素注射器皮内注射：局部脱毛消毒后用结核菌素注射器皮内注射：局部脱毛消毒后用结核菌素注射器注射注射注射注射肌肉注射：一般选择肌肉发达、无大血管的部肌肉注射：一般选择肌肉发达、无大血管的部肌肉注射：一般选择肌肉发达、无大血管的部肌肉注射：一般选择肌肉发达、无大血管的部位，多选臀部位，多选臀部位，多选臀部位，多选臀部腹腔注射：腹腔注射：腹腔注射：腹腔注射：静脉注射：大、小鼠常采用尾静脉注射静脉注射：大、小鼠常采用尾静脉注射静脉注射：大、小鼠常采用尾静脉注射静脉注射：大、小鼠常采用尾静脉注射 豚鼠采用前肢皮下头静脉或后肢股静豚鼠采用前肢皮下头静脉或后肢股静豚鼠采用前肢皮下头静脉或后肢股静豚鼠采用前肢皮下头静脉或后肢股静脉脉脉脉 兔兔兔兔-耳缘静脉耳缘静脉耳缘静脉耳缘静脉 犬犬犬犬-前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉第63页/共92页小鼠尾静脉给药小鼠尾静脉给药第64页/共92页小鼠尾静脉注射方法小鼠尾静脉注射方法小鼠尾静脉注射方法小鼠尾静脉注射方法第65页/共92页小鼠皮下注射小鼠皮下注射第66页/共92页第67页/共92页小鼠腹腔注射小鼠腹腔注射第68页/共92页兔的静脉给药兔的静脉给药第69页/共92页其他给药途径其他给药途径呼吸道给药：粉尘、气体、蒸汽或雾状药物、毒气呼吸道给药：粉尘、气体、蒸汽或雾状药物、毒气呼吸道给药：粉尘、气体、蒸汽或雾状药物、毒气呼吸道给药：粉尘、气体、蒸汽或雾状药物、毒气等需要呼吸道给药。等需要呼吸道给药。等需要呼吸道给药。等需要呼吸道给药。皮肤给药：外用药物、致敏试验、局部毒性等实验皮肤给药：外用药物、致敏试验、局部毒性等实验皮肤给药：外用药物、致敏试验、局部毒性等实验皮肤给药：外用药物、致敏试验、局部毒性等实验需进行皮肤给药。需进行皮肤给药。需进行皮肤给药。需进行皮肤给药。脑内给药：微生物学实验脑内给药：微生物学实验脑内给药：微生物学实验脑内给药：微生物学实验第70页/共92页动物实验中药物剂量的换算动物实验中药物剂量的换算 动物实验所用的药物剂量一般按毫克动物实验所用的药物剂量一般按毫克动物实验所用的药物剂量一般按毫克动物实验所用的药物剂量一般按毫克/千克体千克体千克体千克体重计算。若无相关资料，一般先用小鼠半数致死重计算。若无相关资料，一般先用小鼠半数致死重计算。若无相关资料，一般先用小鼠半数致死重计算。若无相关资料，一般先用小鼠半数致死量的量的量的量的1/101/101/101/101/51/51/51/5进行尝试，也可参考其他动物或进行尝试，也可参考其他动物或进行尝试，也可参考其他动物或进行尝试，也可参考其他动物或人的剂量用体表面积之比来换算。一般说来，动人的剂量用体表面积之比来换算。一般说来，动人的剂量用体表面积之比来换算。一般说来，动人的剂量用体表面积之比来换算。一般说来，动物的耐受性比人大，因此单位体重的用药量比人物的耐受性比人大，因此单位体重的用药量比人物的耐受性比人大，因此单位体重的用药量比人物的耐受性比人大，因此单位体重的用药量比人要大，可按以下比例换算：如人的用药量为要大，可按以下比例换算：如人的用药量为要大，可按以下比例换算：如人的用药量为要大，可按以下比例换算：如人的用药量为1 1 1 1，小鼠、大鼠为小鼠、大鼠为小鼠、大鼠为小鼠、大鼠为2525252550505050，兔、豚鼠，兔、豚鼠，兔、豚鼠，兔、豚鼠1515151520202020，猫、狗，猫、狗，猫、狗，猫、狗为为为为5 5 5 510101010。第71页/共92页动物的采血方法动物的采血方法 根据采血量的不同应选择不同的采血方法。根据采血量的不同应选择不同的采血方法。根据采血量的不同应选择不同的采血方法。根据采血量的不同应选择不同的采血方法。采血部位及采血量采血部位及采血量采血部位及采血量采血部位及采血量 采血部位采血部位 血血量（量（mlml）部部小鼠小鼠大鼠大鼠采血前置采血前置分分尾静脉尾静脉0.03-0.050.03-0.050.3-0.50.3-0.5采采尾动脉尾动脉0.1-0.30.1-0.30.5-1.00.5-1.0血血眼窝静脉丛眼窝静脉丛0.05-0.10.05-0.10.5-1.00.5-1.0麻醉（不麻麻醉（不麻醉也可）醉也可）第72页/共92页实验动物的采血方法实验动物的采血方法采采全全血血采血部位采血部位采采血血量量（ml）小鼠小鼠大鼠大鼠采血前置采血前置颈静脉颈静脉0.51.035麻醉手术麻醉手术颈动脉颈动脉0.51.0麻醉手术麻醉手术断头断头0.51.0510麻醉（不麻醉（不麻醉也可）麻醉也可）心脏心脏0.50.835麻醉手术麻醉手术后大静脉后大静脉0.51.024麻醉手术麻醉手术腹大动脉腹大动脉58麻醉手术麻醉手术第73页/共92页采血方法采血方法 采血部位采血部位采血量采血量（mlml）采血前处理采血前处理豚鼠豚鼠耳动脉（部分）耳动脉（部分）0.50.5耳静脉（部分）耳静脉（部分）0.50.5心脏（全）心脏（全）5-10 5-10全采血时也有麻