实验叶绿素的提取和分离.ppt

实验叶叶绿素的提取和分离素的提取和分离植物进行光合作用的场所？植物进行光合作用的场所？叶绿体叶绿体基质基质 基粒基粒类囊体类囊体一、叶绿体一、叶绿体形态：形态：椭圆球形椭圆球形结构：结构：外膜、内膜、外膜、内膜、叶绿体基质叶绿体基质、基粒基粒(由由单层膜单层膜的类囊体垛叠构成的类囊体垛叠构成)叶绿体内的物质：叶绿体内的物质：酶（光合作用有关）酶（光合作用有关）光反光反应的的酶叶绿体基粒叶绿体基粒 暗反暗反应的的酶叶绿体基质叶绿体基质 少量少量DNADNA和和RNARNA 色素色素一、叶绿体一、叶绿体二、叶绿体色素二、叶绿体色素分布：分布：叶绿体叶绿体类囊体膜类囊体膜上上分类：分类：色素色素叶绿素叶绿素类胡萝卜素类胡萝卜素叶绿素叶绿素a a（蓝绿色蓝绿色）叶绿素叶绿素b b（黄绿色黄绿色）叶黄素叶黄素（黄色黄色）胡萝卜素胡萝卜素（橙黄色橙黄色）二、叶绿体色素功能：功能：选择选择吸收吸收光能，光能，传递和转化传递和转化光能光能叶绿素：主要吸收主要吸收红橙光红橙光和和蓝紫光蓝紫光类胡萝卜素：主要吸收主要吸收蓝紫光蓝紫光一、实验原理一、实验原理v提取：提取：叶绿体色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的叶绿体色素。v分离：分离：纸层析法不同的叶绿体色素随层析液在滤纸上扩散速度不同。（不同的色素会在扩散过程中分离不同的色素会在扩散过程中分离开来，形成条带）开来，形成条带）二、实验步骤二、实验步骤提取叶绿体色素提取叶绿体色素v取材：取材：取取2-32-3片菠菜叶，撕去叶脉，尽量剪碎，放入研钵。片菠菜叶，撕去叶脉，尽量剪碎，放入研钵。v研磨：研磨：向研钵中放入少量向研钵中放入少量石英砂石英砂和和碳酸钙碳酸钙，加入，加入一滴管一滴管无无水乙醇水乙醇，边加无水乙醇边研磨，进行充分地研磨至匀浆状态。，边加无水乙醇边研磨，进行充分地研磨至匀浆状态。v过滤：过滤：在玻璃漏斗上放入单层纱布，将研磨液倒入漏斗，在玻璃漏斗上放入单层纱布，将研磨液倒入漏斗，漏斗下端放置培养皿，过滤制备得到滤液。漏斗下端放置培养皿，过滤制备得到滤液。【注注】p加石英砂是为了使研磨充分加石英砂是为了使研磨充分p加碳酸钙是为了防止叶绿体色素被破坏加碳酸钙是为了防止叶绿体色素被破坏p加入加入CaCOCaCO3 3和石英砂的量均很少，无水乙醇的量不应太少和石英砂的量均很少，无水乙醇的量不应太少画线画线v制备滤纸条：制备滤纸条：将干燥的定性滤纸制成如右图将干燥的定性滤纸制成如右图所示，用铅笔划线所示，用铅笔划线（已准备好）（已准备好）。v画线：画线：用用盖玻片盖玻片蘸取少量滤液，沿铅笔线蘸取少量滤液，沿铅笔线均匀均匀压出压出细线。待滤液干后，细线。待滤液干后，重复重复画线画线3-43-4次。次。【注注】p画滤液线时尽量画滤液线时尽量画直、画细、画浓画直、画细、画浓p每次画完，要等滤液干时再重复画，以防滤液扩散开使滤液每次画完，要等滤液干时再重复画，以防滤液扩散开使滤液线过宽，影响结果线过宽，影响结果分离叶绿体色素分离叶绿体色素v固定装置：固定装置：将将4mL4mL层析液层析液倒入层析管中，倒入层析管中，将画好线的滤纸条固定于右图装置中。将画好线的滤纸条固定于右图装置中。v观察现象：观察现象：10min10min后，将滤纸条取出，风后，将滤纸条取出，风干。观察色素带及其颜色，作好记录。干。观察色素带及其颜色，作好记录。【注注】p放滤液条时，要避免放滤液条时，要避免滤液细线滤液细线浸没到浸没到层析液。不要让层析液。不要让滤纸条贴在层析管壁上。滤纸条贴在层析管壁上。p层析液中一些成分易挥发，要避免开放在空气中。层析液中一些成分易挥发，要避免开放在空气中。滤液细线滤液细线(蓝绿色蓝绿色)类胡萝卜素类胡萝卜素叶绿素叶绿素（橙黄色橙黄色）（黄色黄色）（黄绿色黄绿色）1/43/4可以看出：可以看出：v色素扩散距离不同色素扩散距离不同v色素带宽度不同色素带宽度不同一、实验结果一、实验结果谢谢