2022年统考复习知识点背诵.docx

精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载选修 1 基础学问点背诵果酒和果醋和制作一、果酒制作1原理： 菌种： 酵母菌, 属于真核生物, 新陈代谢类型： 异养兼性厌氧型,有氧时, 呼吸的反应式为：C6H12O66O2 6CO26H 2O；无氧时,呼吸的反应式为：20C6H 12O6 2C2H 5OH 2CO2 18-250C 2条件：繁衍最适温度0C 左右,酒精发酵一般掌握在（传统发酵技术所使用的酵母菌的来源）3菌种来源：自然发酵：附着于葡萄皮上的野生型酵母菌；直接在果汁中人工培育：分别获得得纯洁的酵母菌菌种；现在工厂化生产果酒,为提高果酒的品质,更好地抑制其它微生物的生长,实行的措施是加入人工培育的酵母菌；4试验设计流程图选择葡萄冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵 _ 果酒果醋5依据教材P4 操作提示设计试验步骤及装置；向发酵瓶内充入氧气；充气口作用排气口作用酒精发酵时排出二氧化碳出料口作用用来取样；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是防止空气中微生物的污染使用该装置 制酒 时,应将充气口 关闭 ；制醋 时,应将充气口 打开 ；6试验结果分析与评判：可通过嗅觉和品尝初步鉴定,并用 重铬酸钾检验酒精存在；可观看到的现象为 橙色变成灰绿色二、果醋的制作：1原理：菌种：醋酸菌,属于原核生物,新陈代谢类为异养需养型醋酸生成反应式是 _C2H 5OH+O 2CH 3COOH+H 2O 2条件：最适合温度为 30-35 0C,需要充分的氧气；3菌种来源：到 生产食醋的工厂 或 菌种保藏中心 购买；4设计试验流程及操作步骤：果酒制成以后, 在发酵液中加入醋酸菌或醋曲,然后将装置转移至30-350C 条件下发酵, 适时向发酵液中充入 O2；假如没有充气装置,可以将瓶盖打开,在瓶盖上纱布,以削减空气中尘土污染；三、操作过程应留意的问题名师归纳总结 （1）为防止发酵液被污染,发酵瓶要用体积分数为70%的酒精消毒；第 1 页,共 12 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - （2）葡萄汁装入发酵瓶时,要留出大约学习必备欢迎下载10-12d 左右, 可通过出料口对发酵的情形进 1/3 的空间；（3）制作葡萄酒时将温度严格掌握在18-250C,时间掌握在行准时的监测；（4）制葡萄醋的过程中,将温度严格掌握在30-350C,时间掌握在7-8d ,并留意适时通过充气口 充气；【疑难点拨 】1、 认为应当先冲洗葡萄仍是先除去枝梗？为什么？应当先冲洗,然后再除去枝梗,以防止除去枝梗时引起葡萄破旧,增加被杂菌污染的机会；2、 认为应当从哪些方面防止发酵液被污染？需要从发酵制作的过程进行全面的考虑,由于操作的每一步都可能混入杂菌；例如：榨汁机、发酵装置要清洗洁净；每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全掀开瓶盖等；3. 制葡萄酒时,为什么要将温度掌握在1825 ？制葡萄醋时,为什么要将温度掌握在3035 ？答：温度是酵母菌生长和发酵的重要条件；20 左右最适合酵母菌繁衍；因此需要将温度掌握在其最适温度范畴内；而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为3035 ,因此要将温度掌握在3035 ；4. 制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气？答：醋酸菌是好氧菌,在将酒精变为醋酸时需要氧的参加,因此要适时向发酵液中充气；腐乳的制作一、腐乳制作的原理1腐乳的发酵有多种微生物的协同作用,如青霉、酵母、曲霉、毛霉 等,其中起主要作用的是 毛霉 ；它是一种丝状真菌,常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上；新陈代谢类型是异养需氧型；2 毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和 脂肪酸；3现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下,将优良毛霉菌种直接接种在豆腐上,这样可以防止其他菌种的污染,保证产品的质量；二、腐乳制作的试验流程：让豆腐长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制；三、试验材料含水量 70%的豆腐,粽叶,盘子,盐,黄酒,米酒,糖,香辛料等,广口玻璃瓶,高压锅；四、试验步骤1将豆腐切实 3cm× 3cm× 1cm 如干块2豆腐块放在铺有干粽叶的盘内,每块豆腐等距离排放,豆腐上再铺洁净粽叶,再用保鲜膜包裹；3将平盘放在温度为 15-18 0C 的地方,毛霉逐步生长,大约 5d 后,豆腐表面丛生直立菌丝；4当毛霉生长旺盛,呈淡黄色时,去除保鲜膜及粽叶,散热及水分,同时散去霉味约 36h；5豆腐凉透后,将豆腐间的菌丝拉断,整齐排在容器内,预备腌制；6长满毛霉的豆腐块（以下称毛坯）分层摆放,分层加盐,并随层高而增加 些,以防止其他微生物污染,约腌制 8d；盐量,在瓶口表面铺盐要厚一7将黄酒、米酒和糖、香辛料等混合制成卤汤；卤汤酒精含量掌握在 12%为宜；8广口玻璃瓶刷洗洁净,用高压锅在 100 0C 蒸汽灭菌 30min ,将腐乳成坯摆入瓶中,加入卤汤和辅料后,将瓶口用酒精灯加热灭菌,用胶条密封,常温下,六个月即可以成熟；【疑难点拨】1王致和为什么要撒很多盐,将长毛的豆腐腌起来？盐在该过程中起什么作用？名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载盐能防止杂菌污染,防止豆腐腐败；盐能抑制多种微生物的生长；2配制卤汤时,一般将酒精含量掌握在12%左右,过高过低都不行,为什么？酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系；酒精含量越高,对蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长；酒精含量过低, 蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁衍快,豆腐易腐败,难以成块；3. 豆腐坯用食盐腌制,其作用是什么？渗透盐分,析出水分 给腐乳以必要的咸味 防止毛霉连续生长和污染的杂菌繁衍 浸提毛霉菌丝上的蛋白酶 4. 腐乳在酿造后期发酵中添加多量酒液的目的是什么？防止杂菌污染以防腐 与有机酸结合形成酯,由于酒中特殊是黄酒中含有酵母茼,经发酵可产生醇,并与有机酸结合形成酯,赋予腐乳风味 利于后期发酵 5. 卤汤中香辛料的作用是什么？调味促进发酵杀菌防腐说明：（香辛料如花椒、大蒜、茴香中含有花椒酰胺、蒜辣素、茴香醚及茴香醛等,有极强的杀菌力；又有良好的调味功能；香辛料成分参加发酵过程,合成复杂的酯类,使腐乳形成特有色、香、味；）6. 你能利用所学的生物学学问,说明豆腐长白毛是怎么一回事？答：豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝；严格地说是直立菌丝,在豆腐中仍有匍匐菌丝；7. 我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳？答：含水量为 70%左右的豆腐适于作腐乳；用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形；8. 吃腐乳时,你会发觉腐乳外部有一层致密的“ 皮” ；这层“ 皮” 是怎样形成的呢？它对人体有害吗？它的作 用是什么？答：“ 皮” 是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝）,它能形成腐乳的“ 体” ,使腐乳成形；“ 皮” 对人体无害；探讨加酶洗衣粉的洗涤成效一、基础学问3在本课题中,我们主要探究有关加酶洗衣粉的三个问题：一是一般洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的 成效有什么不同；二是在什么温度下使用加酶洗衣粉成效最好,三是添加不同种类酶的洗衣粉,其洗剂成效有 哪些区分；（答案：酶制剂蛋白酶脂肪酶淀粉酶纤维素酶碱性蛋白酶碱性脂肪酶氨基酸肽温度酸碱度表面活性剂基因工程）二、试验操作1探究一般洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤成效名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备欢迎下载原就、 单一变量原就,有效地掌握其他变（1）试验遵循的原就：试验变量为洗涤剂,设计时应遵循对比量,如水的用量、污染物的量、所用试验用布的质地大小、两种洗衣粉的用量,搅拌及洗涤时间；（2）试验过程取两只大烧杯,用量筒分别量 500mL 蒸馏水放入其中,放入 40 0C 的水浴锅保温；将制好的污染布和洗衣粉（一组为污染布和 一般洗衣 粉,另一组为污染布和 加酶洗衣粉 ）分别放入两只烧杯中；用玻璃棒同时充分搅拌 相同 时间,一段时间后搅拌可重复进行；过相同的时间后观看洗涤成效,探究加酶洗衣粉使用时的最适温度；2不同种类的酶洗衣粉对同一污渍的洗涤成效（1）试验原理：不同种类的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有专一性 ,所以对不同污渍的洗涤成效不同；编号污渍蛋白酶脂肪酶洗涤成效复合酶一般洗衣酶类型淀粉酶1 鸡血2 牛奶3 菜油4 番茄汁5 墨水6 染料（2）试验过程：依据表格设计试验步骤【疑难点拨】1一般洗衣粉中包含哪些化学成分？提示：一般洗衣粉中通常包含有：表面活性剂、水软化剂、碱剂、 漂白剂等成分,有的洗衣粉中仍含有增白剂、香精和色素,以及填充剂等；2在本课题中你准备使用什么方法和标准判定洗涤成效？提示：可在洗涤后比较污物的残留状况,如：已消逝、颜色变浅、面积缩小等,3含有蛋白酶的洗衣粉的洗剂成效好,可以用丝绸作为试验材料吗？不能；由于丝绸的主要成分是蛋白质,它会被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解,损坏衣物；酵母细胞的固定化一、基础学问 酶：优点：催化效率高,低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域；实际问题：对环境条件敏锐,易失活；溶液中的酶很难回收,不能再次利用,提高了生产成本；反应后的 酶会混合在产物中,如不除去,会影响产品质量；设想：能否将酶固定在不溶于水的载体上 固定化酶：优点：酶既能与反应物接触,又能与产物分别,仍可反复利用 实际问题：一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成 都是通过一系列的 酶促反应才能得到的 设想：能否将合成酶的细胞直接固定 固定化细胞：优点：成本更低,操作更简单名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 二、固定化酶的应用实例 课本 49 页 学习必备欢迎下载高果糖浆是指果糖含量为42%左右的糖浆；能将葡萄糖转化为果糖的酶是葡萄糖异构酶使用固定化酶技术,将这种酶固定在一种颗粒状的载体上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着很多小孔的筛板；酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反应溶液却可以自由出入；生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出；反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量；三、固定化细胞技术固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在肯定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法；一般来说,酶更适合采纳化学结合和物理吸附法固定,而细胞多采纳包埋法固定化；这是由于细胞个大,而酶分子很小；个大的细胞难以被吸附或结合,而个小的酶简单从包埋材料 中漏出；包埋法法固定化细胞即将微生物细胞 匀称地 包埋在不溶于水的 多孔性载体 中；常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和 聚丙烯酰胺 等；四、试验操作 一 制备固定化酵母细胞1.酵母菌的活化：活化就是处于 休眠 状态的微生物重新复原正常的生活状态；2.配制物质的量尝试为 0.05mol/L 的 CaCl 2溶液3.配制海藻酸钠溶液加热溶化海藻酸钠时要留意：用小火或间断加热,反复几次,直到溶化为止4.海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合5.固定化酵母细胞以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 CaCl 2 溶液中,并浸泡 30min 时间 ； 二 用固定化酵母细胞发酵1.将固定好的酵母细胞用蒸馏水 冲洗 2-3 次；2.发酵时的温度就为 25 0C,时间 24h ；五、结果分析与评判（一）观看凝胶珠的颜色和外形酵母菌数量少假如制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色, 说明海藻酸钠浓度偏低,包埋的；假如形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,就说明海藻酸钠浓度偏高,制作失败, 需要再作尝试；（二）观看发酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多气泡,同时会闻到酒味补充：直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点：名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载【疑难点拨】1细胞的活化；提示： 在缺水的状态下,微生物会处 于休眠状态；活化就是让处于休眠状 态的微生物重新复原正常的生活状 态；酵母细胞所需要的活化时间较短,一般需要 0.5 1 小时；2如何检验凝胶珠的质量是否合格；提示： 检验凝胶珠的质量是否合格,可以采纳以下方法；一是用镊子夹起 一个凝胶珠放在试验桌上用手挤压,假如凝胶珠不破裂,没有液体流出,就说明凝胶珠的制作胜利；二是在实 验桌上用力摔打凝胶珠,假如凝胶珠 很简单弹起,也说明制备的凝胶珠是 胜利的；3酶和细胞分别适应哪种固定方法？提示： 一般来说,酶更适合采纳化学 结合和物理吸附法固定,而细胞多采 用包埋法固定化； 这是由于细胞个大,而酶分子很小；个大的难以被吸附或 结合,而 个小的酶简单从包埋材料中 漏出；微生物的分别和培育一微生物的试验室培育（一）培育基（1）培育基可分为 液体和固体培育基（依据物理性质） ；在液体培育基中加入凝固剂 琼脂 后,制成琼脂固体 的特点可以判定是哪一 培育基；微生物在固体培育基表面生长,可以形成肉眼可见的 菌落；依据菌落 种菌；（2）养分构成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；此外,仍需要满意微生物生长对 pH、氧气以及特殊营 养物质的要求碳源：能为微生物的代谢供应碳元素的物质；如 CO2、NaHCO 3等无机碳源；糖类（主要是葡萄糖）、脂肪酸等有机碳源；异养微生物只能利用有机 碳源；单质碳不能作为碳源；氮源：能为微生物的代谢供应氮元素的物质；如 N2、NH3、NO3- 、NH 4 +、尿素、牛肉膏、蛋白胨等；只有固 N2；氮 微生物才能利用（二）无菌技术名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载（1）获得纯洁培育物的关键是 防止外来杂菌的入侵,要留意以下几个方面：对试验操作的空间、操作者的衣着和手,进行 清洁和消毒 ；将用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进行 灭菌 ；酒精灯火焰 邻近进行；为防止四周环境中微生物的污染,试验操作应在 试验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与四周的物品 相接触 ；（2）消毒与灭菌的区分 消毒指使用较为温顺的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢 子）；消毒方法常用 煮沸消毒法,仍有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒；灭菌就是指使用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物,包括芽孢和孢子；灭菌方法有 灼烧灭菌、干热 灭菌、高压锅灭菌（三）制作牛肉膏蛋白胨固体培育基（1）方法步骤： 运算、称量、溶化、灭菌、倒平板（2）倒平板操作的步骤：将灭过菌的培育皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培育基的锥形瓶,左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶,将瓶口快速通过火焰；用左手的拇指和食指将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培育基（约 1020mL）倒入培育皿,左手立刻盖上培育皿的皿盖；等待平板冷却凝固,大约需5 10min；然后,将平板倒过来放置 ,使培育皿盖在下、皿底在上；（四）纯化大肠杆菌1 微生物接种的方法最常用的是平板划线法 和 稀释涂布平板法；（2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作；（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基 的表面,进行培育；分为系列稀释操作和涂布平板操作两步；（4）用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使集合在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在培育 基表面形成单个的菌落,以便于纯化菌种；（五）菌种的储存（1）对于频繁使用的菌种,可以采纳暂时保藏的方法；暂时保藏方法：接种到固体斜面 培育基,菌落长成后置于40C的冰箱中 储存；缺点：这种方法储存的时间不长,菌种简单被污染或产生变异；（2）对于需要长期储存的菌种,可以采纳 甘油管藏 的方法；【疑难点拨 】1. 无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,仍有什么目的？能有效防止操作者自身被微生物感染；2. 请你判定以下材料或用具是否需要消毒或灭菌；假如需要,请选择合适的方法；（1） 培育细菌用的培育基与培育皿（2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管（3） 试验操作者的双手（1）（ 2）需要灭菌（ 3）需要消毒 3. 培育基灭菌后,需要冷却到 50 左右时,才能用来倒平板；可以用什么方法来估量培育基的温度？用手触摸盛有培育基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以倒平板了 4. 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染 5. 平板冷凝后,为什么将平板倒置？平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠；将平板倒置,既可以防止皿盖上的水珠落入培育基,又可以防止培育基中 的水分过快地挥发6. 在倒平板的过程中,假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板仍能用来培育微生物吗？为什么？空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生,因此最好不要用 7. 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作终止时,仍旧要灼烧接种环？第一步：为了防止接种环上可能存在的微生物污染培育物,划线前：为了杀死上次划线终止后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目削减,以便得到单个菌落；划线终止后：能准时杀死接种环上残留的菌种,防止细菌污染环境和感染操作者 8. 在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线？以免接种环温度太高,杀死菌种 9. 在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开头划线？划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少；每次从上一次划线的末端开头,能使细菌的数目随划线 次数的增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌繁衍而成的菌落；2 步应如何进行 10. 涂布平板的全部操作都应在火焰邻近进行；结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,第 无菌操作？从操作的各个细节保证“ 无菌”；例如,酒精灯与培育皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸 管要在酒精灯火焰四周一、以尿素为氮源的微生物1尿素：又称碳酰胺,是 蛋白质降解 的产物；在人和其他哺乳动物如家畜的尿液中都含有尿素,大量尿素的 存在对环境造成污染；2以尿素为氮源的微生物：这些细菌可以尿素为氮源,是由于其含有脲酶,通过分解尿素作为其生长的氮源；其利用尿素的方程为：3分别以尿素为氮源的微生物所依据的原理：在氮源只有尿素时,这些微生物能利用尿素获得氮源而存活；而其他微生物却不能利用尿素,最终由于缺乏氮源而死亡；二、从土壤中分别出以尿素为氮源的微生物试验1试验目的：1使用 _专一 _的培育基 含有尿素 分别 专一 的细菌 含有脲酶的细菌 ；2使用 _指示剂颜色的变化 _检知酶 脲酶 所催化的反应；2试验内容：1从土壤中分别出能利用尿素的细菌；2观看菌落数；3试验步骤：名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载1采纳倒平板技术,在超净台上的酒精灯旁制得固体平面LB 全养分培育基与尿素培育基；2制备细菌悬浮液：将土样 1 g,在无菌条件下加到 99mL 无菌水的三角瓶中, 振荡 10min,制成 10-2 稀释液；从该稀释液中取 0.5mL悬液加到 4.5mL 无菌水的三角瓶中,经振荡就制成 10-3 稀释液；再从该稀释液中取 0.5mL 悬液加到 4.5mL 无菌水的三角瓶中,经振荡就制成 10-4 稀释液；依此法可依次制备出 105、106 土壤稀释液；3用涂布法分别细菌：取 0.1mL 稀释 104 和 105 的土壤稀释液,分别加到有 LB 培育基和尿素培育基的培育皿中,再将储存在 70%酒精中的玻璃刮刀放在酒精灯火焰上灼烧,待刮刀上火焰熄灭后,在酒精灯火焰旁打开培育皿,将菌液涂布到整个平面上；4培育：将培育皿倒置,在37恒温箱中培育24-48h ；1055观看、计数菌落；培育基细菌悬浮液稀释度4 10LB 全养分固体培养基尿素固体培育基三、纤维素1化学组成：由 C、H、O 三种元素组成,属于糖类中的多糖；2植物的细胞壁主要由 纤维素、果胶 组成；四、水解纤维素的微生物1现已发觉的能水解纤维素的微生物：绿色木霉、变异青霉、黑曲霉、根霉 等；2这些微生物能水解纤维素的缘由：它们能分泌纤维素酶,分解纤维素；五、纤维素酶1纤维素酶：不是单一的一种酶,而是 复合酶 ,它包括 C1酶、 Cx酶、葡萄糖苷酶；不同酶水解的作用不同2纤维素酶的作用：纤维素酶能催化水解纤维素 详细作用如下 六、观看土壤中能水解纤维素的微生物试验1试验材料：180 g_草炭 _土或 _枯树周边 _的土：可以从其中获得能水解纤维素的微生物；2牛皮 纸90 cm22 张3自来水4卷烟 的纸 6 张：从其中获得纤维素第 9 页,共 12 页名师归纳总结 - - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载2试验步骤：1灭菌：将培育皿、三角瓶、自来水以及_一半 土壤用灭菌锅在1 kg 压力下灭菌30 min；2设置对比试验：将已灭菌 和未灭菌的 等量土壤分别放在 3培育2 个经灭菌处理的培育皿中,相互形成对比；将 6 张卷烟纸 等分成 2 份,分别放在上述 2 个有土样的培育皿的 土壤表面 ,培育皿不加盖,可用牛皮纸遮盖保湿；然后置于 较高湿度 的培育室中；4 6 周后观看卷烟纸的变化 是否消逝 ；【疑难点拨】1选择菌株的原就：人为供应有利于目的菌株生长的条件 包括养分、温度、pH 等 ,同时抑制或阻挡其他微生物的生长；2探究菌株选择原理的不同点土壤中分解尿素的细菌 分解纤维素的微生物选择培育基的成分：尿素作为唯独的 氮源 鉴定方法：在培育基中加入酚红指示 剂,如指示剂变红,pH 上升,说明细菌 能分解尿素选择培育基的成分：纤维素作为唯独的 碳源 鉴定方法：刚果红染色法,即刚果红与 纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解 后,培育基显现以纤维素分解菌为中心的 透亮圈3在微生物的选择与计数试验中,设置对比试验的目的是：排除试验组中非测试因素对试验结果的影响,提高试验结果的可信度；4怎样设置证明培育基未被污染的对比？用空白培育基作对比；5怎样设置证明选择培育基选择作用的对比？用牛肉膏蛋白胨培育基接种等量同种菌液作对比；【易错警示】1 为了使结果接近真实值,应设置三个或三个以上的平板,运算出菌落平均数；2 运算时明显偏离实际值 本组试验其他平板计数值 的要舍弃掉后求平均值；3 对比试验的设计第一要明确设计的目的,分析出试验的自变量之后才能精确设计；DNA 的粗提取与鉴定一、提取 DNA的方法提取生物大分子的基本思路是选用肯定的物理或化学方法分别具有不同物理或化学性质的生物大分子；对于DNA ,DNA 的粗提取而言,就是要利用DNA 与 RNA 、 蛋白质与脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取去除其他成分；1）DNA 的溶解性 DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 DNA 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分别目的；此外, DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质就溶于酒精；利用这一原理,可以将 DNA 与蛋白质进一步的分别；2）DNA 对酶、高温顺洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质,但是对 DNA 没有影响；大多数蛋白质不能忍耐 6080 oC 的高温,而 DNA 在 80 0C 以上才会变性；洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对 DNA 没有影响；3）DNA 的鉴定 在沸水浴条件下,DNA 遇二苯胺会被染成蓝色二、试验设计名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 1）试验材料的选取凡是含有学习必备欢迎下载DNA 含量高的生物组织,胜利DNA 的生物材料都可以考虑,但是使用的可能性更大；在下面的生物材料中选取适合的试验材料：鱼卵、猪肝、菜花（花椰菜）、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基的大肠杆菌2）破裂细胞,猎取含 DNA 的滤液 动物细胞的破裂比较简单,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用 玻璃棒 搅拌,过滤后收集滤液即可；假如试验材料是植物细胞,需要先用 洗涤剂 溶解细胞膜； 例如,提取洋葱的 DNA 时,在切碎的洋葱中加入肯定的洗涤剂 和 食盐 ,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液；3）去除滤液中的杂质4）DNA 的析出与鉴定将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液（体积分数为95%）,静置 2-3min ,溶液中会显现白色丝状物,这就是粗提取的 水分；DNA ；用玻璃棒沿同一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的取两支 20ml 的试管,各加入物质的量浓度为 2mol/L 的 NaCl 溶液 5ml,将丝状物放入其中一支试管中,用玻 璃棒搅拌,使丝状物溶解；然后,向两支试管中各加入 4ml 的 二苯胺试剂；混合匀称后,将试管置于 中加热 5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有 DNA 的溶液是否变 蓝 ；三、操作提示以血液为试验材料时,每100ml 血液中需要加入3g 柠檬酸钠,防止血液凝固；加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否就简单产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作；加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧 DNA 的断裂,导致DNA 分子不能形成絮状沉淀；二苯胺试剂要现配现用,否就会影响鉴定的成效；四、结果分析与评判【疑难点拨】1为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂 细胞膜和核膜的破裂,从而释放出DNA；2加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜, 有利于 DNA的释放； 食盐的主要成分是NaCl,有利于 DNA的溶解；3假如研磨不充分,会对试验结果产生怎样的影响？答：研磨不充分会使细胞核内的 DNA释放不完全, 提取的 DNA量变少, 影响试验结果, 导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等；4此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？答：可能含有核蛋白、多糖和 RNA等杂质；DNA,能够去除杂质？5为什么反复地溶解与析出 答：用高盐浓度的溶液溶解 DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使 DNA析出,能除去溶解在低 盐溶液中的杂质；因此,通过反复溶解与析出 DNA,就能够除去与 DNA溶解度不同的多种杂质；6方案二与方案三的原理有什么不同？名师归纳总结 - - - - - - -第 11 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的 DNA与蛋白质分开；方案三利用的是 DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与 DNA分别；7. DNA的溶解度与 NaCl 溶液浓度的关系：当 NaCl 溶液浓度低于 0.14mol/L 时,随浓度的上升, DNA的溶解度降低； 当 NaCl 溶液浓度高于 0.14mol/L 时,随浓度上升, DNA的溶解度上升；8. 制备鸡血细胞液时,要在新奇的鸡血中加入柠檬酸钠的缘由制备鸡血细胞液时,要在新奇的鸡血中加入抗凝剂柠檬酸钠,防止血液凝固；其原理是柠檬酸钠能与血浆中 Ca 2+发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca 2+大大削减,血液便不会凝固,由于鸡血红细胞,白细胞都有细胞核,DNA主要存在于细胞核中,所以在离心或静置沉淀后,要弃出上层清液血浆；9提取 DNA的第一步是材料的选取,其目的是肯定要选取DNA含量较高的生物材料,否就会由于试验过程中或多或少的缺失而造成检测的困难；其次步是 DNA的释放和溶解,这一步是试验胜利与否的关键,要尽可能使细胞内的 DNA全部溶解；第三步是 DNA的纯化,即依据 DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性,最大限度地将 DNA与杂质分开；最终一步是对 DNA进行鉴定,这是对整个试验的结果的检测；10在 DNA的析出的步骤中用到玻璃棒搅拌时,留意动作要轻缓,以免加剧 DNA分子的断裂,导致 DNA分子不能形成絮状沉淀；11盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器；鸡血细胞破裂以后释放出的细胞内 DNA的含量原来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的好使用塑料的烧杯和试管,这样可以削减提取过程的 DNA的缺失；12.本试验中有三次过滤：过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液：为了获得含核物质的滤液过滤含粘稠物的 0.14mol/LNaCl 溶液：为了纱布上的粘稠物过滤溶解有 DNA的 2mol/LNaCl 溶液：为了含 DNA的滤液DNA,简单被玻璃容器吸附,由于 DNA就会更少；因此,试验过程中最名师归纳总结 - - - - - - -第 12 页,共 12 页