试验12沉积物磷分级提取及生物可利用磷估算课件.ppt

实验十二实验十二海洋沉积物中磷分级提取海洋沉积物中磷分级提取生物可利用磷估算生物可利用磷估算一、目的要求一、目的要求掌握海洋沉积物中磷分级提取方法掌握海洋沉积物中磷分级提取方法掌握海洋沉积物中生物可利用磷估算掌握海洋沉积物中生物可利用磷估算二、实验背景二、实验背景TP=IP+OP潜在的生物可利潜在的生物可利用颗粒磷，在一用颗粒磷，在一定条件能进入水定条件能进入水体被生物利用体被生物利用 二、实验背景二、实验背景分离、定量海洋沉积物中各种形态磷分离、定量海洋沉积物中各种形态磷化化学试剂提取法。学试剂提取法。基于给定提取剂对某一结合形式磷选择性基于给定提取剂对某一结合形式磷选择性的操作性定义的操作性定义方法要求：磷含量方法要求：磷含量0.005%，精密度，精密度4%。二、实验背景二、实验背景用用MgCl2、NaOH和和HCl三步提取，估算沉三步提取，估算沉积物中磷生物可利用性。积物中磷生物可利用性。第一步第一步MgCl2提取提取：悬浮物中浮游植物细悬浮物中浮游植物细胞内磷；胞内磷；吸附于悬浮颗粒物中水合氧化吸附于悬浮颗粒物中水合氧化物表面的磷。物表面的磷。（NAIP）第二步第二步NaOH提取提取：颗粒物中被颗粒物中被Fe、Al水水合氧化物吸附磷；合氧化物吸附磷；铁铝磷酸盐（铁铝磷酸盐（Fe-P、Al-P）。）。（NAIP）第三步第三步HCl提取提取：磷灰石磷（生物难利用）：磷灰石磷（生物难利用）三、实验内容（平行（平行3 3份，空白份，空白1 1份）份）称约称约40mg40mg沉积物沉积物50mL50mL具塞比色管具塞比色管40mL 40mL H H2 2O5mL5%KO5mL5%K2 2S S2 2O O8 8+0.83mL 6mol/L H+0.83mL 6mol/L H2 2SOSO4 4盖塞盖塞保鲜袋包扎瓶口保鲜袋包扎瓶口高压消化高压消化0.5h0.5h（105105）冷却室温冷却室温定容定容50mL50mL加加混合试剂混合试剂5mL5cm5mL5cm比色皿比色皿880nm880nm波长波长测定测定吸光值吸光值注意：比色前静置注意：比色前静置5 5分钟，比色时以防沉淀分钟，比色时以防沉淀物上浮影响吸光值，可用吸管移取溶液物上浮影响吸光值，可用吸管移取溶液高压锅在高压锅在406：注意熟悉使用高压锅：注意熟悉使用高压锅1.总磷测定总磷测定2.沉积物磷分级提取(平行3份，空白1份）50mg 20mL 振荡 2h，离心 20mL 1h，离心 20mL 8h，离心注意熟悉使注意熟悉使用振荡器和用振荡器和离心机离心机振荡器：振荡器：506离心机：离心机：507三、实验内容2、分级提取、分级提取MgClMgCl2 2提取相：提取相：振荡振荡2h2h离心（离心（4500r/m4500r/m）后）后上清上清液液15mL15mL定容定容50mL50mL与工作曲线步与工作曲线步骤同。骤同。所有提取步骤的残渣处理所有提取步骤的残渣处理：20ml20ml蒸馏水分次洗涤三角瓶后蒸馏水分次洗涤三角瓶后离离心管心管搅动搅动离心离心弃上清夜弃上清夜下下一步提取液分次转移一步提取液分次转移原三角瓶原三角瓶三、实验内容2、分级提取、分级提取 NaoHNaoH提取相：提取相：振荡振荡8h8h离心后离心后上清液上清液15mL15mL酚酞酚酞1d1mol/LHCl 1d1mol/LHCl 几几d pHd pH77定容定容至至50mL50mL与工作曲线步骤同。与工作曲线步骤同。HClHCl提取相：提取相：振荡振荡1h1h离心后离心后5mL10mol/LNaOH 5mL10mol/LNaOH 约约0.8mL0.8mL调调pHpH77定容定容50mL50mL与工与工作曲线步骤同。作曲线步骤同。2、分级提取、分级提取三、实验内容3.3.钼蓝法测定磷钼蓝法测定磷 磷标准使用溶液磷标准使用溶液：移取移取浓度为浓度为8.0008.000mol/mLmol/mL的的贮备液贮备液1.001.00毫升，稀释成毫升，稀释成100100毫升，使含磷为毫升，使含磷为0.08000.0800mol/mLmol/mL。有效期为一周。有效期为一周。三、实验内容 混合试剂配制混合试剂配制：按序量取按序量取100mL 6 mol/l100mL 6 mol/l硫酸、硫酸、40mL 340mL 3钼酸铵溶液、钼酸铵溶液、40mL 5.440mL 5.4抗抗坏血酸溶液和坏血酸溶液和20 mL0.13620 mL0.136酒石酸氧酒石酸氧锑钾溶液于烧杯中，每加一种溶液均锑钾溶液于烧杯中，每加一种溶液均要混匀，盛于试剂瓶中。有效时间为要混匀，盛于试剂瓶中。有效时间为6 6小时，临使用前适量配制。小时，临使用前适量配制。三、实验内容3.3.钼蓝法测定磷钼蓝法测定磷 磷标准工作曲线制作磷标准工作曲线制作移取磷标准使用液移取磷标准使用液0 0、0.500.50、1.001.00、1.501.50、2.002.00、2.50 2.50 mLmL于于50 50 mLmL比色管中。比色管中。用蒸馏水稀释到刻度，加入混合试剂用蒸馏水稀释到刻度，加入混合试剂5mL5mL，混匀。，混匀。10min10min后以蒸馏水为参比后以蒸馏水为参比 ，测吸光值。，测吸光值。（如溶液温度小于（如溶液温度小于1515时需放置时需放置20min20min）3.3.钼蓝法测定磷钼蓝法测定磷三、实验内容 2 2人一组人一组 每组做一个站位（北部湾沉积物样品）每组做一个站位（北部湾沉积物样品）每个站位每个站位 总磷平行测定总磷平行测定3 3份（空白份（空白1 1份）份）磷分级提取平行测定磷分级提取平行测定3 3份（空白份（空白1 1份）份）四、数据处理四、数据处理1 1、实验要求、实验要求2 2、数据处理、数据处理四、数据处理四、数据处理 计算该站位总磷含量（计算该站位总磷含量（mg/Kg）计算该站位各提取相磷的含量（计算该站位各提取相磷的含量（mg/Kg）估算该沉积物中生物可利用磷的含量（估算该沉积物中生物可利用磷的含量（mg/Kg）要求写计算过程和填写表要求写计算过程和填写表1和表和表2表表1.沉积物中不同形式磷的分析记录表沉积物中不同形式磷的分析记录表序号序号样重（样重（g）总磷含量总磷含量PT(mg/kg)样重样重（g）MgCl2-P(mg/kg)NaOH-P(mg/kg)HCl-P(mg/kg)123平均平均四、数据处理四、数据处理表表2.表层沉积物样品中各形态磷的含量表层沉积物样品中各形态磷的含量(mg/kg)NAIPAIPIPOPTPMgCl2-PNaOH-PHCl-P四、数据处理四、数据处理