甾体激素类药物.ppt

第五章 甾体激素类药物的分析一、基本结构与分类1.具有环戊烷并多氢菲母核具有环戊烷并多氢菲母核可分为：肾上腺皮质激素类 雄性激素及蛋白同化激素类 孕激素类 雌性激素类2.肾上腺皮质激素类肾上腺皮质激素类代表药物：氢化可的松、醋酸地塞米松等主要活性基团主要活性基团性性 质质4 3 酮酮UV、与羰基试剂反应、与羰基试剂反应 C17 醇酮基醇酮基还还 原原 性性3.雄性激素及蛋白同化激素类雄性激素及蛋白同化激素类代表药物：甲睾酮、苯丙酸诺龙等主要活性基团主要活性基团性性 质质4 3 酮酮UV、与羰基试剂反应、与羰基试剂反应 C17 羟基羟基可成酯可成酯4.孕激素类孕激素类代表药物：黄体酮等主要活性基团主要活性基团性性 质质4 3 酮酮UV、与羰基试剂反应、与羰基试剂反应C17 甲酮基甲酮基与亚硝基铁氰化钠反应与亚硝基铁氰化钠反应5.雌激素类雌激素类代表药物：雌二醇、炔雌醇等主要活性基团主要活性基团性性 质质A环为苯环环为苯环,3OHUV、与重氮苯磺酸盐反应、与重氮苯磺酸盐反应C17 羟基羟基可成酯可成酯C17 乙炔基（部分）乙炔基（部分）与与AgNO3反应反应二、鉴别1.与强酸的呈色反应 与H2SO4、H3PO4、HClO4和HCl等反应后呈色 以H2SO4用的最广2.制备衍生物测定熔点3.官能团反应1）C17 醇酮基：+Fehling试剂 Cu2O（红色）氨制AgNO3 Ag（黑色）四氮唑盐 显色2）酮基 +羰基试剂 显色（腙）常见羰基试剂：2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼3）甲酮基 +Na2Fe(CN)5NO 显色4）酚羟基 +重氮苯磺酸盐 红色（偶氮染料）三、杂质检查1.主要的特殊杂质包括其他甾体、硒等2.其他甾体：其他甾体：与标示药物结构不同的甾体化合物来源：原料、中间体、异构体、降解产物特点：可能存在多个甾体杂质；结构类似方法：TLC法、HPLC法1）TLC法：多采用自身对照法显色方法：四氮唑盐、硫酸乙醇判定方法：规定杂质斑点数目 规定杂质斑点颜色2）HPLC法自身对照法四、含量测定包括HPLC法、紫外分光光度法、比色法等1.异烟肼比色法异烟肼比色法1）原理：C3-酮基 异烟腙2）操作：对照液 供试液异烟肼HCl蒸干乙醇 CHCl3溶 异烟肼 5540min415nm测定A3）注意事项：）注意事项：反应速度和专属性：C3=O C17=O、C20=O，C11=O 不反应C3-酮基有一定专属性溶剂的选择：异烟肼、盐酸 无水乙醇或无水甲醇 酸、异烟肼的量：盐酸：异烟肼 =2：1 酸度 异烟肼盐 酸度 A 样品：异烟肼 =1：8水分、O2与光线的影响：含水量 腙水解 A 溶剂不挥发、不吸收水分时 O2与光线无影响温度的影响：温度 反应速度2.四氮唑比色法四氮唑比色法1）原理 肾上腺皮质激素类 C17-醇酮基 +ChP采用TTC（RT）USP采用 BT2）操作对照液供试液OH-还原强还原性强还原性红四氮唑RT/TTC 三苯甲潜（红色）蓝四氮唑BT 双甲潜（兰色）C17-醇酮基TTC 氢氧化四丁基铵25 暗处45min485nm测定A3）注意事项基团对反应速度的影响C11=O C11OHC21OH C21-酯C16无论何种取代基溶剂、水分的影响含水量5%含水10%A10%含水30%几无反应无水乙醇醛 A 无醛无水乙醇O2与光线的影响碱的影响反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行以氢氧化四甲基铵的结果最佳加入顺序：皮质激素 四氮唑 碱反应过程反应产物光敏感 避光，快速O2影响产物颜色和稳定性充N2，密封温度和反应时间 t t 甲潜分解 ChP 25 4045 BP 30 1h2.Kober反应比色法反应比色法1）Kober反应原理：max=465max=5152）改良的Kober反应：使用铁-酚试剂：(NH4)2Fe(SO4)2+H2SO4+H2O2+苯酚 也被称为：Kober反应-铁-酚试剂法加强红色产物的稳定性；消除反应产生的荧光3）特点：优点 较高的灵敏度 具有一定的选择性 缺点 非化学计量反应