土壤硝态氮的测定.pdf
土壤硝态氮的测定 A 紫外分光光度法 1、方法提要 土壤浸出液中的 NO3-,在紫外分光光度计波长 210nm 处有较高吸光度,而浸出液中的其它物质,除 OH-、CO32-、HCO3-、NO2-和有机质等外,吸光度均很小;将浸出液加酸中和酸化,即可消除 OH-、CO32-、HCO3-的干扰;NO2-一般含量极少,也很容易消除;因此,用校正因数法消除有机质的干扰后,即可用紫外分光光度法直接测定 NO3-的含量;待测液酸化后,分别在210nm和275nm处测定吸光度;A210是NO3-和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度,因为NO3-在 275nm 处已无吸收;但有机质在 275nm 处的吸光度比在 210nm处的吸光度要小R倍,故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后,从 A210中减去,即得 NO3-在 210nm 处的吸光度A;2、适用范围 本方法适用于各类土壤硝态氮含量的测定;3、主要仪器设备 紫外可见分光光度计；石英比色皿；往复式或旋转式振荡机,满足 180r/min20r/min 的振荡频率或达到相同效果；塑料瓶：200mL;4、试剂 溶液 1：9：取 10mL 浓硫酸缓缓加入 90mL 水中;氯化钙浸提剂 cCaCl2=L-1：称取 2.2g 氯化钙 CaCl26H2O,化学纯溶于水中,稀释至 1L;硝态氮标准贮备液N=100mgL-1：准确称取 0.7217g 经105110烘 2h 的硝酸钾 KNO3,优级纯溶于水,定容至 1L,存放于冰箱中;硝态氮标准溶液N=10mgL-1：测定当天吸到硝态氮标准贮备液于 100mL 容量瓶中用水定容;5、操作步骤 称取 10.00g 土壤样品放入 200mL 塑料瓶中,加入 50mL 氯化钙浸 提 剂,盖 严 瓶 盖,摇 匀,在 振 荡 机 上 于 20 25 振 荡30min180r/min20r/min,干过滤;吸取待测液于 50mL 三角瓶中,加：9 H2SO4溶液酸化,摇匀;用滴管将此液装入 1cm 光径的石英比色槽中,分别在 210nm 和 275nm 处测读吸光值A210和A275,以酸化的浸提剂调节仪器零点;以NO3-的吸光值A 通过标准曲线求得测定液中硝态氮含量;空白测定除不加试样外,其余均同样品测定;NO3-的吸光值A 可由下式求得：A=A210-A275R 式中 R 为校正因数,是土壤浸出液中杂质主要是有机质在210nm 和 275nm 处的吸光度的比值;其确定方法为：A210是波长 210nm 处浸出液中 NO3-的吸收值 A210 硝与杂质主要是有机质的吸收值A210 杂的总和,即A210=A210 硝+A210 杂,得出A210 杂=A210-A210硝;选取部分土样用酚二磺酸法测得 NO3-N 的含量后,根据土液比和紫外法的工作曲线,即可计算各浸出液应有的 A210 硝值,即可得出A210 杂;A275是浸出液中杂质主要是有机质在275nm处的吸收值因为NO3-在该波长处已无吸收,它比 A210 杂小 R 倍,即 A210 杂=R A275,得出校正因数 R=A210 杂/A275;各不同区域可根据多个土壤测定 R 值的统计平均值,作为其他土壤测试 NO3-N 的校正因数,其可靠性依从于被测土壤的多少,测定的土壤越多,可靠性越大;标准曲线的绘制：分别吸取 10mg L-1NO3-N 标准溶液 0、,用氯化钙浸提剂定容至 50mL,即为 0、L 的标准系列溶液;各取于 50mL 三角瓶中,分别加 1mL1：9 H2SO4溶液摇匀后测 A210,计算 A210对 NO3-N 浓度的回归方程,或者绘制工作曲线;6、计算结果 土壤硝态氮,mgkg-1=()N V Dm 式中：N查标准曲线或求回归方程而得测定液中 NO3-N的质量浓度,mgL-1；V浸提剂体积,mL50mL；D浸出液稀释倍数,或不稀释则 D=1；m土壤质量,g;7、注释 土壤硝态氮含量一般用新鲜样品测定,如需以硝态氮加铵态氮反映无机氮含量,则可用风干样品测定;一般土壤中 NO2-含量很低,不会干扰 NO3-的测定;如果 NO2-含量高时,可用氨基磺酸消除HNO2+NH2SO3H=N2+H2SO4+H2O,它在210nm处无吸收,不干扰 NO3-测定;浸出液的盐浓度较高,操作时最好用滴管吸取注入槽中,尽量避免溶液溢出槽外,污染槽外壁,影响其透光性;大批样品测定时,可先测完各液包括浸出液和标准系列溶液的 A210值,再测 A275值,以避免逐次改变波长所产生的仪器误差;如需同时测定土壤 NH4+N,可选用 2 molL-1KCl 或 1 molL-1NaCl 溶液制备待测液;但 2 molL-1KCl 溶液本身在 210nm处吸光度较高,因此同时测定土壤NH4+N和NO3-N时,可选用吸光度较小的 1 molL-1NaCl 溶液为浸提剂;如果吸光度很高 A1 时,可从比色槽中吸出一半待测液,再加一半水稀释,重新测读吸光度,如此稀释直至吸光度小于;再按稀释倍数,用氯化钙浸提剂将浸出液准确稀释测定;根据北京和河北石灰性 15 个土壤样品的测定结果,校正因素R的平均值为,不同土类的R值略有差异,各地可根据主要土壤情况进行校验,求出当地土壤的 R 值;
