ly基因工程练习.pptx

2在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是 A用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C将重组DNA分子导入烟草原生质体 D用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞A第1页/共14页3（8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：（1）一个图1所示的质粒分子经Sma切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。0、2第2页/共14页（2）若对图中质粒进行改造，插入的Sma酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna 切割，原因是 。（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH 和Hind 两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。Sma会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 高 质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 第3页/共14页（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。DNA连接 鉴别和筛选含有目的基因的细胞 蔗糖为唯一含碳营养物质 第4页/共14页4、将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。第5页/共14页请根据以上图表回答下列问题。（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是 。（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？。耐高温 引物对B 第6页/共14页（3）图1步骤所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？。（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤转基因所用的细菌B通常为 。否 农杆菌 第7页/共14页（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。采用EcoR和Pst酶切，得到_种DNA片断。采用EcoR和Sma酶切，得到_种DNA片断。2 1 第8页/共14页5 5上图是将人的生长激素基因导入细菌B B细胞内，产生“工程菌”的示意图。所用的载体为质粒A A。若已知细菌B B细胞内不含质粒A A，也不含质粒A A上的基因，质粒A A导入细菌后，其上的基因能得到表达。能表明目的基因已与运载体结合，并被导入受体细胞的结果是A A在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上均能生长繁殖的细胞B B在含氨苄青霉素的培养基细菌和含四环素的培养基都不能生长繁殖的细菌C C在含氨苄青霉素的培养基上能生长繁殖，但在含四环素的培育基不能生长繁殖的细菌D D在含氨苄青霉素的培养基上不能生长繁殖，但在含四环素的培育基能生长繁殖的细菌C第9页/共14页7 7、应用基因工程技术诊断疾病的过程、应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指疾病的目的。这里的基因探针是指（）A.A.用于检测疾病的医疗器械用于检测疾病的医疗器械B.B.用放射性同位素或荧光分子等标记的用放射性同位素或荧光分子等标记的DNADNA分子分子C.C.合成合成球蛋白的球蛋白的DNADNAD.D.合成苯丙氨酸羟化酶的合成苯丙氨酸羟化酶的DNADNA片段片段B第10页/共14页8、2003年，我国科学工作者用基因工程迅速研制出“非典”诊断盒。其作用及机理的叙述正确的是（）A治疗“非典”，利用的是抗原抗体反应 B诊断“非典”，利用的是DNA分子杂交原理C诊断“非典”，利用的是抗原抗体反应 D治疗“非典”，利用的是DNA分子杂交原理B第11页/共14页4 4、【生物现代生物技术专题】、【生物现代生物技术专题】为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。新品系。（1 1）获得耐盐基因后，构建重组）获得耐盐基因后，构建重组DNADNA分子所用的限制性内切酶分子所用的限制性内切酶作用于图中的作用于图中的 处，处，DNADNA连接酶作用于连接酶作用于 处。（填处。（填“a”a”或或“b”b”）第12页/共14页（2 2）将重组将重组DNADNA分子导入水稻分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和化法和 法。法。（3 3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术。该技术的核心是技术。该技术的核心是 。（4 4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的素标记的 作探针进行分子杂交检测，作探针进行分子杂交检测，又要用又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。基因枪法（花粉管通道法）基因枪法（花粉管通道法）植物组织培养脱分化和再分化脱分化和再分化耐盐基因耐盐基因一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）第13页/共14页感谢您的观看！第14页/共14页