实验一显微镜的使用及微生物形态的观察.pptx

1熟悉普通光学显微镜的构造及各部分的功熟悉普通光学显微镜的构造及各部分的功能；能；2学习并掌握油镜的原理和使用方法；学习并掌握油镜的原理和使用方法；3学习观察微生物的个体形态；学习观察微生物的个体形态；4学会生物图的绘制。学会生物图的绘制。一、目的要求一、目的要求第1页/共23页二、显微镜的基本构造二、显微镜的基本构造1.物镜转换器物镜转换器 2.接物镜接物镜 3.游标卡尺游标卡尺 4.载物台载物台 5.聚光器聚光器 6.彩虹光阑彩虹光阑 7.光源光源 8.镜座镜座 9.电源开关电源开关 10.光源滑动变阻器光源滑动变阻器 11.粗调螺旋粗调螺旋 12.微调螺旋微调螺旋 13.镜臂镜臂14.镜筒镜筒 15.目镜目镜 16.标本移动螺旋标本移动螺旋第2页/共23页显微镜是由显微镜是由机械装置机械装置和和光学系统光学系统两大部分组成。两大部分组成。1机械装置机械装置 镜座（镜座（base）和）和镜臂镜臂（arm）镜镜座座位位于于显显微微镜镜底底部部,呈呈马马蹄蹄形形，它它支支持持全全镜镜。镜镜臂臂有有固固定定式式和和活活动动式式两两种，活动式的镜臂可改变角度。镜臂支持镜筒。种，活动式的镜臂可改变角度。镜臂支持镜筒。镜筒镜筒（body tube）是是由由金金属属制制成成的的圆圆筒筒，上上接接目目镜镜，下下接接转转换换器器。镜镜筒筒有有单单筒筒和和双双筒筒两两种种，单单筒筒又又可可分分为为直直立立式式和和后后倾倾式式两两种种。而而双双筒筒则则都都是是倾倾斜斜式式的的，倾倾斜斜式式镜镜筒筒倾倾斜斜45。双双筒筒中中的的一一个个目目镜镜有有屈屈光光度度调调节节装装置置，以以备备在两眼视力不同的情况下调节使用。在两眼视力不同的情况下调节使用。第3页/共23页转转换换器器（nosepiece）：为为两两个个金金属属碟碟所所合合成成的的一一个个转转盘盘，其其上上装装 3-4个个物物镜镜,可可使使每每个个物物镜镜通通过过镜镜筒筒与与目目镜镜构构成一个放大系统。成一个放大系统。载载物物台台（stage）：又又称称镜镜台台，为为方方形形或或圆圆形形的的盘盘，用用以以载载放放被被检检物物体体，中中心心有有一一个个通通光光孔孔。在在载载物物台台上上有有的的装装有有两两个个金金属属压压夹夹称称标标本本夹夹，用用以以固固定定标标本本；有有的的装装有有标标本本推推动动器器，将将标标本本固固定定后后，能能向向前前后后左左右右推推动动。有有的的推推动动器器上上还还有有刻刻度度，能能确确定定标标本本的的位位置置，便便于于找找到变换的视野。到变换的视野。调调焦焦装装置置：是是调调节节物物镜镜和和标标本本间间距距离离的的机机件件，有有粗粗动动螺螺旋旋（coarse adjustment）即即粗粗调调节节器器和和微微动动螺螺旋旋（fine adj-ustment）即即细细调调节节器器，利利用用它它们们使使镜镜筒筒或或镜镜台台上上下下移移动动，当当物物体体在在物物镜镜和和目目镜镜焦焦点点上上时时，则则得得到到清清晰晰的图像。的图像。第4页/共23页2光学系统光学系统 物物镜镜（objective）：安安装装在在镜镜筒筒下下端端的的转转换换器器上上，因因接接近近被被观观察察的的物物体体，故故又又称称接接物物镜镜。其其作作用用是是将将物物体体作作第第一一次次放放大大，是是决决定定成成像像质质量量和和分分辨辨能能力力的的重重要要部部件件。物物镜镜上上通通常常标标有有数数值值孔孔径径、放放大大倍倍数数、镜镜筒筒长长度度、焦焦距距等等主主要要参参数数。如如10/0.25；160/0.17，其其中中“10”表表示示放放大大倍倍数数，“0.25”表表示示数数值值孔孔径径（numerical aperture），“160/0.17”分分别别表表示示镜镜筒筒长长度度和和所所需需盖玻片厚度（盖玻片厚度（mm）。）。目目镜镜（coular lens）：装装于于镜镜筒筒上上端端，由由两两块块透透镜镜组组成成。目目镜镜把把物物镜镜造造成成的的像像再再次次放放大大，不不增增加加分分辨辨力力，上上面面一一般般标标有有4、10、16等等放放大大倍倍数数，可可根根据据需需要要选选用用。一一般般可可按按与与物物镜镜放放大大倍倍数数的的乘乘积积为为物物镜镜数数值值孔孔径径的的 500-700 倍倍，最最大大也也不不能能超超过过 1000 倍倍的的选选择择。目目镜镜的的放大倍数过大，反而影响观察效果。放大倍数过大，反而影响观察效果。第5页/共23页聚聚光光器器（condenser）：光光源源射射出出的的光光线线通通过过聚聚光光器器汇汇聚聚成成光光锥锥照照射射标标本本，增增强强明明度度和和造造成成适适宜宜的的光光锥锥角角度度，提提高高物物镜镜的的分分辨辨力力。聚聚光光器器由由聚聚光光镜镜和和虹虹彩彩光光圈圈（iris diaphragm）组组成成，聚聚光光镜镜由由透透镜镜组组成成。虹虹彩彩光光圈圈由由簿簿金金属属片片组组成成，中中心心形形成成圆圆孔孔，推推动动把把手手可可随随意意调调整整透透进进光光的的强强弱弱。调调节节聚聚光光镜镜的的高高度度和和虹虹彩彩光光圈圈的大小，可得到适当的光照和清晰的图像。的大小，可得到适当的光照和清晰的图像。光光源源（light source）：较较新新式式的的显显微微镜镜其其光光源源通通常常是是安安装装在在显显微微镜镜的的镜镜座座内内，通通过过按按扭扭开开关关来来控控制制；老老式式的的显显微微镜镜大大多多是是采采用用附附着着在在镜镜臂臂上上的的反反光光镜镜，反反光光镜镜是是一一个个两两面面镜镜子子，一一面面是是平平面面，另另一一面面是是凹凹面面。在在使使用用低低倍倍和和高高倍倍镜镜观观察察时时，用用平平面面反反光光镜镜；使用油镜或光线弱时可用凹面反光镜。使用油镜或光线弱时可用凹面反光镜。滤滤光光片片（filter）：可可见见光光是是各各种种颜颜色色的的光光组组成成的的，不不同同颜颜色色的的光光线线波波长长不不同同。如如只只需需某某一一波波长长的的光光线线时时，就就要要用用滤滤光光片片。选选用用适适当当的的滤滤光光片片，可可以以提提高高分分辨辨力力，增增加加影影像像的的反反差差和和清清晰晰度度。滤滤光光片片有有紫紫、青青、蓝蓝、绿绿、黄黄、橙橙、红红等等各各种种颜颜色色的的，分分别别透透过过不不同同波波长长的的可可见见光光，可可根根据据标标本本本本身身的的颜颜色色，在在聚聚光光器器下下加加相应的滤光片。相应的滤光片。第6页/共23页 三、基本原理三、基本原理 1 1、细细菌菌的的个个体体形形态态是是指指细细菌菌细细胞胞的的大大小小，形形状状等等特特征征，利利用用观观察察个个体体形形态态对对细细菌进行初步识别和鉴定。菌进行初步识别和鉴定。第7页/共23页第8页/共23页2、放放线线菌菌是是指指能能形形成成分分枝枝丝丝状状体体或或菌菌丝丝体体的的一一类类革革兰兰氏氏阳阳性性细细菌菌。常常见见放放线线菌菌大大多多能能形形成成菌菌丝丝体体，紧紧贴贴培培养养基基表表面面或或深深入入培培养养基基内内生生长长的的叫叫基基内内菌菌丝丝，基基丝丝生生长长到到一一定定阶阶段段还还能能向向空空气气中中生生长长出出气气生生菌菌丝丝，并并进进一一步步分分化化产产生生孢孢子子丝丝及孢子。及孢子。第9页/共23页第10页/共23页3、霉菌可产生复合分枝的菌丝体，分基内菌、霉菌可产生复合分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。征是识别不同种类霉菌的重要依据。第11页/共23页毛霉与根霉毛霉与根霉第12页/共23页青霉青霉分生孢子分生孢子分生孢子梗分生孢子梗小梗小梗梗基梗基附枝附枝第13页/共23页曲霉曲霉分生孢子分生孢子次生小梗次生小梗初生小梗初生小梗顶囊顶囊分生孢子梗分生孢子梗足细胞足细胞第14页/共23页显微镜、细菌三型涂片、霉菌显微镜、细菌三型涂片、霉菌和放线菌的永久玻片等。和放线菌的永久玻片等。四、器材四、器材 第15页/共23页五、操作步骤五、操作步骤（1）置置显显微微镜镜于于平平稳稳的的实实验验台台上上，镜镜座座距距实实验验台台边边沿沿约约 3-4，镜镜检检者者姿姿势势要要端端正正，一一般般用用左左眼眼观观察察，右右眼眼便便于于绘绘图图或或记记录录，两两眼眼必必须须同同时时睁睁开开，以以减减少少疲疲劳劳，亦亦可可练习左右眼均能观察。练习左右眼均能观察。（2）调调节节光光源源、光光线线较较强强的的天天然然光光源源宜宜用用平平面面镜镜；光光线线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜。较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜。第16页/共23页第17页/共23页（3）低倍镜观察）低倍镜观察 检检查查的的标标本本需需先先用用低低倍倍镜镜观观察察，因因为为低低倍倍镜镜视视野野较较大，易发现目标和确定检查的位置。大，易发现目标和确定检查的位置。将将三三型型涂涂片片玻玻片片标标本本置置镜镜台台上上，用用标标本本夹夹夹夹住住，移移动动推推动动器器，使使观观察察对对象象处处在在物物镜镜正正下下方方，转转动动粗粗调调节节器器，物物镜镜降降至至距距标标本本约约处处，由由目目镜镜观观察察，此此时时可可适适当当地地缩缩小小光光圈圈，否否则则视视野野中中只只见见光光亮亮一一片片，难难见见到到目目的的物物，同同时时用用粗粗调调节节器器慢慢慢慢升升起起镜镜筒筒，直直至至物物像像出出现现后后再再用用细细调调节节器器调调节节到到物物像像清清楚楚时时为为止止，然然后后移移动动标标本本，认认真真观观察察标标本本各各部部位位，找找到到合合适适的的目目的的物物，并并将将其其移移至视野中心，准备用高倍镜观察。至视野中心，准备用高倍镜观察。第18页/共23页（4）高倍镜观察）高倍镜观察 将将高高倍倍镜镜转转至至正正下下方方，在在转转换换物物镜镜时时，需需用用眼眼睛睛在在侧侧面面观观察察，避避免免镜镜头头与与玻玻片片相相撞撞。如如果果高高倍倍镜镜触触及及载载玻玻片片应应立立即即停停止止旋旋动动，说说明明原原来来低低倍倍镜镜就就没没有有调调准准焦焦距距，目目的的物物并并没没找找到到，要要用用低低倍倍镜镜重重调调，如如果果调调对对了了，换换高高倍倍镜镜时时基基本本可可以以看看到到目目的的物物，若若有有点点模模糊糊，用用细细调调节节器器调调就就清清晰晰可可见见。找找到到最最适适宜宜观观察察的的部部位位后后，将将此部位移至视野中心，准备用油镜观察。此部位移至视野中心，准备用油镜观察。第19页/共23页（5）油镜观察）油镜观察 用用粗粗调调节节器器将将镜镜筒筒提提起起约约2，将将油油镜镜转转至至正正下下方。方。在在玻玻片片标标本本的的镜镜检检部部位位滴滴上上一一滴滴香香柏柏油油，切切勿勿加多。加多。从从侧侧面面注注视视，用用粗粗调调节节器器将将镜镜筒筒小小心心地地降降下下，使使油油镜镜浸浸在在香香柏柏油油中中，其其镜镜头头几几乎乎与与标标本本相相接接，应应特特别别注注意意不不能能压压在在标标本本上上，更更不不可可用用力力过过猛猛，否则不仅压碎玻片，也会损坏镜头。否则不仅压碎玻片，也会损坏镜头。标标本本观观察察完完毕毕后后，转转动动粗粗调调节节器器将将镜镜筒筒升升起起，取取下下标标本本玻玻片片。立立即即用用擦擦镜镜纸纸将将镜镜头头上上的的香香柏柏油油擦擦净净，然然后后用用擦擦镜镜纸纸蘸蘸少少许许二二甲甲苯苯擦擦去去镜镜头头上上残残留留的的油油迹迹，最最后后再再用用干干净净的的擦擦镜镜纸纸擦擦去去残残留留的的二二甲甲苯。苯。第20页/共23页（6）观察后的处理工作）观察后的处理工作擦擦完完后后，把把物物镜镜转转离离光光轴轴，把把反反光光镜镜转转到到与与载载物物台台垂垂直直的的方方向向，以以减减少少灰灰尘尘粘粘落落上上面面，而而后后罩罩上上镜镜套套，小小心心的的放放回回镜镜箱箱内内，保保存存备备用。用。注注意意：微微生生物物标标本本片片，多多用用涂涂片片法法制制成成，观观察察完完毕毕，不不能能用用力力擦擦去去玻玻片片上上的的镜镜油油，只只能能用用擦擦镜镜纸纸轻轻轻轻压压吸吸或或滴滴一一滴滴二二甲甲苯苯用用擦擦镜镜纸纸轻拉。示教片看完处理后应放回原处。轻拉。示教片看完处理后应放回原处。第21页/共23页六、思考题和作业题六、思考题和作业题1、使使用用油油镜镜观观察察时时，为为什什么么要要在在载载玻玻片片上上滴滴加香柏油？加香柏油？2、镜镜检检玻玻片片标标本本时时，为为什什么么要要先先用用低低倍倍物物镜镜观察，而不是直接用高倍物镜或油镜观察？观察，而不是直接用高倍物镜或油镜观察？3、绘制青霉和根霉图、绘制青霉和根霉图第22页/共23页感谢您的观看！第23页/共23页