薄层色谱法实践技巧11474.pdf

-.z.薄层层析硅胶板 薄层层析硅胶板是用高纯度薄层层析硅胶粉状调入一定量的粘结剂喷制成，板面纯白、平整均匀、细密。主要成分为 SiO2nH2O，化学性质稳定，除强碱和氢氟酸外，不与其他酸碱反响。薄层层析硅胶板可直接用于多种类型有机物质的定性或定量分析，在医药、农药、中草药、有机化工产品及粮食、食品的微量杂质及主要成份的鉴定中已得到普遍应用。硅胶板的规格分为：G，H，GF254，HF254。那这些型号到底代表什么意思.他们的依据是什么呢.硅胶 H-不含粘合剂；硅胶 G-含煅石膏粘合剂；硅胶 HF254-含荧光物质，可用于波长为 254nm 紫外光下观察荧光；硅胶 GF254-既含煅石膏又含荧光剂。还有一个非常简单的判别分类的方法就是，不同型号的硅胶在于其中石膏含量的不同，这一点表达在硅胶的粘稠度不同，石膏含量越高越粘稠。这个在卖硅胶的瓶子上都有标识，比方硅胶 H 就很稀松，硅胶 G 一般粘稠度还是比较适中的。硅胶板 化工行业上的名词硅胶板只是一个简称，其全称应该叫薄层层析硅胶板，它用高纯度薄层层析硅胶粉状调入一定量的粘结剂喷制成，其板面一般为玻璃，今年来，国外比较流行使用铝箔来做附着板面。要求板面纯白、平整均匀、细密。主要成分为 SiO2nH2O，化学性质稳定，除强碱和氢氟酸外，不与其他酸碱反响。薄层层析硅胶板可直接用于多种类型有机物质的定性或定量分析，在医药、农药、中草药、有机化工产品及粮食、食品的微量杂质及主要成份的鉴定中已得到普遍应用。硅胶板的规格分为：G，H，GF254，HF254。H 是 Hard 的简称 G 是 Glutinous 的简称 F 是 Fluorescent 的简称 硅胶 H-不含粘合剂，不含荧光剂；硅胶 G-不含荧光剂，含煅石膏粘合剂；硅胶 HF254-含荧光物质，可用于波长为 254nm 紫外光下观察荧光；硅胶 GF254-既含煅石膏又含荧光剂，可用于波长为 254nm 紫外光下观察荧光 还有一个非常简单的判别分类的方法就是，不同型号的硅胶在于其中石膏含量的不同，这一点表达在硅胶的粘稠度不同，石膏含量越高越粘稠。这个在卖硅胶的瓶子上都有标识，比方硅胶 H 就很稀松，硅胶 G 一般粘稠度还是比较适中的。硅胶板的使用尺寸一般是：30100 MM，50100 MM，50200 MM，100200 MM，200200MM,也可以根据客户的特殊需求制作。前面说的铝箔板面的一个优点就是使用过程中可以根据使用面积的大小来裁剪。薄层色谱法实践技巧 目的：1.药典：薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分别离，所得色谱图与事宜的对照物按同法所得的色谱图比照，并可用薄层扫描仪进展扫描，用于鉴别、检查或含量测定。2.如果你是做鉴别的话，薄层的系统适用性主要是做检测限和别离度；-.z.3.如果你是做含量测定，比方说用薄层扫描法，薄层的系统适用性应该做线性范围、同板精细度、异板精细度、回收率；4.手工铺制的板子，只适宜于定性分析，不宜于别离定量；5.化学药一般是作有关物质，需要一定的载药量，所以要适当增加厚度；6.中药一般较难别离，需要薄板，以增加别离度；7.手工铺制的板子常用的有：硅胶 G 板和硅胶 CMC-Na 板。前者是煅石膏石膏经 140烘烤 34 小时与硅胶按 11.3：10 混合均匀。每份硅胶 G 加水 23 份调成糊状，即可使用。后者的操作各位大虾已有论述。8.如果你铺板目的是做分析用的话，肯定得很仔细用心；如果仅是天然药化那种粗略检查过柱子得到的馏分纯度，那就没有必要这么复杂了，也就是说速度可以快点，板的要求也没有必要这么高；9.单纯的手铺板，技巧要求很高的，如果有铺板器也是完全手动的那种，铺出的板子根本上可以保证均一的。10.要喷硫酸乙醇并定量的最好铺水板；铺水板是最考技术的，主要是碾磨技术，大家可以探讨一下；11.硫酸乙醇显色作定量分析的品种，但凡加了 CMC-Na 的板都易烘糊，尤其是温度高于 100 度时，后改用不加CMC 辅的水板来作，就不会有烘糊现象，故也可推论 CMC 易于与硫酸起糊化反响。感觉辅水板关键是硅胶 G 与水的比例要达 1：3.5 左右，而且研磨后要尽快涂布，不能易于凝固而难于涂布。展开：12.药典：展开容器 应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸，并有严密的盖子，底部应平整光滑，或有双槽。上行展开一般可用适合薄层板大小的专用平底或双槽展开缸，展开时须能密闭。水平展开用专用的水平展开缸。13.药典：将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点 5mm 为宜切勿将样点侵入展开剂中，密封顶盖，待展开至规定距离，除另有规定外，一般为 815 cm，溶剂前沿到达规定的展距，取出薄层板，晾干，按正文项下的规定检测。14.展开剂的选择别离单体：1粗分，也就是当你的样品极性范围比较大的时候，可以直接采用极性较小的流动相。然后将前沿、原点以及前沿及原点间的硅胶分别刮下，提取。这样，样品就被分为几个局部，而各个局部的极性相差也比较小了。然后再将这几局局部别进展下面的细分 TLC。2细分。经过粗分之后，我们一般对各个局部的极性都能够做到心中有数了。比方，被冲到前沿的样品，要采用更小极性强度的流动相，而死吸附局部，则需要较大强度的流动相。我们在初步确定了流动相的极性强度之后，可以自己设计几个溶剂系统。在选择流动相的组成的时候，可以参考snyder 的溶剂分类，从质子受体，质子给体和偶极作用的溶剂中各选择一种，然后再选择一个强度调节剂。当然，也可以参考文献中采用的流动相。选好了要用的流动相，就可以根据我们初步确定的极性强度得到流动相的配比了如果是二元流动相的话。如果是三元及以上的流动相，可以采用 Glajch 和 Youngstrom 的七种溶剂系统的方案进展选择流动相的配比。然后从中选择别离效果比较好的组合。最开场可以采用微量圆环法将样品点在中间，然后将流动相用毛细管从原点向圆周扩散和小板实验法来摸索，然后再应用于大的制备 TLC。我也曾直接采用圆环法，也称为环形展开，来进展制备的。本来是应该有专门的 U 形展开室来展开，但是因为我们这里没有这个设备，所以我一般采用简易的方法：即将样品点在中央，然后用尖头的滴管源源不断的向圆心滴加流动相的。样品会分出不同的同心圆而得到别离。这样的好处有三：1只要操作小心，各个同心圆真的就非常圆，即不会出现线性层析中的边缘效应等。2别离效果更好，拖尾现象小于线性层析。3由于圆心式展开的 Rfc 是线性展开的 Rf 的平方根，要大于线性展开的 Rf，所以分的更开。弊端在于将各个组分从板上刮下的时候需更小心才不会使之混杂。15.当展开剂极性差异很大时，特别是极性大的成分所占比例很小时，往往会出现溶剂脱混现象。在这种情况下，展开槽 饱和与不饱和差异没有显著性差异，薄层板上往往会出现类似分层的现象，所以只有换展开系统来调整。-.z.16.甲醇用量较小，而甲醇又易挥发，容易产生边缘效应，要特别注意展开剂的平衡和层析缸的密封。17.如果经过一次展开后,展开槽内仍剩下足够的展开剂,可以展开第二块板子吗.个人认为最好不要。一般来说为得到较好的别离效果，应先饱和一下，第二次使用如果还要饱和就会造成另一侧残留的展开剂附着在板子上，造成影响。而且有机溶剂一般较易挥发。18.自己手铺的薄层板怎么都没有买来的高效板好用，用过之后也可以用极性大些的展开剂将展开的点，二次展开跑过，这样就可以重复利用了。显色：19.药典：显色装置 喷雾显色要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出；浸渍显色可用专用的玻璃器皿或用适宜的玻璃缸代替；蒸气熏蒸显色可用双槽玻璃缸或适宜大小的枯燥器代替。20.说关于薄层板加热变黑的问题，其实很容易解决：当喷完显色剂后不用在放烘箱里烘了，可以用电吹风在板子反面吹吹就能显色了。我们实验室里一般都采用此法，简便、快洁如果一非想使用烘箱烘的话，一定要用带玻璃窗的，当看到显色了就取出，不然不好控制显色时间，时间过长，CMC 容易碳化变黑。21.根据我的经历，薄层版变黑与 CMCNa 的浓度过大有关，如果你留意的话，你会发现，当显色剂中有浓硫酸时，加热时间稍长就会变黑其他显色剂是没事的，我教师说这是因为浓硫酸把 CMCNa 炭化了，其实color=blue=这种情况你只要适当降低 CMC-Na 的浓度就可以了，当然如果不加 CMC-Na 的话容易把板弄破。22.显色剂 R6：称取 100mgDC 红色 19 号染料索引号 No 45170溶于 150ml 二乙醚、70ml 95乙醇和 15ml 水。此溶液可保存一周。薄层板喷布显色剂 R6 后，立即在 366nm 下观察和记录。问题与应用：23.板子会裂口，一则可能是因为硅胶的比例太大，二则可能是，板子要在常温下晾干后，再在烘箱中活化。如果铺完不久就在较高温度下，裂口的几率就比较高的。24.板铺好后，自然凉干最好，一定是要从玻板后看也是干的，注意一定要放平，最好控制空气流动；然后再放到烘箱中活化，这样就不会有裂开的现象了；如果直接铺好后或者只是硅胶外表是干的，放进烘箱都会有裂开的。25.晾干的板子放在烘箱里怎么全炸裂了，有什么方法可以防止板子炸裂。你的板没有完全干透，外表看是干了，但是最中间的没有干，所以你直接放入105 度的烘箱烘，当然会炸裂了，所以应该先用低温大约 40 度左右烘 30 分钟左右，再用 105 度活化，就可以解决这个问题了。26.板子炸裂也可能是 CMC-Na 中有絮状沉淀所致。27.但凡加了 CMC 的板都易烘糊，尤其是温度高于 100 度时，假设改用不加 CMC 辅的水板来作，就不会有烘糊现象，但不加 CMC 辅的板又太软，点样时容易点出洞，有个好方法是将 CMC 的浓度调至 0.1%，这样就不易烘黑的。28.系统适用性：如果你是做鉴别的话，薄层的系统适用性主要是做检测限和别离度。如果你是做含量测定，比方说用薄层扫瞄法，应该做线性范围，同板精细度，异板精细度，回收率。CMC-Na 溶液的配制：29.药典规定 CMC-Na 浓度为 0.20.5，实际操作中 0.40.5最为实用；CMC-Na 溶液的溶剂应用蒸馏水，以尽量减少污染。30.配制 CMC-Na 溶液，根据实际经历一般将溶液浓度配成 0.3%，需要铺厚板可配成 0.5%左右，薄板可配成 0.2%即可。CMC-Na 溶解最好是自然溶解浓度不是太高，也可在水浴中加热促溶用时还是过滤一下好，防止铺出的板子有麻坑。31.配制 CMC-Na 溶液时，可以先量取好蒸馏水，再将称量好的 CMC-Na 均匀撒在水中，用玻璃棒搅拌，如果操作的好的话可以不用加热都能溶解的很好；当溶解完全后，应该抽滤一下，这样铺的板子很均匀，不过滤会因为一些肉眼看不到的不溶物混入，这样铺的板子会出现许多小颗粒；-.z.32.第一个关键的地方，你的 CMC-Na 溶液必须配制的好，放置的也要很好，完全分层之后只能取上清液。上清液要澄清透明，时间太长的 CMC-Na 可能会发黄，如果有霉菌出现的话，绝对不能使用；33.如果有抽滤装置你可以直接把 CMC-Na 溶液滤过，就可以不必等它沉淀再取上清液了嘿嘿，我是急性子，还有两个好处一是节省 CMC-Na 溶液，二是倒滤过的 CMC-Na 溶液的时候不必担忧会把下层的不溶物倒出来了。34.在 CMC-Na 的溶解过程中，可以使用可进展加热操作的磁力搅拌器，大概搅拌 5 小时，应该可得到满意的效果。而且这样就可以使 CMC-Na 溶解，并且溶液更澄清;CMC-Na 后处理，很多人说是过滤，或者抽滤，我觉得可能速度很慢，而且又容易浪费。我的做法是离心，5000rpm 离心 20min。倒出上清液，非常清，也同时消除了过滤过程中可能发生的污染。更难能可贵的是，我可以收集下面没有充分溶解的 CMC-Na。继续加到水中，还可以配制。35.配制 4%5%的羧甲基纤维素CMC：称取 CMC，溶于冷水中，边加热边搅拌，直至成为清澈、透明的溶液。36.有个方法过滤 CMC-Na 溶液，在布氏漏斗上平铺薄薄一层脱脂棉，千万保证每个小孔都没漏掉哦！用蒸馏水润湿脱脂棉，启动真空泵，抽紧后就可以放心大胆的倒 CMC-Na 溶液了，保证滤过的溶液澄清透明，而且长时间放置不沉淀。37.CMC 溶液的浓度 0.3-0.7%比较适宜，浓度高了将来显色时如果有加热过程稍不小心板子容易发黑，浓度低了铺出来的板子不结实，轻轻一碰就掉渣，不好保存，而且点样时会很紧*，容易出洞；38.先将 CMC-Na 溶解完全,可将溶解成所需浓度加热后超声处理,再抽滤,可很快得到上清液 39.CMC-Na 煮沸大概 30 分钟或更久的，其实这个过程很慢。千分之 3。过滤一下，抽滤最好。要放冷。40.制备 CMC-Na 时，我的方法是将 CMC-Na 参加沸腾的水中，慢加快搅，防止成团，完全溶解之后，自然沉降或者是抽滤建议不用滤纸，太慢了，脱脂棉是个不错的选择。41.对于 CMC-Na 溶液的配置，我认为最好提前几日配好，放置再用。配置时可用超声分散，对少量没有立即溶解的，放置后会逐渐消失。42.CMC-Na 要用蒸馏水为溶剂，加热溶解后，放冷，最好滤过使用；消泡剂可直接与 CMC-Na 溶液混合使用；43.如是铺 CMC-Na 的薄层板，先将 CMC-Na 溶解完全，可将溶解成所需浓度加热后超声处理，再抽滤，可很快得到上清液。44.关于 CMC-Na 的配制我觉得还要说一点就是：这个东西也算是一种高分子材料，而高分子材料的溶解必然都会有一个溶胀，溶解的过程，所以配制的时候，应该将称好的 CMC-Na 少量的撒在水的外表，让其自然沉降，注意要散开平铺，这样能够充分浸润，使其溶胀，之后可以置于水浴锅内加热溶解；当然如果你不是很急着用的话也完全可以，直接用水泡着放那，估计十天半月的也可以用了。45.CMC-Na 的溶解需要煮.药检所的教师用一个大缸子装水，按比例参加 CMC-Na，让他自然溶涨、溶解，临用前用漏斗，加脱脂棉，滤过即可；46.根据我的经历，薄层版变黑与 CMCNa 的浓度过大有关，如果你留意的话，你会发现，当显色剂中有浓硫酸时，加热时间稍长就会变黑其他显色剂是没事的，我教师说这是因为浓硫酸把 CMCNa 炭化了，其实color=blue=这种情况你只要适当降低 CMC-Na 的浓度就可以了，当然如果不加 CMC-Na 的话容易把板弄破；47.CMC-Na 溶液煮了以后不能再用冷水兑，否则，几天以后就会变绿，起霉。48.CMC-Na 完全溶解后，用布氏漏斗过滤。玻板：49.选择适宜的薄层板如：2010 cm，清洁干净先用洗手液或洗衣粉清洗，再用自来水冲洗干净，接着用蘸有乙醇的棉花擦拭干净，最后把板吹干或烘干，放置于清洁处，备用。50.玻璃板应该很干净，没有划痕，没有缺口，4 个角要健全。51.载板要求平滑清洁。在使用前一定要处理干净，用洗涤液或肥皂水洗涤，再用水冲洗干净，烘干。-.z.52.清洗玻璃板相当重要，切记要清洗得相当干净，不然会在铺板中产生小气孔。53.薄层板最好用洗洁精浸泡 12 小时，这样比较容易清洗，清洗后薄层板依柱竖起，半小时即可晾干。54.板子一定要洗干净，用适中浓度的盐酸浸泡是一个不错的选择。55.板要绝对干净。总结：完整、平滑、清洁！研磨：56.硅胶和粘合剂的比例不用固定，稀点铺薄板，稠点铺厚板，以目的决定比例。57.硅胶的研磨，当然是一个方向了，可以适量的参加一定量的无水乙醇或丙酮来消泡，也可以适当搅拌后放在干净容器内超声，效果都是不错的。手工铺硅胶的用量一般 1020 cm 的约 34 克，硅胶和 CMC-Na 的用量一般是1：2.83，具体根据要铺板子的厚度和 CMC-Na 的浓度决定。58.40%硅胶：按 CMC 溶液的量、按 40%的比例称取薄板层析硅胶，倒入大研钵中，与 CMC 溶液混合，充分研磨成均匀糊状。59.先在研钵中加 CMC 溶液，再加硅胶，按同一方向研磨，这样更容易调匀不易包埋硅胶颗粒；稠度以用研棒粘取，成连珠状不成线状下滴为好；配制时遵循现配现用、少量屡次的原则，因其易干影响铺制效果。60.硅胶和 CMC-Na 溶液的比例可以适当的调节，根据你所需要薄层板的软硬来微调。可以一个人研磨，一个人缓慢的倒 CMC-Na 溶液。研磨时最能考验你的定力，我觉得你该找女生来磨，但是那种太文弱的不行。研磨时要顺着一个方向，速度不宜快，要顺着研钵的边缘，观察仔细，一定要把气泡赶尽杀绝。研磨好的因改是均匀的，没有气泡，没有固体的粉末类异物，溶液有一定的粘性。61.硅胶的浓度要适中。太稀铺板时易淌出，同时延长板的枯燥时间；太稠，流动性不好，铺板是靠其流动性的，同时也很可能在没铺好前凝固。62.建议硅胶应配制成偏稀的状态，这样铺制更容易，不必辛苦地颠好久，而且可多可少，可薄可厚。63.我的经历是 CMC-Na 与硅胶配成 3：1 比较适宜，CMC-Na 用千分之三到千分之五，硅胶浓度稍大一些或小一些也行，但不能太低，否则板子边缘会凹凸不平。64.CMC-Na：硅胶为 2.5：1 较好，楼上师兄说的 3：1 应该也可以，但是硅胶配的过稀时后果很严重，板子在晾干时会出现许多裂缝，象万寿菊样的开花状，完全不能用。65.充分磨好硅胶，后，再边磨边加 CMC-Na 溶液；铺的时候，如果慢且多，则有时会干了，你还要边磨边放点CMC-Na 溶液。66.研磨时防止气泡可以加少量的乙醇或者丙酮；参加几滴乙醇或丁醇，可起到消泡的作用。67.加长研磨的时间，勿太厚，防止板子炸裂。68.超声的排气效果很好。69.0.4 CMC-Na 溶液1：3置研钵中，朝一个方向慢慢研细约 1015 分钟，10g 吸附剂参加 3 滴 95乙醇以驱赶气泡；70.硅胶的研磨时间:如果严格规定的话,需在一分钟内完成,从参加 CMC 溶液到吸附剂中至涂布完毕,应在四分钟内完成 71.硅胶与 CMC-Na 溶液的比例根据硅胶型号的不同而不同：硅胶或硅胶 GF254 比例一般为 1：2 1：3，硅胶H 或硅胶 HF254 比例一般为 1：3 1：4。72.研磨的时候确实需要沿一个方向研，不要敷衍 73.硅胶研磨要充分，防止气泡。74.实在怕有气泡，可以超声一下。铺板：75.药典：薄层板制备 除另有规定外，将 1 份固定相和 3 份水或加有黏合剂的水溶液在研钵中向一方向研磨混-.z.合，去除外表的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进展涂布厚度为 0.20.3 mm，取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下晾干，后在 110 烘 30 分钟，即置有枯燥剂的枯燥箱中备用。使用前检查其均匀度可通过透射光和反射光检视。外表应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染。76.薄层板的厚度：如果定性分析，一般厚度以.25 mm 为好；如果要别离制备少量的纯物质时，厚度应稍大一些，常用的为 0.5 mm0.75 mm，甚至有 1 mm2 mm 的。77.铺板，我觉得是各人各喜欢，可以顺着板中间倒，也可以顺着*个边缘倒，倒时也要注意不能引入小气泡。可以用玻璃棒引着溶液平铺在玻璃板上，如有需要，可以双手 10 个指头拖住玻璃板，有节奏的颠，使得硅胶分摊匀称。尤其是 4 个角，容易高出玻璃板其他部位，所以要格外注意。颠好的板，外表看上去要光滑平整，没有气孔。78.将薄层用硅胶粉称定参加 3 倍量的 CMC-Na 溶液，研磨均匀匀速一个方向成糊状我用 1 分钟左右，不要静置迅速将涂料倒于备好的玻璃板事先清洗干净，不可有污渍、水滴。自上而下自然流注铺于玻璃板，倒量为距离边缘 3 厘米左右即可铺厚板用量适当多些，薄板量少些，然后用研钵棒涂布玻璃板上。颠板上下左右或倾斜根据板的涂布情况而定。铺好的板要选择一个水平、通风的平台放置，不可落上灰尘。79.依据薄层板使用需要，将适量研好的吸附剂倒到薄层板上，先用小锤将吸附剂荡匀，倾斜层析板，使吸附剂流至层析板一侧，待吸附剂蓄积一定量后，再反向倾斜层析板，使吸附剂回流；然后是另外两个方向，重复上述操作，后轻颠几下薄层板即可。80.将吸附剂制备好后，直接将适量倾倒于玻板的中央处，接着用研棒轻轻将吸附剂溶液向四周摊匀，然后开场颠玻板；颠的时候可要注意啦：一定要轻轻的颠，从玻板的一头颠到另一头，然后反过来进展。重复几次即可。81.将研好的糊糊倒在干净的板上，我一般是从中间一次性倒下去，然后用左手托板，轻轻倾斜，使糊糊向板边缘流动，右手拿研棒将没铺到的地方涂均匀，但要注意研棒在接触糊糊一直到最后涂抹均匀才能离开板，一旦提起就不能再去涂抹，否则会留下痕迹。涂抹完毕后，就颠板啦，我的经历是颠的幅度不易大，但频率可以快些。82.颠板。此过程要与前面步骤连续进展，且不宜久颠，以保证颠好后硅胶还有一定的流动性，放置到平台时仍可以靠自身流动修正颠板及移动所产生的不均。83.将载玻片置于平台上，用药匙舀取糊状硅胶，均匀地铺在载玻片外表。84.铺板时，用的硅胶量要掌握好。85.将硅胶倒入在盛有 CMC-Na 溶液的研钵中，CMC-Na 溶液的浓度不宜过高，研磨均匀，大约 5-10 分钟，用研棒粘取，成珠滴为好，铺板，两面颠簸至平放置平台上。86.载玻片的涂布：将枯燥后的载玻片两片夹在一起，沉浸入糊状物中，使在载玻片上形成固体层为了浸蕉一对载玻片，用你的指间夹住载玻片的一端，并尽可能地向下进入所提供的糊状物中当载波片一浸入糊状物中后，立即以快而平稳的速度将其拉出，并让过量的糊状物滴回小心的分开载玻片，放到水平台上，枯燥注意：糊状物一定要均匀；要迅速拉出载玻片，大多数人拉得太慢 87.研磨硅胶时，我一般取 30 g 硅胶 H，参加的 CMC-Na 100 ml，研磨，当将研棒提起时，硅胶象成溜似的滴下为正好。88.铺完板后，最好将两边的边缘修理一下，并且各个边缘都要擦干净，这样可以防止跑歪。89.边缘坏一点可以用刀子刮去整齐的一条。晾干：90.对铺好的板要选择平整的地方，自然枯燥，不易人为强制枯燥。枯燥后再活化，否则板会开裂。91.铺好的板，要找个干净的地方放置晾干，这个过程也是耐心的等着它，请勿打搅。92.板铺好后，自然凉干最好，一定是要从玻板后看也是干的，注意一定要放平，最好控制空气流动。93.板子铺好之后一定要放在平面上阴干一定是阴干，不然你会懊悔的，如果看荧光最好是找一个比较干净的房间，不然荧光下板子上会有很多点点。94.要等阴干且透后才能放入烘箱枯燥活化时。还有一点，铺板和凉板时周围的环境要好，桌面要干净，最怕是有粉尘，如有粉尘落在未干的板上可就惨了，定量不行，可以定性，但不好看。-.z.95.自然枯燥后，放入烘干箱烘 12 小时以上。96.薄层板铺好后一定要放置在平的台面上，否则难保证板面硅胶的厚度均匀。97.铺制好的薄层板先让其稍干后，即看不出有明显的水印，放入烘箱内用 50 度以下的温度并开鼓风枯燥 30 分钟，再升温枯燥至干，注意升温过快在使用的过程中有可能发生起层的现象，不利于别离，以上方法经本人两年多的实践，效果较好且耗时又不太长。98.置平整处过夜自然晾干；如使用较急亦可 60烘干。活化：99.活化的目的是除去水分。100.自然晾干后，活化一下105 摄氏度 40 分钟左右，置于密封的枯燥器保存。101.再在 105110活化，活化时间为 0.51 小时，冷却后即可使用。102.厚板在活化时容易裂，考虑到化学药相对容易别离，所以降低活化温度，自然晾干后，40 或60 摄氏度的烘箱中 23 小时即可，枯燥器中保存。103.用于别离中药的薄板需要活化，活化后要立即使用，可以称热点样饱和，不然空气中的水分会导致你作无用功，使得吸附色谱转为分配色谱。104.薄层烘干的时候最好不要在带鼓风的烘箱中烘，容易起皱，或者破裂。点样：105.药典：点样器 一般采用微升毛细管或手动、半自动、全自动点样器材。106.药典：除另有规定外，在干净枯燥的环境中，用点样器点样于薄层板上，一般为圆点状或窄细的条带状，点样基线距的底边 1520 mm，高效板一般基线距底边 810 mm，圆点状直径一般不大于 3 mm，高效板一般不大于 2 mm；条带状宽度一般为 510 mm。高效板条带宽度一般为 48 mm，可用专用半自动或自动点样器械喷雾法点样。点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。一般不少于 8 mm，高效板供试品间隔不少于 5 mm。点样时必须注意勿损伤薄层板外表。107.点样，可以用进样器，也可以用定量毛细管有点贵啊，5ul 的 2 块多一根，点样时尽量使点小且圆整，尽量不要破坏板子。108.毛细管点样，点样量不能控制。你可以到药店买 12ml 的注射器作为点样器，可以满足 TLC鉴别的要求，而且很廉价哦！109.点样，我上学的时候，教师用比较廉价的进样器大约 10 几块钱吧，10l 即可，将针尖打磨圆滑，教师好似是用锉一点一点锉的，这样点样的时候样品溶液不容易沿针尖上行甲醇溶液都这样，并且针尖不会刺破已经铺好的薄层板。现在，我和师兄都是实行的这个方法，还是比较实用的，点样量可以准确到 0.5l。当然，点样的时候手不能抖动，动作要轻 110.要磨平微量进样器的针尖，简单的方法就是，在展缸的盖子上轻磨当然是靠近中间局部，就很快能解决问题，且很平滑。111.关于点样：我们一直都用液相平头进样针，10 ul 就够了，如果点样量低于 1ul 的话，就用气相进样针。都可以很好的控制点样量，且斑点也可以满足要求。速度也快。可以防止毛细管先快后慢的毛病。112.用定容毛细点样管：5 ul，2 ul，1 ul。113.对于点样我也有些心得。原来有专门的点样管，是 10 ul 规格的，是点 10 ul 的好说，反正点完就是了，但要点 5ul 或更少，那就全凭眼力了，做得是一点把握没有啊，但还得点，呵呵。自从发现可以用微量进样器后，不仅可以控制的得心应手，不会因为一按不稳把药液给全点上去导致斑点过大，还可以重复利用节省开支，重要的是还环保。呵呵！提倡广阔的兄弟姐妹也用微量-.z.进样器替代塑料的点样管，经济又好用。平衡与饱和：114.药典：展开前如需要溶剂蒸气预预平衡，可在展开缸中参加适量的展开剂，密闭，一般保持1530 分钟，溶剂蒸气预平衡后，应迅速放入载有供试品的薄层板，立即密闭，展开。如需使展开缸到达溶剂蒸气饱和的状态，则须在展开缸的内侧壁上贴二条与缸一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封顶盖，使系统平衡或按正文规定操作。115.饱和也非常重要，边缘效应很严重的不妨用下端浸在展开剂中的滤纸贴在展开缸的内壁，这样饱和效果会好一些。116.在层析缸口涂适量凡士林，增加密封性。117.层析缸在展开前最好平衡一个小时左右，让里面的展开剂平衡。也可以在两边放滤纸条，增加展开剂的散发面积，减少边缘效应。118.以展开剂边缘效应的大小，确定展开剂平衡时间的长短，一般平衡时间在 30 分钟即可。