实验细菌的培养法.pptx

目的要求目的要求1、学习和掌握细菌分离与培、学习和掌握细菌分离与培养的各种基本技术；养的各种基本技术；2、进一步熟悉和、进一步熟悉和掌握无菌操掌握无菌操作技术作技术。第1页/共25页实验材料实验材料 标本和菌种：大肠杆菌培养物、葡萄球菌培养物、变形杆菌培养物、枯草杆标本和菌种：大肠杆菌培养物、葡萄球菌培养物、变形杆菌培养物、枯草杆菌培养物；菌培养物；实验器材：接种环、接种针、酒精灯；实验器材：接种环、接种针、酒精灯；培养基：普通琼脂平板、试管斜面、液体培养基、半固体培养基；培养基：普通琼脂平板、试管斜面、液体培养基、半固体培养基；第2页/共25页 常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接种锄、玻璃涂棒等（见图种锄、玻璃涂棒等（见图种锄、玻璃涂棒等（见图种锄、玻璃涂棒等（见图6 6 6 6）。）。）。）。图6接种工具接种工具接种工具接种工具第3页/共25页细菌接种的基本程序细菌接种的基本程序灭菌接种环灭菌接种环沾取标本沾取标本接种接种灭菌接种环灭菌接种环杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境第4页/共25页（一）细菌的分离方法 培养基：固体平板培养基培养基：固体平板培养基培养基：固体平板培养基培养基：固体平板培养基 分离方法：分离方法：分离方法：分离方法：划线分离法划线分离法划线分离法划线分离法 意义：该法主要是借助划线而将混杂的细菌在琼脂表面分散开，使单个细菌意义：该法主要是借助划线而将混杂的细菌在琼脂表面分散开，使单个细菌意义：该法主要是借助划线而将混杂的细菌在琼脂表面分散开，使单个细菌意义：该法主要是借助划线而将混杂的细菌在琼脂表面分散开，使单个细菌能固定在某一点，生长繁殖后形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。能固定在某一点，生长繁殖后形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。能固定在某一点，生长繁殖后形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。能固定在某一点，生长繁殖后形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。细菌的分离培养方法第5页/共25页微生物的分离微生物的分离微生物的分离微生物的分离平板划线法平板划线法平板划线法平板划线法1.分区划线法：2.连续划线法：第6页/共25页微生物的分离微生物的分离平板划线法平板划线法第7页/共25页第8页/共25页分区划线法分区划线法分区划线法分区划线法第一区划线第一区划线灭菌接种环灭菌接种环第二区划线第二区划线灭菌接种环灭菌接种环第三区划线第三区划线灭菌接种环灭菌接种环第9页/共25页连续划线法连续划线法第10页/共25页（二）细菌的接种法 当细菌分离成纯种后，常需要接种到相关的培养基中，以测试其各种生物学当细菌分离成纯种后，常需要接种到相关的培养基中，以测试其各种生物学当细菌分离成纯种后，常需要接种到相关的培养基中，以测试其各种生物学当细菌分离成纯种后，常需要接种到相关的培养基中，以测试其各种生物学性状。一般可用斜面、半固体、液体培养基来检验细菌的培养特性，相应培性状。一般可用斜面、半固体、液体培养基来检验细菌的培养特性，相应培性状。一般可用斜面、半固体、液体培养基来检验细菌的培养特性，相应培性状。一般可用斜面、半固体、液体培养基来检验细菌的培养特性，相应培养基的接种方法有三种。养基的接种方法有三种。养基的接种方法有三种。养基的接种方法有三种。第11页/共25页斜面接种法斜面接种法培养基：培养基：培养基：培养基：斜面固斜面固斜面固斜面固体培养基；体培养基；体培养基；体培养基；接种方法：接种方法：接种方法：接种方法：斜面斜面斜面斜面培养基接种法；培养基接种法；培养基接种法；培养基接种法；用途：用途：用途：用途：扩增细菌、扩增细菌、扩增细菌、扩增细菌、保存菌种；或用保存菌种；或用保存菌种；或用保存菌种；或用于观察其某些生于观察其某些生于观察其某些生于观察其某些生化特性。化特性。化特性。化特性。第12页/共25页琼脂斜面培养基接种法第13页/共25页穿刺接种穿刺接种半固体培养基：半固体培养基：接种方法：穿刺接接种方法：穿刺接种法。用种法。用接种针接种针垂垂直地穿入培养基中直地穿入培养基中心至底部心至底部 然后沿着然后沿着原接种线原接种线将针拔出将针拔出 用途：检验细菌的用途：检验细菌的运动性或观察细菌运动性或观察细菌的生化反应。的生化反应。第14页/共25页液体培养基接种法液体培养基接种法培养基：培养基：液体培养液体培养基基接种方法：接种方法：液体接液体接种法种法从斜面菌种接入液从斜面菌种接入液体培养液体培养液从液体培养液接入从液体培养液接入液体培养液液体培养液用途：用途：扩增细菌，扩增细菌，用于观察细菌的生用于观察细菌的生长特性或测定其生长特性或测定其生化特性。化特性。第15页/共25页细菌培养法细菌培养法 一般培养（需氧培养）：一般培养（需氧培养）：培养温度：培养温度：3737（采用恒温培养箱）（采用恒温培养箱）培养时间：培养时间：181824h24h 二氧化碳培养法：二氧化碳培养法：烛缸法、二氧化碳培养箱烛缸法、二氧化碳培养箱 厌氧培养法：厌氧培养法：厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等第16页/共25页细菌在固体培养基中的生长现象菌落：菌落：菌落：菌落：定义：定义：定义：定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。形成单一肉眼可见的细菌集团。形成单一肉眼可见的细菌集团。形成单一肉眼可见的细菌集团。菌落特征：菌落特征：菌落特征：菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、大小、形状、边缘、颜色、表面、大小、形状、边缘、颜色、表面、大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性透明度、湿润度、黏度、溶血性透明度、湿润度、黏度、溶血性透明度、湿润度、黏度、溶血性菌落类型：菌落类型：菌落类型：菌落类型：光滑型（光滑型（光滑型（光滑型（S S S S）、粗糙型（）、粗糙型（）、粗糙型（）、粗糙型（R R R R）、黏）、黏）、黏）、黏液型（液型（液型（液型（M M M M）菌苔：菌苔：菌苔：菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。物。物。物。第17页/共25页菌 落第18页/共25页菌落与菌苔菌落与菌苔第19页/共25页细菌在液体培养基中的生长现象 混浊：多见于兼性厌氧菌混浊：多见于兼性厌氧菌 沉淀：多见于厌氧菌沉淀：多见于厌氧菌 菌膜：多见于专性需氧菌菌膜：多见于专性需氧菌第20页/共25页液体培养基的细菌生长第21页/共25页细菌在半固体培养基中的生长现象 有鞭毛细菌：有鞭毛细菌：在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。无鞭毛细菌：无鞭毛细菌：只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。第22页/共25页无动力 有动力穿刺接种生长现象穿刺接种生长现象第23页/共25页结果观察时间安排液体、斜面、半固体、固体平板每人各一个。保证每组把每种细菌都接上。明天观察，记录结果；完成实验报告。第24页/共25页感谢您的观看！第25页/共25页