易容容 开题报告.doc

毕业论文开题报告课题名称： 永州市本地银杏叶中银杏黄酮与银杏内酯的测定 学生姓名： 易容容 系 别： 生命科学与化学工程系 专 业： 制药工程 指导教师： 姜红宇 2014 年 02 月 27 日 湖南科技学院本科毕业论文（设计）开题报告书论文（设计）题目永州本地银杏叶中银杏黄酮与银杏内酯的测定作 者 姓 名易容容所属系、专业、年级生化系 制药工程 专业 2010 年级指导教师姓名、职称姜红宇 博士预计字数10000开题日期2014-2-27选题的根据：1）说明本选题的理论、实际意义2）综述国内外有关本选题的研究动态和自己的见解银杏（Ginkgo biloba L.）为银杏科银杏属植物，仅在我国幸存，是当今地球上最古老的树种之一，被达尔文称为“活化石”1。我国的银杏拥有量占世界总量的70以上，主要分布在江苏、山东、浙江、安徽、福建、江西、河北、河南、湖北、湖南、四川、贵州、广西和广东等省，资源非常丰富，其主要来源为人工栽培银杏叶。目前已形成几大银杏栽培基地，并建有专门的采叶园，用于大规模生产银杏叶2。银杏叶内提取物独特的药理作用和治疗价值已引起世界范围制药工业的极大兴趣1，银杏叶中的有效成分对心脑血管疾病具有独特的药理作用，被广泛用作治疗和预防心脑血管疾病药物3。银杏叶中主要成分为黄酮类和萜内酯类，其中银杏黄酮具有扩张血管、抑制血小板活化因子、抗氧化、调血脂等药理作用4；银杏内酯成分具有扩张冠状动脉血管、增加脑血管流量、改善脑营养及抗菌作用、血小板活化因子（PAF）抑制作用5。近年来永州本地人工栽培银杏叶为永州银杏的研究提供了有利条件，银杏四季生长，不同季节的银杏叶颜色不一，不同时节的银杏叶中的银杏黄酮和银杏内酯含量不一，探究银杏黄酮与银杏内酯最大含量时节对银杏有效成分的有效研究具有重要意义。近年来，世界范围内特别是西方发达国家在药物开发方面掀起了绿色浪潮，其起因主要是由于合成药物和抗生素的广泛使用，特别是滥用和误用对人体健康造成的伤害，导致人们形成一种共识，即得自绿色生命植物的产品往往具有较大的安全性。银杏作为近代植物要开发的热点之一，正处于这一浪潮的前沿1。吕帮玉，杨新河2等总结出银杏黄酮的提取方式有：溶剂提取法，超临界流体萃取法（SFE法），高速逆流色谱技术提取法，微波提取法，超声提取法，酶提取法，分子烙印技术；银杏黄酮的测定方法有：络合分光光度法，双波长吸收光度法，原子吸收光谱法，近红外光谱法，色谱法。沙怀，陈桂先【6】在综合比较国内外文献有关银杏叶总黄酮提取工艺与含量测定的基础上，选用70乙醇热回流提取工艺和紫外分光光度法测定提取物中总黄酮的含量，效果满意。董宏博、崔桂花等【7】优选出银杏叶中总黄酮的最佳提取工艺，为进一步研究和应用提供了依据。刘大伟，武文斌【5】在银杏叶中银杏内酯的提取、分离和测定方法研究中对溶剂萃取法和溶剂萃取柱提法进行比较，得出溶剂萃取法是一种操作简单、能耗低且银杏内酯含量较高的方法；并采用高效液相色谱（HPLC）测定银杏内酯含量的优化方法，得出该方法快进，有效，准确度高，重现性好，可用于银杏内酯的快速测定和分析的结论。李新岗，陈薇等【8】采用沸水浸泡银杏叶、乙醇抽提水浸膏、乙酸乙酯萃取内酯的生产工艺，所得白色晶体经HPLC检测含银杏内酯为81.5，产品得率为0.6。韩亚容【9】也通过有机溶剂溶解和逐层西技术，从银杏叶中分离纯化内酯，纯度提高到80。由以上查阅的文献可知，银杏叶中银杏黄酮和银杏内酯的研究方向多为提取与测定及药理活性方面，并未涉及银杏叶中银杏黄酮与银杏内酯含量的季节性变化规律，本实验参考田呈瑞，李昀【10】在银杏叶黄酮的乙醇提取方法研究中得出的结论：银杏叶在一年生长期间总黄酮含量确定银杏叶最佳采收时间为89月份，研究永州本地银杏叶中银杏黄酮与银杏内酯含量的季节性变化规律，对永州本地银杏制剂的发展提供有利参考条件，具有一定的商业价值与意义。主要内容：试验1 材料、试剂及仪器1.1 试验材料 原料：2013年6、7、8、9、10、11月每个月20号左右，新鲜银杏叶由双牌、江华等地摘取送至湖南科技学院逸夫楼实验室。1.2 主要试剂：三氯甲烷、甲醇、乙醇、盐酸、石油醚、酸性Al2O3乙酸乙酯、乙酸钠等其他试剂均为分析纯。1.3 主要仪器：电热套、GCMS分析仪、TE124S 电子天平、RE-52B 旋转蒸发仪、高效液相色谱仪。2 试验过程2.1银杏黄酮实验过程 将适量的银杏叶半干燥叶，将其碾碎，再用粉碎机进行打碎成末，称取一定量的银杏叶末放入索氏提取器中，加入三氯甲烷加热回流，回流结束后倒掉三氯甲烷溶液，挥干药渣，将滤纸剪碎连同药渣倒入烧瓶，倒入适量甲醇溶液加热回流，反应完毕后，抽滤，旋转蒸干，加入配制的一定浓度的盐酸与甲醇的混合溶液加热回流，回流完毕后放冷，用甲醇溶液定容。抽取少量试剂用GCMS分析仪进行分析，得出数据。2.2 银杏内酯实验过程称取一定量的银杏叶粉末，加入石油醚加热回流，回流结束后取出滤纸及其药渣放入烘箱中烘干，烘干结束后取出滤纸将其剪碎连同药渣倒入烧瓶中加入适量甲醇容液加热回流，反应完毕后，冷去过滤，旋转蒸干，加入少量一定量稀盐酸溶液与甲醇溶液溶解，加入乙酸乙酯进行萃取，合并萃取液，旋转蒸干，用甲醇溶液定容。按药典的方法用高效液相色谱法，测定提取物中银杏内酯的含量，得出数据。研究方法：1查阅文献法2回流提取法3单因素分析法完成期限和采取的主要措施：1 完成期限： 2012年 6 月上旬，初步构思，晾晒实验材料银杏叶。2012年6月至12月，准备实验器材和原料按照实验方案进行实验，分析实验结果。2013年9月上旬，查阅资料，明确论文方向。2014年1月上旬，进一步查阅有关文献资料，准备论文撰写。 2014年2月上旬，准备论文答辩。2 主要措施：中国学术期刊网，维普资源整理服务平台，回流提取，索氏提取，单因素分析。主要参考资料：1吴英远,褚巧伟. 银杏内酯的研究进展J. 河北化工,1999,04:14-17.2吕帮玉,杨新河,毛清黎. 银杏叶黄酮提取与测定研究进展J. 河北农业科学,2007,03:91-95.3韩金玉,李海静,褚巧伟,肖剑. 天然药物银杏内酯研究进展J. 化工进展,2000,02:23-25+2.4朱红,高尔,王德伟,王汝琴. 银杏黄酮的药学研究进展J. 食品与药品,2005,02:4-7.5刘大伟,武文斌. 银杏叶中银杏内酯的提取、分离和测定方法研究J. 科技创新导报,2011,25:9.6沙怀,陈桂先,马莉. 银杏叶中总黄酮的提取与测定J. 中国药房,1995,05:13-14.7董宏博,崔桂花,赵文秀. 银杏叶中总黄酮的提取工艺和含量测定的研究J. 安徽农业科学,2011,30:18518-18520.8李新岗,陈薇,韦玮,季红,李云,祁铁流. 银杏叶中银杏内酯的提取方法J. 南京军医学院学报,1997,01:46.9田呈瑞,李昀. 银杏叶黄酮的乙醇提取方法研究J. 西北植物学报,2001,03:556-561.10韩亚蓉. 银杏内酯的提取分离及药理作用研究J. 四川医学,2009,06:804-806.指导教师意见： 指导教师签名： 系意见：签 名： 年 月 日开 题 报 告 会 纪 要时间 地点与会人员姓 名职务（职称）姓 名职务（职称）姓 名职务（职称）会议记录摘要：会议主持人：记 录 人：年 月 日指导小组意见负责人签名： 年 月 日系 意 见负责人签名：年月日注：此表由学生本人填写，一式三份，一份留系里存档，指导老师和本人各保存一份