高三生物一轮复习专题二微生物的培养与应用知识清单.docx

专题二微生物的培养与应用1.实验室培养微生物需要解决哪两方面的问题?液体培养基和固体培养基的作用分别是什么?培养基中应具备哪些营养物质? 实验室培养微生物要解决两方面问题:(1)需要为培养的微生物提供合适的营养和环境条件；(2)防止外来杂菌的入侵。液体培养基的作用:广泛应用于实验研究及大规模工业生产中，有利于广泛获得大量菌体或代谢产物。固体培养基的作用:广泛应用于微生物的分离培养、菌种鉴定和保藏。培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。2.霉菌和细菌适宜的pH分别是什么?消毒和灭菌的区别是什么?培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性；培养细菌时需将pH调至中性或微碱性。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。3.消毒和灭菌方法分别有哪些?适用范围分别是什么?实验室中常用的消毒方法:巴氏消毒法(如牛奶)、化学药制进行消毒(如酒精擦拭双手、氧气消毒水源)、实验室还用紫外线或化学药物消毒(如接种室、接种箱或超净工作台)、煮沸消毒法。 实验室中常用的灭菌方法: 灼烧灭菌(如接种环、接种针、或其他金属用具)、干热灭菌(如玻璃器皿、吸管、培养皿和金属用具)、高压蒸汽天菌(培养基)。4.配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是?什么时候调节叫值?平板为什么要倒置?配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤:计算一称量+溶化灭菌倒平板。调pH值应该在溶化后，灭菌前。平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠。将平板倒置，可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。5.平板划线法的操作过程是什么?平板划线法的操作流程:(1)将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红；(2)在火焰旁冷却接种环，并打开盛有菌液的试管的棉塞；(3)将试管口通过火焰；(4)将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液；(5)将试管口通过火焰，并塞上棉塞；(6)左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基；(7)灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线(原因:将聚集的菌体逐步稀释便于获得单个菌落)。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区的相连。6.一般什么时候用平板划线法?什么时候用稀释涂布平板法?菌种该如何保存?一般需要观察菌落特征时用平板划线法。一般需要对活菌计数时用稀释涂布平板法。菌种临时保藏的方法:将菌种接种到试管的固体斜面培养基上(4的冰箱中保藏) (缺点: 保存时间不长，菌种容易被污文成产生变异) 菌种长期保存的方法:甘油管藏法(-20的冷冻箱中保存)7. 土壤中能分离出能分解尿素的细菌的原理是什么? -般来说到哪里去寻找目的菌株?又如何筛选目的菌株?原理:土壤中能分解尿素的细菌能合成脲酶，将尿素分解成氨。氨使培养基碱性增强，遇酚红指示剂变红。一般来说，在寻找目的菌株时， 要根据它对生存环境的要大，到相应的环境中去寻找。筛选方法:人为提供有利于目的菌生长的条件包括营养、温度、pH等，同时抑制或阻止其他微生物生长。8.选择培养基和鉴别培养基的区别是什么?选择培养基:加入或不加入某种试剂(或营养物质)，允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。鉴别培养基:加入某种试剂，出现不同颜色或特征的菌落，如伊红美蓝培养基，大肠杆菌菌落呈现黑色。主要用于分离并区分不同的微生物。9.统计菌落数时一般选数目为多少的计数?统计的菌落数往往比实际菌落数低还是高?为什么?测定微生物数量的常用方法有哪两种?统计菌落数时一般选择菌落数目在30300的平板进行计数;统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。常用测定微生物数量的方法:活菌计数法（稀释涂布平板法）、显微镜直接计数法(即用血细胞计数板，死菌活菌都计数在内，计数值比实际值高)。10.设置对照的目的是什么?要证明培养基是否被污集说么对照?要证明配制的培养基是否有选择作用又该设置什么对照?设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素（或无关变量）对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。要证明培养基是否被污染，将未接种的空白培养基在相同实验条件下培养，观察是否有菌落生长。要证明培养基是否具有选择作用，在牛肉青蛋白陈培养基上接种与选择培养基等量的同种微生物。11.细菌的稀释度一般为多少? 放线菌、真菌的稀释度呢?菌落有哪些特征?细菌的稀释度一般选用104、105、106倍。放线菌的稀释度一般选用103、104、105倍。真菌的稀释度一般选用102、103、104倍。菌落的特征有菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面。11. 鉴定尿素分解菌用什么指示剂?原理是什么?大肠杆菌用什么指示剂，菌落呈什么颜色?鉴定尿素分解菌用酚红指示剂，原理是细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，指示剂将变红。鉴定大肠杆菌用伊红美蓝指示剂，菌落呈现黑色。12. 筛选纤维素分解菌用什么?现象是什么?鉴定纤维素分解菌用刚果红染料。培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。13. 纤维素酶有哪些?纤维素被分解经历了哪些步骤?纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。15.用液体培养基选择培养微生物的作用是什么?要确定得到的是纤维素分解菌还需要进行什么实验?用液体培养基选择培养微生物可以增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。要确定得到的是纤维素分解菌需要进行发酵产纤维素酶的实验。学科网（北京）股份有限公司