丝状真菌形态特征观察.doc

实验九 丝状真菌形态特征观察生物112 周泓兆 一、 目的学习并掌握观察毛霉和根霉形态特征的基本方法。二、 原理毛霉和根霉都属于真菌的接合菌门。它们是空气中最常见的污染菌。菌落生长迅速，表面呈棉花样，初为白色，以后变灰至褐灰色。菌丝单细胞无横隔，有分枝，多核。毛霉无假根；根霉有假根和匍匐丝。无性生殖产生孢囊孢子。孢囊梗直接由菌丝体上长出，孢囊梗顶端膨大形成孢囊，孢囊成熟破裂后，露出囊轴，囊轴基部与孢囊梗连接处称为囊托。毛霉无囊托，根霉的假根上方产生孢囊梗。孢囊孢子呈球形、卵形或不规则形。有性生殖形成接合孢子，常为异宗配合即由“+”“”型菌丝接合形成。这些结构均可通过制水压片在低倍镜下进行观察。很多青霉、曲霉及镰刀菌尚未发现它们的有性生殖阶段，常称为半知菌。 即只知其生活周期的一半。目前已发现有些菌的有性阶段属于子囊菌或担子菌。这三种菌的无性生殖阶段均有特征性的分生孢子梗及分生孢子形态和分生孢子着生方式。它们多是腐生菌，广泛分布于土壤、空气、水果和粮食中。青霉菌落多为灰绿色，菌落质地绒状、絮状、绳状或束状，成熟后表面呈粉末状。青霉菌丝可直接分化形成分生孢子梗，其顶端具有对称或不对称的扫帚状分枝，其上着生几轮小梗，小梗顶端着生成串的球状或卵状的绿色分生孢子。曲霉菌落呈绒毛状或絮状，表面有同心圆形的轮状带。分生孢子梗长在厚壁的足细胞上，不分枝，顶端膨大成球形、椭圆形或棍棒状顶囊。其表面着生一层或两层小梗，下层为柱状初生小梗，上层为瓶状次生小梗，顶端着生成串的球状分生孢子。镰刀菌菌落呈绒毛状，多为白色、粉红色或紫红色。菌丝分隔有分枝。具有两种分生孢子，小型分生孢子梗分枝或不分枝，其顶端有链状或假头状着生的小型分生孢子。大型分生孢子梗不分枝，其顶端着生镰刀状大型分生孢子，多隔，单生或丛生。载片培养法是研究丝状真菌生长繁殖全过程的有效方法。即将菌丝体接种在载玻片上的小块培养基薄片上，加盖盖玻片，使丝状真菌只能在载玻片和盖玻片的狭窄空间内横向生长，因而可观察到孢子萌发、菌丝生长及孢子形成的各生长阶段，且不会因观察而污染标本片。三、 材料1.菌种：毛霉（Mucor）“+”、“”型菌株根霉（Rhizopus）青霉（Penicillium sp.）曲霉（Aspergillus sp.）镰刀菌（Fusarium sp.）2.浮载剂：乳酸酚溶液。3.培养基：真菌培养基。4.其它：无菌培养皿，载玻片，盖玻片，无菌水，擦镜纸，吸水纸及接种钩。四、 实验步骤1.取三片干净的载玻片，分别在每个载玻片中线的左右侧各滴加一滴乳酸酚溶液（其中一个载玻片只需滴加一滴）。2.分别用接种针挑取毛霉（“+ ”、“”中线部分）、根霉（贴近培养基部分）、青霉（绿色部分）、曲霉（黑色部分）、镰刀菌于乳酸酚溶液中，用解剖刀和接种针将其拉松散，轻轻盖上载玻片。3.分别置于高倍镜下观察，其中镰刀菌还需在油镜下观察其孢子形态。4. 清理：用二甲苯与干净擦镜纸擦净镜头，将水压片放入废片缸，盖玻片与其它固体垃圾置入垃圾桶，液体垃圾倒入废液缸，无腐蚀性毒性液体可倒入下水道。五、 结果与讨论（1）真菌形态特征：1. 毛霉：接合孢子配囊柄两个配囊柄颜色、大小不同配囊柄两个配囊柄颜色、大小不同2. 根霉：孢囊梗囊托匍匐丝着生孢子的囊轴假根3. 青霉小梗分生孢子有隔有分枝的分生孢子梗梗基4.曲霉足细胞次生小梗初生小梗分生孢子顶囊分生孢子头分生孢子梗5. 镰刀菌大型分生孢子厚垣孢子小型分生孢子（2）菌落特征名称毛霉根霉青霉曲霉镰刀酶菌丝质地蜘蛛网状絮状绒毛状、粉状毡状毡状正反面颜色正反面均为白色正反面均为白色正面为白色，或青绿色，反面为白色正面为白色或黑黄色，反面为白色正面为白色，反面为粉红色（且色素为水溶性）（3）讨论：本次实验制片难度较小，只有青霉与曲霉在刮取时较为困难，需要用力刮取一小部分粘连的培养基才能取得较好的观察效果。因为真菌本身含有较多色素，在观察时会发现视野很杂乱，因此我们需要将菌丝尽可能扯得松散一些，而制片后需要耐心观察，寻找各种真菌的不同结构。六、 思考题：1、指出根霉和毛霉的形态差异。答：毛霉没有假根、匍匐菌丝和囊托，具有囊领。根霉有假根、匍匐菌丝和囊托，无囊领。2、 比较青霉、曲霉和镰刀菌的菌落特征和形态结构差异。名称青霉曲霉镰刀酶菌落特征绒毛状、粉状正面为白色，或青绿色，反面为白色毡状正面为白色或黑黄色，反面为白色毡状正面为白色，反面为粉红色（且色素为水溶性）形态结构分生孢子梗扫帚状分枝。小梗多轮。无足细胞。分生孢子梗不分枝，顶端膨大。初生小梗柱状，次生小梗瓶状。有足细胞。菌丝分枝，有隔。