细胞凋亡分子机制.pptx
1、细胞凋亡信号传导的一般特征一般特征2、调控细胞凋亡的传统信号途径传统信号途径3、调控细胞凋亡的死亡信号途径4、参与细胞凋亡的其他信号传导系统第四讲第四讲 细胞凋亡的信号传导细胞凋亡的信号传导第1页/共69页1 1、细胞凋亡信号传导的、细胞凋亡信号传导的一般特一般特征征（1）细胞凋亡的信号传导途径的特点信号传导系统具有多样性信号传导途径的启动可因细胞的来源、种类、生长环境及诱导因素的不同而有差异细胞凋亡与细胞增殖、分化过程中的信号传导系统间存在部分共同的通道细胞内被同一信号激活的多条途径间存在互通交叉点第2页/共69页（2）当前细胞信号传导途径的研究 基本按如下3个阶段 进行：确定哪些重要的调节信号在传统（细胞增殖）信号传导途径中对细胞凋亡过程具有关键的调控作用利用分子和细胞生物学手段确定与这些调节信号直接作用靶分子的性能通过逐步追踪阐明信号传导途径的具体内容第3页/共69页（3）细胞凋亡信号传导系统与其诱导因素的相互关系不同诱导细胞凋亡的因素可以通过相同的信号传导系统诱发细胞凋亡在一种体系中促进细胞凋亡的信号可在另一个体系中抑制细胞凋亡不同信号传导系统是相互联系和相互作用的整体，呈复杂的调控网状结构第4页/共69页（4）信号传导的一般途径各种生理条件或非生理条件下的刺激因素都可作为细胞凋亡的第一信号系统第一信使系统与细胞膜结核并作用以后，可与细胞内的激素受体相作用，或刺激第二信使系统，如Ca2+、cAMP等通过共同通道改变某些基因的表达，导致细胞凋亡的发生第5页/共69页2 2、调控细胞凋亡的、调控细胞凋亡的传统信号途传统信号途径径（1）G结合蛋白（GBP/GRP/GP）信号途径与细胞凋亡 G结合蛋白信号途径是由GBP、G蛋白偶联受体（GpCR）、腺苷酸环化酶（AC）三部分组成第6页/共69页 Signaling Pathway from G-Protein Families第7页/共69页 Signaling Pathway from G-Protein Families第8页/共69页（A）cAMP与细胞凋亡应用cAMP的类似物或诱导剂使细胞内的cAMP浓度升高时，可有效地诱导细胞发生凋亡cAMP的作用与导致细胞凋亡的蛋白质磷酸化的改变有关体外的实验一致认为，cAMP诱导的细胞凋亡是由激活的cAMP依赖性PKA介导的，并需要Ca2+的存在cAMP可诱导内源性核酸内切酶的激活，推测cAMP可通过PKA使关键的蛋白质分子发生不同程度的磷酸化，进而影响内源性核酸内切酶的活性第9页/共69页然而，在一些模型系统中又发现cAMP可抑制细胞凋亡cAMP及其类似物可抑制因撤退神经生长因子（NGF）而诱导的神经细胞、老化的中心粒细胞凋亡和启动T细胞受体引起的T细胞杂交瘤细胞凋亡 cAMP信号系统对细胞凋亡的影响可能与细胞类型有关第10页/共69页（B）Ca2+与细胞凋亡Ca2+可激活核酸内切酶Ca2+可激活蛋白酶Ca2+可激活PKCCa2+可调节磷脂酶活性Ca2+对谷氨酰胺转移酶的调节 有证据表明，Ca2+浓度的升高引起细胞凋亡并非是普遍现象，因此，可能起决定作用的因素是维系某一细胞生存的Ca2+浓度的失衡第11页/共69页（C）PKC/PKA与细胞凋亡PKA和PKC是体内主要催化蛋白质磷酸化的激酶PKA受cAMP激活，PKC的直接活化分子是DAGPKC促进细胞凋亡的机制可能与PKC的活化可激活离子通道，使G蛋白发生磷酸化，导致GP活化或表达的下调，引起cAMP水平升高有关不同的PKC同工酶在凋亡调节中担负着不同的功能第12页/共69页Activation of the MAPK-signalling pathway.（2）酶蛋白信号途径与细胞凋亡）酶蛋白信号途径与细胞凋亡Ras-MAPK途径与细胞凋亡信号的传导第13页/共69页Activation of the MAPK-signalling pathway.（2）酶蛋白信号途径与细胞凋亡）酶蛋白信号途径与细胞凋亡Ras-MAPK途径与细胞凋亡信号的传导第14页/共69页3 3、调控细胞凋亡的、调控细胞凋亡的死亡信号途径死亡信号途径（1）死亡因子及其受体死亡因子：FasL和TNF死亡因子受体：Fas（CD95）和TNFR第15页/共69页（2）FasL/TNF介导的信号传导途径神经鞘磷脂途径蛋白酶途径蛋白激酶C途径磷脂酶A2（PLA2）脂氧化酶途径磷脂酰肌醇-磷脂酶C途径酪氨酸激酶（PTK）途径Daxx途径TRAIL途径核转录因子NF-kB途径第16页/共69页4 4、参与细胞凋亡调控的、参与细胞凋亡调控的其他其他信号传导系统信号传导系统（1）T细胞受体信号传导途径与细胞凋亡TCR抗原受识别，第二信使为DAG和Ca2+TCR/CD3信号传导途径导致的细胞凋亡，是通过DNA结合蛋白Nurr77来调节的第17页/共69页T Cell Receptor Signaling Pathway第18页/共69页T Cell Receptor Signaling Pathway第19页/共69页（2）粘附分子与细胞凋亡粘附分子：多属跨膜糖蛋白位于细胞表面的粘附受体分类：免疫球蛋白超家族（IgSF）、整合素家族（IF）、选择素家族（SF）、钙粘附素家族（CF）、其他粘附分子（CD44等）当粘壁生长的上皮细胞和内皮细胞表面失粘附特性时，细胞可发生凋亡第20页/共69页粘附分子参与的信号传导，是通过粘附分子触发细胞内信号传导一系列生化反应而实现的锚定依赖性细胞一旦与基质分离，即可发生凋亡不是粘附行为本身，而是粘附中整合素与其配体的结合阻抑了细胞凋亡的发生整合蛋白介导的细胞粘附必须伴随细胞骨架的重排，才能阻止凋亡第21页/共69页（3）活性氧与细胞凋亡活性氧（reactive oxygen species,ROS）是外源性氧化剂或细胞内有氧代谢过程中产生的具有很高生物活性的氧分子，很容易与生物大分子反应，可直接损害或者通过一系列过氧化链式反应引起广泛生物结构的破坏有实验证实，在特定条件下低水平的氧自由基能诱导细胞凋亡，而不是导致细胞坏死第22页/共69页（4）细胞色素C与细胞凋亡细胞色素C（Cyt C）从细胞线粒体转移到胞浆，被认为是各种细胞死亡模型如以Fas、紫外线（UV）、叉孢素（staurosporin,SSP）或鬼臼乙叉干（VP16）处理和诱导细胞凋亡机制中的重要环节一旦胞质中出现Cyt C，其可与细胞浆中的其他成分相互作用，激活caspases，诱导细胞凋亡的发生如染色质浓缩和核碎裂。这一过程可被Bcl-2过表达抑制第23页/共69页（5）线粒体与细胞凋亡线粒体内膜通透性转变既是细胞凋亡的必须条件，也是它的充足条件PT孔道打开后导致线粒体许多功能的致命性变化从而启动了死亡途径PT孔道作为许多生理效应的感受器，整合了电生理、氧化还原与细胞代谢状态的信息PT孔道的组成成分ADP-ATP在提示能量代谢的重要分子，其表达有严格的组织专一性PT孔道的作用有自放大效应第24页/共69页The Molecular Mechanisms Of Apoptosis细胞凋亡的分子机制细胞凋亡的分子机制Zhao Wang（M.D./Pharm.D.）第25页/共69页第五讲第五讲 细胞凋亡与免细胞凋亡与免疫疫第26页/共69页Apoptosisintheimmunesystem1.Lifeanddeathintheimmunesystem第27页/共69页Apoptosis in the immune system2.TheCD95-CD95Ldeathsystem CD95isoneofdeathreceptors;CD95-mediated apoptosis is triggered by itsnaturalligand,CD95L;CD95L isseenonkillercell-derivedvesicles,butcanalsobecleavedfromthemembranebyametallo-protease第28页/共69页ApoptosisintheimmunesystemCD95death-inducingsignallingcomplex第29页/共69页Apoptosisintheimmunesystem3.TwodifferentpathwaysdownstreamofCD95第30页/共69页Apoptosis in the immune system4.T-lymphocytedeathinthethymus the negative selection might involve the CD-95 system when Tcellsencounterhighantigenconcentrations NumerousdatasuggestthatmembersoftheBcl-2familyinfluencesurvivalofimmatureTlymphocytes,thatis,positiveselection,butnotnegativeselection第31页/共69页Apoptosis in the immune system5.DeletionofperipheralTcellsbyapoptosisThecourseofaT-cellimmuneresponseandtheapoptosisphenotypeoftheT-cells.第32页/共69页Apoptosis in the immune system1）an IL-2-dependent clonal expansion andeffectorphaseafterchallengewithantigen.2）adownphaseinwhichmostantigen-specificTcellsareeventuallyeliminated.3）aphaseinwhichcertainTcellsthatsurvivethedownphaseenterthememoryT-cellpool.第33页/共69页 Apoptosis in the immune system6.Co-stimulationandT-cellsurvival CD28isamajorco-stimulatingco-receptorexpressedonTcells;CD28 isstimulatedbyCD80andCD86expressedonAPCsandfunctionstoincreasecytokineproductionandcytokinereceptorinductionforsavingTcellsfromAICD.第34页/共69页Apoptosis in the immune system7.B-lymphocytedeath B-cell receptor(BCR)activation inducesapoptosisbythemitochondrialpathway；As in T cells co-stimulated by CD28,BCR-activatedBcellscanberescuedfromapoptosisbyco-stimulationbywayofCD40thathasbeenactivated by CD40L expressed on T cells andmacrophages；第35页/共69页Apoptosis in the immune system8.Thereceptor-ligandsystemsa、CD95-CD95LsystemBcellsgenerallydonotexpressCD95L;TcellskillCD95-positiveBcells;b、Blys,APRIL/TACI,BCMAsystemBlys,APRILbindingtoTACI,BCMAupregulateNF-B,B-cellproliferationandimmunoglobulinproduction.第36页/共69页Apoptosis in the immune system9.APCs,TcellsandBcells activated APCs synthesize CD95L,TRAIL,TNFandotherfactorsthatmodulatetheactivityandfunctionofTcells；In turn,activated T cells influence APCfunction and thereby affect the course of theimmuneresponse；theCD40-CD40LsystemallowsthesurvivalofAPCs and the CD95-CD95L system inducestheirdeath；第37页/共69页Apoptosis in the immune system10.AnotherdeathreceptorTNF-a第38页/共69页Diseases of the immune systemGeneticdefectsintheCD95-CD95Lsystem；Apoptosisandlymphoidtumors；Tumorsdevelopmultiplemechanismstoevadeeliminationbytheimmunesystem；CD95Lmightbeexploitedintryingtodelaytherejectionofallografts；第39页/共69页Diseases of the immune system3.ApoptosisinAIDS AIDS,characterizedbyadepletionofCD4+Thelper cells,is a disease with too muchapoptosis；Theregulatoryviralgeneproducts（forexample,HIV-1Tat）;a novel and rapid type of apoptosis by CD4andCXCR4第40页/共69页Diseases of the immune systemHIV-1NefinhibitsASK1-dependentdeathsignalling providing a potential mechanism forprotectingtheinfectedhostcell.第41页/共69页The Molecular Mechanisms Of Apoptosis细胞凋亡的分子机制细胞凋亡的分子机制Zhao Wang（M.D./Pharm.D.）第42页/共69页第六讲第六讲 细胞凋亡与神经系细胞凋亡与神经系统统第43页/共69页Apoptosis in the nervous system1、Theneurotrophinhypothesis immature neurons compete for target-derivedtrophicfactorsthatareinlimitedsupply.only those neurons that are successful inestablishing correct synaptic connectionswould obtain trophic factor support to allowtheirsurvival.neuronal survival requires a positive survivalsignal.第44页/共69页Apoptosis in the nervous system2.KeymoleculesinneuronalapoptosisNeurons share the same basic apoptosisprogrammewithallothercelltypes.A、TheroleoftheBcl-2familyinneuronalcelldeath;B、Apaf-1 and caspases in neuronal celldeath;第45页/共69页Neurotrophins generally activateandligatetheTrkreceptors（TrkA,TrkB and TrkC）,whichare cell-surface receptors withintrinsictyrosinekinaseactivityApoptosis in the nervous system3、Neurotrophins:amatteroflifeanddeath第46页/共69页Apoptosis in the nervous system4、PI(3)K-AKTpathwayandMAPKpathway第47页/共69页Theactivationofc-JunandDP95synthesisApoptosis in the nervous system5、Dyingwithoutneurotrophins第48页/共69页Apoptosis in the nervous system6、Neurotrophins:adouble-edgedswordthe interaction of neurotrophins with theneurotrophinreceptorp75NTRcaninducecelldeathundercertainconditions.第49页/共69页The Molecular Mechanisms Of Apoptosis细胞凋亡的分子机制细胞凋亡的分子机制Zhao Wang（M.D./Pharm.D.）第50页/共69页1、凋亡与疾病的发生凋亡与疾病的发生2 2、凋亡与疾病的治疗、凋亡与疾病的治疗第七讲第七讲 细胞凋亡与疾病细胞凋亡与疾病第51页/共69页(一一)凋亡与疾病的发生凋亡与疾病的发生1细胞凋亡与自身免疫病（1）机制1）自身反应性免疫细胞凋亡受阻 *MRL/Lpr鼠Fas *C3H/gld鼠FasL 基因插入突变 基因点突变 Fas蛋白低表达 FasL分子结构异常 自身反应性T细胞逃避阴性选择第52页/共69页2）凋亡促使产生致病性自身抗原（具潜在免疫原性的细胞组分聚集）异常自身免疫应答3）微环境异常Th1/Th2凋亡失衡 Th1/Th2细胞偏移AID4）自身Ab进入体细胞结合相应靶Ag 干扰细胞正常功能体细胞凋亡第53页/共69页5）基因缺陷或环境因子DNA甲基化*阻止细胞对致凋亡信号的反应性自身反应性T/B细胞产生和寿命*含低甲基化DNA的核小体释放刺激自身反应性B细胞产生自身Ab6)器官特异性AID靶细胞高表达Fas*致病因子 局部（细胞、甲状腺上皮细胞）炎症 高表达Fas CTL通过Fas/FasL杀伤之 第54页/共69页（2）举例A类风湿关节炎1）病理改变病变关节滑膜细胞凋亡障碍细胞增生2）机制*关节液中IL-1和TGF-1滑膜细胞Fas表达*关节液中sFas表达抑制Fas/FasL途径*滑膜细胞Bcl-2、Bcl-XL表达细胞凋亡域值*关节滑液中单个核细胞FasL*关节滑液T细胞对凋亡产生抗性 （TCR的CDR3缺乏数个保守的aa序列）第55页/共69页3）诱导凋亡治疗类风湿关节炎*FasL的重组载体转染关节组织；*应用抗Fas抗体促使Fas交联。第56页/共69页BSLE1）Fas系统功能紊乱*T/B细胞Fas表达；*T/B细胞Fas的DD突变；*sFas分泌；*FasL分子结构异常；2）T/B细胞DNA甲基化凋亡受阻低甲基化DNA诱生自身抗体3）组织细胞凋亡释放大量核小体诱导抗核抗体产生 第57页/共69页2细胞凋亡与病毒感染（1）细胞凋亡与宿主抗病毒免疫机制*抗病毒应答病毒感染细胞凋亡清除入侵的病毒*病毒感染激活免疫细胞产生TNF、p53蛋白 病毒感染细胞凋亡*病毒感染 宿主细胞信号传递系统紊乱 感染细胞凋亡*CTL识别病毒感染细胞介导靶细胞凋亡导。第58页/共69页（2）举例1）细胞凋亡与AIDS*HIV gp120与靶细胞CD4分子结合 激活钙通道胞内Ca2+浓度增高*gp160靶细胞表面CD4分子交联HIV感染的T细胞Fas表达增加*AIDS患者体内II型CK升高提高Th1对凋亡敏感性*HIV感染CD8+T细胞慢性激活发生凋亡 第59页/共69页2）细胞凋亡与病毒性肝炎 *HCV感染肝细胞 病毒刺激CTL 高表达Fas 高表达FasL CTL导致大量肝细胞凋亡 暴发性肝功能衰竭 *HBV、HCV感染 刺激免疫细胞产生TNF-肝细胞凋亡或坏死第60页/共69页3细胞凋亡与肿瘤的发生*bcl-2过度表达细胞生理性死亡减少肿瘤发生*恶性实体瘤细胞Fas表达明显 FasL表达明显*造血系统肿瘤中可溶性Fas水平增高 与膜表面Fas竞争性结合FasL*Rb和p53基因功能缺陷细胞周期和凋亡失调 细胞无限制生长和恶变第61页/共69页 Rb功能正常 Rb功能缺陷 p53不必显示其功能 p53被激活 诱发凋亡 防止细胞恶变*经典多药耐药基因（MDR）表达药物代谢加快、靶细胞改变 瘤细胞DNA受损得以修复抗药*凋亡相关基因突变加速肿瘤进展、降低抗瘤疗效4凋亡与移植（1）免疫赦免区组织高表达FasL;（2）Fas/FasL途径参与移植排斥；第62页/共69页（二）凋亡与疾病的治疗（二）凋亡与疾病的治疗1调节Cas活性*转染活化Cas基因治疗AML等肿瘤*选择性Cas（尤其Cas3）抑制剂神经退行性变化第63页/共69页2细胞因子调控凋亡（1）调控PMN凋亡控制炎症损伤或炎症消长*TNF-促进PMN凋亡*GM-CSF、IL-2、IL-6、IFN-抑制PMN凋亡（2）调控Th细胞偏移*IL-12、IL-2防止Th1细胞凋亡治疗AISD、肿瘤（3）细胞因子拮抗*拮抗IL-4等肺部Eos凋亡防治支气管哮喘第64页/共69页3转染TRAIL用于肿瘤治疗*TRAIL途径选择性诱导肿瘤细胞凋亡（肿瘤细胞表达DR4/5，不表达TRID）*正常细胞表达TRID对TRAIL不敏感 4自杀基因治疗中的旁观者效应*转染自杀基因（suicide gene）转染细胞死亡 旁邻未转染细胞被杀伤*机制旁邻细胞摄取凋亡小体；肿瘤细胞凋亡局部抗瘤免疫效应 第65页/共69页5调控凋亡相关基因表达（1）调控Fas/FasL表达*Cys、FK506FasL转录移植物细胞凋亡*sFas、抗Fas抗体、反义核酸*转染Fas基因（2）转染bcl-2、P53抗瘤 第66页/共69页6诱导分化剂（维A酸、As2O3）诱导凋亡或部分分化后凋亡治疗肿瘤（白血病等）7激素撤退性激素敏感肿瘤凋亡*切除睾丸/给予雌激素前列腺癌*切除卵巢/拮抗雌激素乳腺癌 第67页/共69页8Wee转基因疗法（1）Wee的生物学作用*参与调控细胞周期使细胞停留于G2期 有利于DNA受损细胞的修复*参与颗粒酶所致受损DNA的修复过程 阻断致凋亡因子导致的靶细胞凋亡（2）Wee转基因疗法应用实例*转染胰岛细胞修复颗粒酶所致DNA损伤 阻断CTL所致胰岛细胞凋亡防治型糖尿病（及其他CTL所致器官特异性AID）9化疗、放疗诱导肿瘤细胞凋亡 第68页/共69页感谢您的观看！第69页/共69页
