血型的鉴定课件.ppt

检检 验验 科科血 型 的 鉴 定1ABO血型系统2ABOABO血型的鉴定血型的鉴定3Table of Contents内内 容容 大大 纲纲RHRH血型系统血型系统45RHRH血型的鉴定血型的鉴定常见疑难血型的鉴定常见疑难血型的鉴定血型鉴定在生活中的应血型鉴定在生活中的应用用6ABO血型系统血型系统O O型血型血 O O型血是人类最古老的血型型血是人类最古老的血型 出现于出现于4 4万万-6-6万年前万年前A A型血型血 A A型血产生于农耕时代型血产生于农耕时代 出现于出现于1.71.7万年万年-2.7-2.7万年万年前前B B型血型血 B B型血产生于游牧民族型血产生于游牧民族 出现于公元前出现于公元前1.71.7万万-1.2-1.2万年前万年前ABAB型血型血 AB AB型血型血 出现不到出现不到10001000年年血血型型传传说说不具有不具有AB凝凝集原集原同时具有同时具有AB凝集原凝集原只有只有B凝集原凝集原只有只有A凝集原凝集原凝集凝集原原B B型血A A型血ABO血型系统抗原血型系统抗原O O型血ABAB型血ABOABO血血型型系系统统是是根根据据红红细细胞胞表表面面所所含含的的凝凝集集原原不不同同而命名的。而命名的。凝集原：附着在红细胞表面的一种抗原。凝集原：附着在红细胞表面的一种抗原。ABO血型系统抗体血型系统抗体凝集素凝集素(抗体抗体)：存在于血清中，与其同名凝集原会发生抗：存在于血清中，与其同名凝集原会发生抗原抗体反应，导致原抗体反应，导致红细胞凝集红细胞凝集。人血清中含有两类凝集素：人血清中含有两类凝集素：即即抗抗A A和抗和抗B B。属于天然抗体，天然抗体多以。属于天然抗体，天然抗体多以IgMIgM型为主，不型为主，不能通过胎盘，而免疫性抗体多以能通过胎盘，而免疫性抗体多以IgGIgG型为主，能通过胎盘。型为主，能通过胎盘。凝集素凝集素对血液中红细胞的影响ABO血型系统血型系统抗抗A A凝集凝集素素抗抗B B凝集凝集素素同时含有同时含有抗抗A A和抗和抗B B凝集素凝集素不含有不含有抗抗A A和抗和抗B B凝集素凝集素B B血型血型的血的血清中清中A血型血型的血的血清中清中AB血血型的型的血清血清中中O血型血型的血的血清中清中ABO血型系统抗原血型系统抗原遗传遗传显性基因：控制显性性状的基因显性基因：控制显性性状的基因。隐性基因隐性基因：控制隐性：控制隐性性状的基因性状的基因。ABO 血型系统的基因位点在第血型系统的基因位点在第 9 对染色体上。人的对染色体上。人的 ABO 血型受血型受控于控于A、B、O三个基因。其中三个基因。其中A、B为显性基因，为显性基因，O为隐性基因。为隐性基因。ABAB型型ABO血型鉴定抗原血型鉴定抗原遗传遗传O O型型B B型型A A型型思思考考：A A、B B、ABAB以以及及O O型型血血的的基基因因型型分别是什么分别是什么?ABABBBBBAAAAAoAoBoBooooo遗传规律遗传规律ABO血型的鉴定血型的鉴定实验方法：实验方法：血凝试验血凝试验(玻片法、试管法、玻片法、试管法、全自动微板法全自动微板法)，微柱凝胶试验，流式，微柱凝胶试验，流式细胞技术，酶联免疫吸附试验。细胞技术，酶联免疫吸附试验。ABO血型的鉴定血型的鉴定实验原理：实验原理：血型抗原血型抗原与相应的抗体在反应介质中形成免疫复合物，与相应的抗体在反应介质中形成免疫复合物，出现肉眼可见的出现肉眼可见的凝集现象凝集现象。ABO血型的鉴定血型的鉴定实验用具：实验用具：载玻片载玻片 胶胶头滴管头滴管 棉签棉签 酒精酒精 抗抗A A、B B标准血清标准血清 一次性采血针一次性采血针 ABO血型的鉴定血型的鉴定准备载玻准备载玻片片1取取一一载载玻玻片片，左左右右两两侧侧分分别别标标记记字字母母ABAB。采血采血3采采血血针针轻轻刺刺手手指指尖尖，轻轻轻轻挤挤压压伤伤口口使使血血液液流流出出，分分别别滴滴在在载载玻片的两侧。玻片的两侧。消毒消毒常常规规消消毒毒，用用棉棉签签沾沾取取75%75%的的酒酒精精，对对采采血血部部位位进行消毒。进行消毒。2滴标准血滴标准血清清在在载载玻玻片片两两侧侧相相应应的的滴滴加加抗抗A(A(蓝蓝色色)和和抗抗B(B(橙橙色色)血血清清后后，用用棉棉签签棍棍将将两两侧侧血血液液与与血血清清混混匀匀，注注意意一一定定要要换换不不同同的的棉签棍。棉签棍。4混匀观察混匀观察5混混均均后后，静静置置 3-53-5分分 钟钟 后后，观察现象。观察现象。实验过程：实验过程：ABO血型的鉴定血型的鉴定实验结果：RH血型系统血型系统人类血型目前发现有人类血型目前发现有3030多种，除了多种，除了ABOABO血型系统外，还有血型系统外，还有RhRh血型系统等。血型系统等。RhRh血型系统根据有无血型系统根据有无D D抗原分为抗原分为RhRh阳阳性和性和RhRh阴性。阴性。RH血型系统抗原及抗体血型系统抗原及抗体RhRh血型系统抗原血型系统抗原RhRh血型系统能识别的抗原共血型系统能识别的抗原共4343种，常见的抗原有种，常见的抗原有五种，分别是五种，分别是D D、C C、E E、c c、e e。以。以D D抗原的抗抗原的抗原性最强，故常以其存在与否定为原性最强，故常以其存在与否定为RhRh阳性或阴性，阳性或阴性，即即凡含凡含D D抗原者为抗原者为RhRh阳性阳性，不含不含D D抗原者为抗原者为RhRh阴性阴性。RhRh血型系统抗体血型系统抗体天然天然RhRh抗体很少，绝大多数抗体很少，绝大多数RhRh抗体由输血或妊娠抗体由输血或妊娠刺激机体免疫系统产生的刺激机体免疫系统产生的IgGIgG型免疫性抗体。主型免疫性抗体。主要要RhRh血型系统抗体有抗血型系统抗体有抗D D、抗、抗E E、抗、抗C C、抗、抗c c、抗、抗e e五种，其中抗五种，其中抗D D最为常见。在盐水介质试验系统最为常见。在盐水介质试验系统中可检测出某些中可检测出某些RhRh抗体，表明这些抗体，表明这些RhRh抗体具有抗体具有IgMIgM的性质可能来自免疫反应抗体形成早期。的性质可能来自免疫反应抗体形成早期。Rh血型的鉴定方法及原理血型的鉴定方法及原理 酶介质法酶介质法 红细胞表面的唾液酸带负电荷，红细胞表面的唾液酸带负电荷，使用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面使用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面的唾液酸，降低红细胞表面的负电荷，的唾液酸，降低红细胞表面的负电荷，减少细胞间的排斥力，促进减少细胞间的排斥力，促进RhRh抗原与抗原与相应抗体间的结合从而产生红细胞凝相应抗体间的结合从而产生红细胞凝集。集。聚聚凝凝胺试验胺试验 聚聚凝凝胺是带高价阳离子的季铵盐，胺是带高价阳离子的季铵盐，溶解后产生的正电荷中和红细胞表面溶解后产生的正电荷中和红细胞表面的负电荷，减少细胞间的排斥力，有的负电荷，减少细胞间的排斥力，有利于红细胞凝集。如果是由利于红细胞凝集。如果是由RhRh抗体致抗体致敏的红细胞产生的凝集，是特异的不敏的红细胞产生的凝集，是特异的不可逆凝集。非抗体致敏红细胞凝集则可逆凝集。非抗体致敏红细胞凝集则是可逆性凝集。是可逆性凝集。盐水介质抗盐水介质抗D D试验试验 采用免疫球蛋白变性剂处理人采用免疫球蛋白变性剂处理人源源IgGIgG类抗类抗D D血清，使小分子的血清，使小分子的IgGIgG抗体抗体分子增大成为具有大分子的分子增大成为具有大分子的“IgMIgM”的的性质，能在盐水介质中与相应红细胞性质，能在盐水介质中与相应红细胞发生凝集，可用于发生凝集，可用于RhRh血型的快速鉴定。血型的快速鉴定。Rh血型的鉴定方法及原理血型的鉴定方法及原理 抗球蛋白试验 又称又称CoombsCoombs试验，是检测红细试验，是检测红细胞上不完全抗体的经典方法。不胞上不完全抗体的经典方法。不完全抗体多与其相应的红细胞结完全抗体多与其相应的红细胞结合，在盐水介质中不出现凝集反合，在盐水介质中不出现凝集反应，应，CoombsCoombs试验利用抗球蛋白抗试验利用抗球蛋白抗体作为第体作为第2 2抗体，通过连接致敏红抗体，通过连接致敏红细胞表面的特异性细胞表面的特异性RhRh抗体，使致抗体，使致敏红细胞出现特异性凝集。敏红细胞出现特异性凝集。低离子强度试验低离子强度试验 红细胞外围的阴离子是红细红细胞外围的阴离子是红细胞的稳定因素之一，降低反应介胞的稳定因素之一，降低反应介质的离子强度可减少细胞外围的质的离子强度可减少细胞外围的阴离子，促进带正电荷的阴离子，促进带正电荷的IgGIgG型型RhRh抗体与红细胞结合发生凝集反应，抗体与红细胞结合发生凝集反应，从而增加红细胞的凝集强度。从而增加红细胞的凝集强度。常见疑难血型常见疑难血型定义：疑难血型是指一种血型难以鉴定或判定的现象。特点：正定型凝集弱于2+或反定型弱于1+（正常凝集3+4+）正反定性不一致干扰因素：生理因素(年龄、ABO亚型、先天无抗体、冷凝集素)临床治疗（大量输液、近期输过异性红细胞或血浆）实验技术原因（标本混淆、试剂质量问题、静脉输液处采样）分类：红细胞抗原减弱或丢失（ABO亚型、白血病、输异性血、急性大出血）红细胞额外反应（自身抗体、红细胞未洗涤、红细胞上粘附大量蛋白）混合凝集（近期输异性血、造血干细胞移植）血型定型减弱或无反应（年龄、先天性ABO抗体缺失）常见疑难血型的鉴定常见疑难血型的鉴定分析思路（三步法）分析思路（三步法）第一步第一步：排除人为因素或在技术上可能发生的操作失误；排除人为因素或在技术上可能发生的操作失误；重新采集血样，核对试剂、器材，规范地复检重新采集血样，核对试剂、器材，规范地复检ABOABO血型血型第二步第二步：了解临床资料，分析可能出现的原因；了解临床资料，分析可能出现的原因；第三步第三步：排除不可能的原因，归纳不能排除的原因，设：排除不可能的原因，归纳不能排除的原因，设计验证试验。计验证试验。举例说明举例说明红细胞抗原减弱或丢失红细胞抗原减弱或丢失(ABO(ABO亚型、正定型亚型、正定型ABOABO抗原减抗原减弱弱)红细胞额外反应（自身抗体）红细胞额外反应（自身抗体）常见疑难血型的鉴定常见疑难血型的鉴定ABOABO亚型亚型实验结果：正定型与反定型不一致、正定型被检红细胞凝集弱解决方法：加抗-AB、抗-H、抗Bc常见疑难血型的鉴定常见疑难血型的鉴定正定型AB抗原减弱实验结果：正定型与反定型不一致、正定型被检红细胞凝集弱、正定型呈mf样解决方法：加抗-AB常见疑难血型的鉴定常见疑难血型的鉴定自身抗体自身抗体实验结果：抗实验结果：抗-A+,-A+,抗抗-B+,Ac+,Bc+,Oc+,-B+,Ac+,Bc+,Oc+,直抗直抗+解决办法：解决办法：3737盐水洗涤红细胞至直抗阴性后鉴盐水洗涤红细胞至直抗阴性后鉴定血型。定血型。血型血型鉴鉴定定的应用的应用血型鉴定在生活中的应用血型鉴定在生活中的应用输血输血器官移器官移植植新生新生儿儿溶血溶血症症