实验2植物组织水势的测定(小液流法).ppt

植物生物学实验植物生物学实验实验二实验二 植物组织水势植物组织水势的测定（小液流法）的测定（小液流法）1.了解测定植物组织水势的方法及其优缺点了解测定植物组织水势的方法及其优缺点2.学习用小液流法测定植物组织水势的方法学习用小液流法测定植物组织水势的方法目的要求目的要求:植物组织水势的测定植物组织水势的测定 水水势势表表示示水水分分的的化化学学势势，象象电电流流由由高高电电位位处处流流向向低低电电位位处处一一样样，水水从从水水势高处流向低处。势高处流向低处。植植物物体体细细胞胞之之间间，组组织织之之间间以以及及植植物物和和环环境境之之间间的的水水分分移移动动方方向向都都由由水水势势差决定。差决定。植物组织水势的测定植物组织水势的测定 液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法 压力平衡法：压力室法压力平衡法：压力室法压力平衡法：压力室法压力平衡法：压力室法气相平衡法：露点法气相平衡法：露点法气相平衡法：露点法气相平衡法：露点法 植物组织水势和渗透势的测定方法：植物组织水势和渗透势的测定方法：植物组织水势和渗透势的测定方法：植物组织水势和渗透势的测定方法：水水水水势势势势测测测测定定定定冰点降低法冰点降低法冰点降低法冰点降低法渗渗渗渗透透透透势势势势蒸气压渗透压计法蒸气压渗透压计法蒸气压渗透压计法蒸气压渗透压计法植物组织水势的测定植物组织水势的测定一、一、液体交换法测定植物组织水势液体交换法测定植物组织水势 小液流法小液流法小液流法测定植物组织水势的原理？小液流法测定植物组织水势的原理？问题问题：植物组织水势的测定植物组织水势的测定（一）原理（一）原理 1、当植物组织与外液接触时发生水分交换：、当植物组织与外液接触时发生水分交换：植植物物组组织织的的水水势势低低于于外外液液的的渗渗透透势势（溶溶质质势），组织吸水，势），组织吸水，外液浓度变大；外液浓度变大；植物植物 S 若若两两者者相相等等，则则水水分分交交换换保保持持动动态态平平衡衡，外液浓度保持不变；外液浓度保持不变；植物植物S植物组织水势的测定植物组织水势的测定 2、同一种物质浓度不同时其比重不一样，同一种物质浓度不同时其比重不一样，浓度大的比重大，把高浓度的溶液一小液滴放浓度大的比重大，把高浓度的溶液一小液滴放到低浓度溶液中时，液滴下沉；反之则上升。到低浓度溶液中时，液滴下沉；反之则上升。3、根根据据外外液液浓浓度度的的变变化化情情况况即即可可确确定定与与植植物物组组织织相相同同水水势势的的溶溶液液浓浓度度。根根据据以以下下公公式式计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。植物组织水势的测定植物组织水势的测定 【实验原理实验原理】植物材料浸入植物材料浸入不同浓度溶液中不同浓度溶液中植物材料水势植物材料水势低于溶液水势低于溶液水势植物材料水势植物材料水势等于溶液水势等于溶液水势植物材料水势植物材料水势高于溶液水势高于溶液水势材料吸水材料吸水外界溶液浓度变大外界溶液浓度变大比重变大比重变大外界溶液浓度不变外界溶液浓度不变比重不变比重不变材料失水材料失水外界溶液浓度变小外界溶液浓度变小比重变小比重变小植物组织水势的测定植物组织水势的测定浸过材料浸过材料的溶液的溶液滴回滴回同一浓度而未浸过材料同一浓度而未浸过材料的溶液中的溶液中 比重小的液流上浮比重小的液流上浮 比重不变的液流静止比重不变的液流静止比重大的液流下沉比重大的液流下沉 此溶液的水势即等于所测材料的水势此溶液的水势即等于所测材料的水势 溶液渗透势的计算：溶液渗透势的计算：S=iCRT 式中式中式中式中 S S溶液的渗透势，以溶液的渗透势，以溶液的渗透势，以溶液的渗透势，以MPaMPa为单位；为单位；为单位；为单位；R R0.008314MPaLmol0.008314MPaLmol1 1KK1 1 T T绝对温度，即绝对温度，即绝对温度，即绝对温度，即273+t273+t；CC溶液的摩尔浓度，以溶液的摩尔浓度，以溶液的摩尔浓度，以溶液的摩尔浓度，以molkgmolkg1 1 为单位为单位为单位为单位 i i溶液的等渗系数，溶液的等渗系数，溶液的等渗系数，溶液的等渗系数，蔗糖蔗糖蔗糖蔗糖=1=1。植物组织水势的测定植物组织水势的测定（二）实验材料（二）实验材料（二）实验材料（二）实验材料 植物组织水势的测定植物组织水势的测定 【用具用具用具用具】试管架；试管试管架；试管试管架；试管试管架；试管;打孔器打孔器打孔器打孔器;毛细管；镊子毛细管；镊子毛细管；镊子毛细管；镊子;青霉素瓶青霉素瓶青霉素瓶青霉素瓶 【试剂试剂试剂试剂】蔗糖蔗糖蔗糖蔗糖溶液溶液溶液溶液 甲烯蓝粉末甲烯蓝粉末甲烯蓝粉末甲烯蓝粉末植物组织水势的测定植物组织水势的测定（三）操作步骤（三）操作步骤（三）操作步骤（三）操作步骤1.1.配制不同浓度的蔗糖溶液配制不同浓度的蔗糖溶液2.2.用打孔器在绣球花的不同部位打用打孔器在绣球花的不同部位打100-200100-200片，混匀，每个青霉素瓶各放片，混匀，每个青霉素瓶各放入入15-2015-20片，（打孔要迅速，避开叶脉，选边缘整齐无破损的叶片）片，（打孔要迅速，避开叶脉，选边缘整齐无破损的叶片）3.3.从配制好的试管中各取从配制好的试管中各取2ml2ml（量准确？）到相应的青霉素瓶或称量瓶中（量准确？）到相应的青霉素瓶或称量瓶中（用一只移液管由低用一只移液管由低 高，不要润洗）高，不要润洗）。放置。放置2030min2030min，期间摇，期间摇动数次，以加速水分平衡。动数次，以加速水分平衡。植物组织水势的测定植物组织水势的测定试管试管123456781molL1molL-1-1蔗糖溶液（蔗糖溶液（ml）20406080100120140160蒸馏水（蒸馏水（ml）180160140120100806040浓度浓度0.10.20.30.40.50.60.70.84.4.染色：用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素瓶染色：用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素瓶中，摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水湿润，中，摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水湿润，加入的甲烯蓝量一定少，使各瓶中颜色基本一致）加入的甲烯蓝量一定少，使各瓶中颜色基本一致）5.5.观察液滴升降：观察液滴升降：用用毛毛细细吸吸管管取取青青霉霉素素瓶瓶有有色色液液 插插入入相相应应试试管管中中部部 缓缓慢慢从从毛毛细细吸吸管管尖尖端端横横向向放放出出一一滴滴蓝蓝色色溶溶液液，轻轻轻轻取取出出滴滴管管，观观察察蓝蓝色色液液滴滴的的移移动动方方向向并并记记录录。（用用白白纸纸划划一一直直线线置置于于试试管管背背面面，方方便便观观察）察）植物组织水势的测定植物组织水势的测定毛细管放置稳定毛细管放置稳定挤出小液滴挤出小液滴取出毛细管取出毛细管观察液滴升降观察液滴升降静止不动静止不动液滴液滴植物材料植物材料溶液浓度变大溶液浓度变大溶液浓度变小溶液浓度变小溶液浓度不变溶液浓度不变w Sw=S6.6.分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找出与组织水分势相当的浓度，根据原理公出与组织水分势相当的浓度，根据原理公式计算出组织的水势式计算出组织的水势。植物组织水势的测定植物组织水势的测定试管号 12345678溶液浓度（mol/l液滴移动的方向 植物组织细胞 w与的比较 溶液浓度溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向具有平衡浓度结果具有平衡浓度结果植物组织水势的测定植物组织水势的测定溶液浓度溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向无平衡浓度结果无平衡浓度结果无平衡浓度结果无平衡浓度结果植物组织水势的测定植物组织水势的测定溶液浓度溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向错误结果错误结果植物组织水势的测定植物组织水势的测定溶液浓度溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向结果是否正确，为什么？结果是否正确，为什么？植物组织水势的测定植物组织水势的测定结果是否正确，为什么？溶液浓度溶液浓度0.050.10.20.30.40.5液滴移动方向液滴移动方向植物组织水势的测定植物组织水势的测定注意事项：注意事项：注意事项：注意事项：所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口。所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口。试管、移液管和毛细管等要洗净烘干，移液管与毛细移液管应从低试管、移液管和毛细管等要洗净烘干，移液管与毛细移液管应从低浓度到高浓度依次吸取溶液。浓度到高浓度依次吸取溶液。甲烯蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可），否则将使实验组甲烯蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可），否则将使实验组各管中溶液的比重均加大。各管中溶液的比重均加大。蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层，影响结蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层，影响结果。果。叶片打孔及投入青霉素瓶中要快，防止水分蒸发影响实验结果。叶片打孔及投入青霉素瓶中要快，防止水分蒸发影响实验结果。释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。思考题：思考题：1 1试述小液流法测定植物组织水势的原理。试述小液流法测定植物组织水势的原理。2.2.小小液液流流法法测测定定植植物物组组织织水水势势时时，为为什什么么操操作作时时，应应强强调调所所用用试试管管、毛毛细细管管应应保保持持干干燥燥？打打取取小小圆圆片片并并投投入入到到试试管管中中时时动动作作应应迅迅速？加入甲烯蓝时不能太多？速？加入甲烯蓝时不能太多？植物组织水势的测定植物组织水势的测定