肌萎缩病 [脐血源神经干细胞治疗肌萎缩侧索硬化的免疫学改变及安全性评价] .docx

肌萎缩病 脐血源神经干细胞治疗肌萎缩侧索硬化的免疫学改变及安全性评价 摘要：目的评价脐血源神经干细胞治疗肌萎缩侧索硬化症的疗效及平安性。方法对肌萎缩侧索硬化病人治疗前后进行血液肝肾功能、电解质、血清酶学、血糖、血脂、细胞及体液免疫测定，进行Norris评分，视察症状体征变更。结果病人自身前后比较的结果显示，经治疗后血白细胞、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、T细胞、Th细胞、IgG以及Norris评分与治疗前比较，差异具有统计学意义(P0.05)。病人近期的病情有显著改善。结论脐血源神经干细胞移植后在近期内各项试验室化验结果显示，干细胞具有高平安性，有较明显的临床效果，但有待接着视察和随访。 关键词：神经干细胞；肌萎缩侧索硬化症；细胞免疫；体液免疫 中图分类号：R746文献标识码：A文章编号：16721349(2007)10091103 肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis，ALS)是神经系统疑难病。它至今病因不明，发病好像逐年上升，而且致死、致残率高，从发病到死亡，带病生存的长则(68)年，短则数月。由于该病病初确诊困难，及至确诊时已经形成多灶性损害。尽管关于病因的学说较多，但是迄今为止，还未发觉特效的治疗方法，亦没有产生显著疗效的药物。神经干细胞的问世，为该病的治疗带来一线光明，多家均有报道。我院对于22例已经确诊的ALS病人运用脐血源神经干细胞治疗，取得了肯定的近期临床效果，同时对于接受该疗法的大部分病人进行了将近1年的随访，现将，临床探讨的近期评分及平安性评价结果报道如下，为进一步探讨该病供应参考依据。 1资料与方法 11一般资料 2005年11月2007年4月在我院治疗的22例病人，男15例，女7例；病程6个月至8年(2.08年±1.65年)；年龄38岁70岁(53.58岁±10.94岁)；其中外国籍19例，中国籍3例。职业有商人、海员、工程师、工人、公司职员、干部等。全部病人均在所在国确诊为ALS。到达我院后，再依据中华医学会神经科专业委员会2000年制定的ALS标准复核无误。 12方法 22例ALS病人均常规进行血液HIVDNA抗体、梅毒抗体、肝炎标记物(甲乙丙丁戊IgM抗体)、Torch 5项以及头颈磁共振成像(MRI)检查。 采纳病人自身前后比照的方式视察干细胞治疗期间各项指标的改变。干细胞治疗前及结束后测定血液免疫球蛋白(IgA，IgG，IgM)、补体C3、C4、T细胞亚群、肝肾功能、血脂、血糖、电解质、血清酶学(方法均按试剂盒要求进行)、血尿常规，对病人肢体功能及生活实力采纳Norris量表进行评定。 干细胞来自健康分娩孕妇的脐带血(检测HIV、梅毒抗体、肝炎标记物5项、Todch5项等)，经由深圳市北科细胞工程探讨所进行分别、提取、培育、扩增及向神经干细胞诱导传代(46)代。每份细胞数量约1.5×107/mL3.0×107/mL，其中约80间质干细胞，20神经前体细胞。每次移植前由病人签署干细胞治疗知情同意书。通过腰椎穿刺脊髓蛛网膜下腔或静脉途径植入干细胞。每人接受(46)次治疗，每次间隔1周。 干细胞移植治疗后的次日起静脉赐予神经生长因子9000AU诱导干细胞向神经干细胞转化，连用3d。 每位病人治疗期间均依据责任肌肉及关节、脑神经损伤的程度，接受平衡、关节活动度训练及针刺(依据取穴原则远近结合，6穴8穴，平补平泻)治疗。 13统计学处理 计量资料以均数±标准差(x±s)表示，在SPSS 11.5软件包进行分析。 2结 果 22例ALS病人治疗前的HIVDNA抗体、梅毒抗体、肝炎标记物、Torch 5项检查均正常。按类型分别统计相关指标。 21治疗前后部分血常规指标改变状况 白细胞总数及血小板治疗后均较治疗前高，差异有统计学意义(P0.05)，但均在正常范围。其余指标治疗前后比较差异均无统计学意义(P0.05)。详见表1。 22治疗前后肝功能及部分酶学指标变更状况 治疗后血清酶学普遍下降。其中谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)与治疗前比较，差异有统计学意义(P0.05)。其余指标治疗前后比较，差异均无统计学意义(P0.05)。详见表2。 23治疗前后肾功能与电解质变更状况(见表3) 24治疗前后T细胞亚群和体液免疫指标变更状况 治疗后与治疗前比较，总T细胞、Th细胞、IgG测值均较前下降，差异有统计学意义(P0.05)；Ts细胞上升，其他改变不大，差异无统计学意义(P0.05)。详见表4。 25治疗前后血脂、血糖变更状况(见表5) 3讨 论 ALS是神经系统疑难病，目前无特效治疗方法，被认为是神经系统的“癌症”。关于其病因探讨及治疗方法已有另文报道。既往关于神经干细胞治疗的探讨已见诸于专业期刊。但实行的是胚胎嗅鞘细胞及自体骨髓干细胞，未见神经干细胞应用后全面的肝肾功能、电解质、血常规、免疫指标的平安性评价，疗效反映的是干细胞治疗后的近期效果或者个案报道。本探讨中涉及了多方面的指标，对于ALS常规检查不能反映其疾病的病因，MRI仅仅表现大部分病人伴有颈椎间盘突出，不表现其有椎间盘突出症。EMG也只反映其损害为神经源性，详细的病因不清晰，目前没有针对病因的治疗，现有的治疗方法，远期效果均不好，对该病的诊断治疗，神经科医生遭受很大挑战。 接受神经干细胞治疗的病人，停用目前常用的药物如力鲁唑及其他药物。上述检验结果中血常规的白细胞及血小板治疗后均上升，差异有统计学意义(P0.05)，但是仍在正常值范围。其上升的缘由，可能是干细胞治疗同时，成人均赐予静脉推注10 mg地塞米松防止变态反应，疗程结束后，一般次日早晨抽血，反映白细胞上升，病人没有感染，无发热，最清晰的缘由。可能是激素刺激引起，一般在3 d后下降。 谷草转氨酶、肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶治疗后比治疗前下降，且有统计学意义(P0.05)。这反映了在ALS的进展期，受已损伤脊髓前角运动神经元的影响，骨骼肌失神经，呈现节段性或部分萎缩，肌细胞发生炎性变更，出现部分病人的上述指标上升，有的人肌酸磷酸激酶测值高出正常(34)倍，统计学离散度很大，但治疗后均降至正常。表明神经干细胞不仅可以促进运动神经元的修复，而且对受累肌肉病变后释放的酶有降解作用。而肝肾功能、电解质这些主要指标均稳定，差异无统计学意义(P0.05)。血糖治疗前后均值都在异样范围，治疗后上升，差异无统计学意义(P0.05)。但血糖上升可能的缘由仍旧是与单次运用皮质激素有关。 细胞和体液免疫的水平反映体内的免疫系统功能。干细胞治疗后，有总T细胞、Th细胞、IgC测值下降，差异有统计学意义(P0.05)，尽管总体在正常范围内，这种治疗后测值的下降是否因应用糖皮质激素引起，须要今后设立部分组别，在最终一次干细胞治疗后不用皮质激素，采血后化验比较再行分析。 临床上运用干细胞治疗后，部分病人在个别治疗时间后出现低或中等发热，或腰痛，或头痛，分析缘由可能是治疗后轻度的排斥反应，或穿刺后的脊膜刺激症，或低颅压综合征，经对症处理在(23)d内可完全复原正常。 关于附加平衡及关节活动度，针刺治疗是否喧宾夺主，或者本身反映了康复理疗对评价病人疗效的影响。因此，认为加入上述疗法，仅仅是希望病人削减因制动或少动导致关节僵硬、肌肉废用性萎缩。事实上许多病人接受干细胞治疗前，已经在服药或者接受康复理疗，但近期的效果并无质的变更。干细胞治疗加康复理疗的模式，事实上为神经科疑难疾病的治疗开拓了新途径。今后有可能设立比照分组进一步评价其效果。 Norris量表反映ALS和运动神经元病的语言、认知、职业实力、运动实力，共有33个问题，每项满分3分，最小0分。满分为97分。治疗后Norris评分上升，且差异有统计学意义(P0.05)。在无试验室评价标准体系的前提下，量表反映的结果比较客观，国外病人的病情改变也可依据该项国际公认的量表进行评价，对神经干细胞的远期疗效动态监测。 总之，该项探讨客观反映了脐血源神经干细胞治疗ALS后各项重要指标的改变。初步表明，脐血源神经干细胞临床应用是平安的，对ALS的近期运动实力、肌颤有改善作用。但是，终归ALS是神经系统疑难病，病因不清，致病因子接着攻击神经元，致使干细胞治疗的远期效果不如脊髓损伤等病。表明干细胞仅可针对损伤本身进行修复，并不能遏制病情恶化。干细胞近期的疗效可能与其早期分泌的细胞因子或其他物质有关，远期的疗效才可能是干细胞建立的神经联系。经随访，干细胞治疗ALS后效果的维持约在(23)个月，此期过后，有病人重复运用仍旧有效。因此，要想运用干细胞治疗ALS，必需采纳短程冲击，隔段重复运用方能维持其效果，否则不能遏止其恶化。但最终还需阐明ALS的病因。研制新的药物，基因治疗或完善现时包括细胞疗法在内的各种治疗方法，才有望折服该病。 本文编辑郭怀印