天然产物化学全套---黄酮类化合物的提取与分离ppt课件.ppt

烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第五章第五章 黄酮类化合物黄酮类化合物（Flavonoids）天然药物化学天然药物化学天然药化教研室天然药化教研室天然药化教研室天然药化教研室主讲教师：宋少江主讲教师：宋少江主讲教师：宋少江主讲教师：宋少江1烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人本本 章章 内内 容容第一节第一节 概述概述第二节第二节 理化性质及显色反应理化性质及显色反应第三节第三节 提取与分离提取与分离第四节第四节 检识与结构鉴定检识与结构鉴定第五节第五节 结构研究实例结构研究实例2烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离一、提取与粗分一、提取与粗分n 苷元苷元：用氯仿、乙醚、乙酸乙酯等回流提取用氯仿、乙醚、乙酸乙酯等回流提取。n 苷及极性大的苷元：苷及极性大的苷元：用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、醇甲醇、醇-水加热提取。水加热提取。n 提取黄酮苷类成分时，应避免发生水解，可按一般提取黄酮苷类成分时，应避免发生水解，可按一般苷的提取方法先破坏酶的活性。苷的提取方法先破坏酶的活性。3烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离一、提取与粗分一、提取与粗分一、提取与粗分一、提取与粗分（一）（一）溶剂萃取法溶剂萃取法 利用化合物的极性利用化合物的极性药材药材水或醇水或醇-水，加热提取水，加热提取提取液提取液浓缩，加浓缩，加34倍量醇倍量醇（水提醇沉法）（水提醇沉法）醇水液醇水液沉淀（水杂）沉淀（水杂）浓缩，回收醇，加水混悬浓缩，回收醇，加水混悬水混悬液水混悬液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取石油醚层石油醚层(叶绿素胡萝卜叶绿素胡萝卜素脂溶性成分素脂溶性成分)氯仿层氯仿层(黄酮苷元黄酮苷元)乙酸乙酯层乙酸乙酯层(极性大苷元极性大苷元极性小的苷极性小的苷)正丁醇层正丁醇层(黄酮苷黄酮苷)水水 层层(多糖蛋白质多糖蛋白质)（系统溶剂萃取）（系统溶剂萃取）4烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人在在60-70下下用浓盐酸调至用浓盐酸调至pH3-4，静置，静置1hr，抽滤，抽滤第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离一、提取与粗分一、提取与粗分一、提取与粗分一、提取与粗分（二）（二）碱提取酸沉淀法碱提取酸沉淀法 利用化合物的酸性利用化合物的酸性n 原理原理：黄酮黄酮 碱碱 成盐（溶于水）成盐（溶于水）沉淀沉淀加酸加酸槐花米粗粉槐花米粗粉加水，搅拌下加入石灰乳至加水，搅拌下加入石灰乳至pH8-9，微沸，微沸30min，趁热抽滤，趁热抽滤残渣残渣滤液滤液滤液滤液沉淀沉淀（粗制芦丁）（粗制芦丁）芦丁芦丁5烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离一、提取与粗分一、提取与粗分一、提取与粗分一、提取与粗分（二）（二）碱提取酸沉淀法碱提取酸沉淀法 利用化合物的酸性利用化合物的酸性n 碱碱：Ca(OH)2水溶液水溶液、Na2CO3水溶液或稀水溶液或稀NaOH溶液溶液（即（即石灰乳或石灰水石灰乳或石灰水）使含酚羟基化合物成盐溶解使含酚羟基化合物成盐溶解 使含使含COOH的果胶、粘液质、蛋白质等杂质形成的果胶、粘液质、蛋白质等杂质形成沉淀而除去沉淀而除去提取时，碱性不宜过强，以免破坏黄酮母核；提取时，碱性不宜过强，以免破坏黄酮母核；酸化时，酸性不宜过强，以免形成盐而溶解。酸化时，酸性不宜过强，以免形成盐而溶解。6烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离一、提取与粗分一、提取与粗分一、提取与粗分一、提取与粗分（三）（三）炭粉吸附法炭粉吸附法 主要用于黄酮苷的精制主要用于黄酮苷的精制药材甲醇提取物药材甲醇提取物分次加入活性炭，搅拌，静置，分次加入活性炭，搅拌，静置，直至上清液无黄酮反应，过滤直至上清液无黄酮反应，过滤吸苷炭末吸苷炭末滤液滤液依次用沸水、沸甲醇、依次用沸水、沸甲醇、7%苯酚苯酚/水、水、15%酚酚/醇溶液进行洗脱醇溶液进行洗脱 沸水洗脱液沸水洗脱液沸沸甲醇洗脱液甲醇洗脱液 7%苯酚苯酚/水洗脱液水洗脱液 15%酚酚/醇洗脱液醇洗脱液 浓缩，加乙醚萃取浓缩，加乙醚萃取 乙醚层（酚）乙醚层（酚）水层（黄酮苷）水层（黄酮苷）7烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离二、分离二、分离化化合合物物的的性性质质极性极性 硅胶硅胶酸性酸性 pH梯度萃取、离子交换树脂梯度萃取、离子交换树脂形成氢键的能力形成氢键的能力 聚酰胺聚酰胺 分子大小分子大小 葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶 特殊结构特殊结构 金属盐络合金属盐络合（如邻二酚羟基）（如邻二酚羟基）8烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离二、分离二、分离二、分离二、分离（一）（一）柱色谱法柱色谱法1、硅胶柱色谱、硅胶柱色谱n 主要用于分离弱极性和中等极性的化合物，应用最主要用于分离弱极性和中等极性的化合物，应用最为广泛。为广泛。n 吸附规律：极性大的物质易于被吸附吸附规律：极性大的物质易于被吸附n 一般洗脱顺序：苷元单糖苷双糖苷多糖苷一般洗脱顺序：苷元单糖苷双糖苷多糖苷9烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离二、分离二、分离二、分离二、分离2、聚酰胺柱色谱、聚酰胺柱色谱n 吸附原理：氢键缔合吸附原理：氢键缔合n 洗脱顺序规律：（先洗脱顺序规律：（先后）后）（1 1）苷元相同，三糖苷双糖苷单糖苷苷元）苷元相同，三糖苷双糖苷单糖苷苷元（2 2）母核上羟基增加，洗脱速度减慢母核上羟基增加，洗脱速度减慢（3 3）羟基数目相同，有缔合羟基无缔合羟基羟基数目相同，有缔合羟基无缔合羟基（4 4）不同类型黄酮化合物，异黄酮二氢黄酮醇）不同类型黄酮化合物，异黄酮二氢黄酮醇黄酮黄酮醇黄酮黄酮醇（5 5）分子中芳香核、共轭双键多则易被吸附，故查耳）分子中芳香核、共轭双键多则易被吸附，故查耳酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。酮往往比相应的二氢黄酮难于洗脱。10烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人下列黄酮化合物：下列黄酮化合物：下列黄酮化合物：下列黄酮化合物：（1 1 1 1）用聚酰胺柱色谱，含水甲醇梯度洗脱，）用聚酰胺柱色谱，含水甲醇梯度洗脱，）用聚酰胺柱色谱，含水甲醇梯度洗脱，）用聚酰胺柱色谱，含水甲醇梯度洗脱，（2 2 2 2）用硅胶柱色谱分离，氯仿）用硅胶柱色谱分离，氯仿）用硅胶柱色谱分离，氯仿）用硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇梯度洗脱，甲醇梯度洗脱，甲醇梯度洗脱，甲醇梯度洗脱，分别写出洗脱顺序分别写出洗脱顺序分别写出洗脱顺序分别写出洗脱顺序D练习练习：ABCE聚酰胺：聚酰胺：D E C B A硅胶：硅胶：A B C D E11烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离二、分离二、分离二、分离二、分离3、葡聚糖凝胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱n 常用型号：常用型号：Sephadex LH-20n 分离原理：分离原理：l 黄酮苷元黄酮苷元 吸附作用吸附作用，取决于游离酚羟基的数目（与，取决于游离酚羟基的数目（与位置无关），位置无关），苷元的羟基数越多苷元的羟基数越多,越难洗脱。越难洗脱。l 黄酮苷黄酮苷 分子筛分子筛，按分子量由大到小的顺序流按分子量由大到小的顺序流出柱体。出柱体。12烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离二、分离二、分离二、分离二、分离黄酮类化合物在黄酮类化合物在Sephadex LH-20(甲醇甲醇)上的上的Ve/V0黄酮类化合物黄酮类化合物取代图式取代图式Ve/V0芹菜素芹菜素5,7,4-三三羟基基5.3木樨草素木樨草素5,7,3,4-四四羟基基6.3槲皮素槲皮素3,5,7,3,4-五五羟基基8.3杨梅素杨梅素3,5,7,3,4,5-六六羟基基9.2山奈酚山奈酚-3-半乳鼠李糖半乳鼠李糖-7-鼠李糖苷鼠李糖苷三糖苷三糖苷3.3槲皮素槲皮素-3-芸香糖苷芸香糖苷双糖苷双糖苷4.0槲皮素槲皮素-3-鼠李糖苷鼠李糖苷单糖苷单糖苷4.9苷元的羟基数越多，越难以洗脱；苷元的羟基数越多，越难以洗脱；苷的分子量越大，连接糖的数目越多，越容易洗脱。苷的分子量越大，连接糖的数目越多，越容易洗脱。13烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离二、分离二、分离二、分离二、分离3、葡聚糖凝胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱n 常用洗脱剂：常用洗脱剂：（1）醇或含水醇，如）醇或含水醇，如 甲醇、甲醇甲醇、甲醇-水、乙醇水、乙醇 等。等。（2）其它溶剂：如其它溶剂：如 丙酮丙酮-水、氯仿水、氯仿-甲醇甲醇 等。等。进行洗脱剂更换时，要注意不同溶剂对填料的溶胀进行洗脱剂更换时，要注意不同溶剂对填料的溶胀度差别不能过大。度差别不能过大。14烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人7,4-二二OH 7-或或4-OH 一般酚一般酚OH 5-OH第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离二、分离二、分离二、分离二、分离（二）（二）梯度梯度pH萃取法萃取法n 适于分离酸性强弱不同的黄酮苷元适于分离酸性强弱不同的黄酮苷元n 酸性：酸性：溶于溶于NaHCO3中中 溶于溶于Na2CO3中中 溶于溶于不同浓度不同浓度NaOH中中15烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离二、分离二、分离二、分离二、分离（二）（二）梯度梯度pH萃取法萃取法样品乙醚液样品乙醚液5%NaHCO3碱液碱液（7,4-二二羟羟基黄基黄酮酮）乙醚液乙醚液5%Na2CO3碱液碱液（7或或4-羟羟基黄基黄酮酮）乙醚液乙醚液0.2%NaOH碱液碱液（一般一般羟羟基黄基黄酮酮）乙醚液乙醚液4%NaOH碱液碱液（仅含仅含3-OH或或5-OH黄酮黄酮）乙醚液乙醚液（脂杂）（脂杂）16烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人练习练习：从某植物中分离出四种化合物，其结构如下：从某植物中分离出四种化合物，其结构如下：第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离二、分离二、分离二、分离二、分离n试比较四种化合物的酸性：试比较四种化合物的酸性：n极性大小：极性大小：n比较它们的比较它们的Rf值大小顺序：值大小顺序：（1 1）硅胶）硅胶TLC （2 2）聚酰胺）聚酰胺TLCA R1=R2=H B R1=H,R2=Rha C R1=Glc,R2=HD R1=Glc,R2=RhaD C B AA C B DA B C DD B C A17烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人第三节第三节第三节第三节 提取与分离提取与分离提取与分离提取与分离二、分离二、分离二、分离二、分离（三）（三）根据分子中某些特定官能团进行分离根据分子中某些特定官能团进行分离如：醋酸铅沉淀法如：醋酸铅沉淀法（目前已不使用）（目前已不使用）具有邻二酚羟基，可被醋酸铅沉淀具有邻二酚羟基，可被醋酸铅沉淀 不具有邻二酚羟基，可被碱式醋酸铅沉淀不具有邻二酚羟基，可被碱式醋酸铅沉淀18