《叶绿体中色素的提取和分离》精讲(精品).ppt

叶绿体中色素的提取和分离一、实验原理一、实验原理1.叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂:酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙酮可提取叶绿体中色素。丙酮可提取叶绿体中色素。2.色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色层析液将不同的色素分离素分离。实验步骤实验步骤1.提取叶绿素提取叶绿素研磨法提取光合色素研磨法提取光合色素研磨法提取光合色素研磨法提取光合色素材料剪碎材料剪碎材料剪碎材料剪碎研磨法研磨法研磨法研磨法加入有机溶剂加入有机溶剂加入有机溶剂加入有机溶剂研磨、匀浆研磨、匀浆研磨、匀浆研磨、匀浆过滤过滤过滤过滤提取液提取液提取液提取液二、实验程序二、实验程序 叶绿体中色素的对比叶绿体中色素的对比项目项目色素颜色素颜色色吸收光谱主要部吸收光谱主要部位位定性滤纸上显现的色素层定性滤纸上显现的色素层析图谱析图谱叶绿素叶绿素（占（占34）叶绿素叶绿素a 蓝绿色蓝绿色红光、蓝紫光红光、蓝紫光位于中下层，呈蓝绿色位于中下层，呈蓝绿色叶绿素叶绿素b 黄绿色黄绿色红光、蓝紫光红光、蓝紫光位于最下层，呈黄绿色位于最下层，呈黄绿色类胡萝卜素类胡萝卜素（占（占14）胡萝卜胡萝卜素素橙黄色橙黄色蓝紫光蓝紫光位于最上层，呈橙黄色位于最上层，呈橙黄色叶黄素叶黄素黄色黄色蓝紫光蓝紫光位于中上层，呈黄色位于中上层，呈黄色三、实验关键三、实验关键1.选材时应注意选择选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿鲜嫩、色浓绿、无浆汁的、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。2.画滤液细线时应以画滤液细线时应以细、齐、直细、齐、直为标准，重复为标准，重复画线时必须等上次画线干燥后再进行，重复画线时必须等上次画线干燥后再进行，重复2-3次。次。3.层析时不要让滤液细线触及层析液层析时不要让滤液细线触及层析液。四、注意事项四、注意事项1.因因丙酮和层析液丙酮和层析液都是易挥发且都是易挥发且有一定毒性的有机溶有一定毒性的有机溶剂剂，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。2.在研磨时要加少许在研磨时要加少许二氧化硅二氧化硅，目的是为了研磨充分，目的是为了研磨充分，有利于色素的提取；加少许有利于色素的提取；加少许碳酸钙碳酸钙的目的是为了的目的是为了防防止止研磨过程中，研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏叶绿体中的色素受到破坏。3.分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为到层析液，这是因为色素易溶解在层析液中色素易溶解在层析液中，导致，导致色素带不清晰，影响实验效果。色素带不清晰，影响实验效果。1在叶绿体中色素的提取与分离实验中，扩在叶绿体中色素的提取与分离实验中，扩散速度最快的色素是（散速度最快的色素是（D）A叶绿素叶绿素a B叶绿素叶绿素b C叶黄素叶黄素 D胡萝卜素胡萝卜素2用韭菜做用韭菜做“叶绿体色素的提取和分离叶绿体色素的提取和分离实验实验”，下列不能用作提取剂的是，下列不能用作提取剂的是（A）A水水 B丙酮丙酮 C酒精酒精 DCCl43 3做色素提取和分离实验的正确装置是做色素提取和分离实验的正确装置是图中（图中（D）4在进行叶绿素提取和分离实验时，不能让在进行叶绿素提取和分离实验时，不能让层析液没及滤液细线的原因是（层析液没及滤液细线的原因是（C）A滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响实滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响实验结果验结果B滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散C色素会溶解在层析液中而使结果不明显色素会溶解在层析液中而使结果不明显D滤纸条上几种色素会混合起来滤纸条上几种色素会混合起来5 5某人做叶绿体中色素分离实验时，使用的某人做叶绿体中色素分离实验时，使用的是圆形滤纸，装置如下图。实验结束时在圆形是圆形滤纸，装置如下图。实验结束时在圆形滤纸上形成四个同心色素圆环，则最内圈所呈滤纸上形成四个同心色素圆环，则最内圈所呈颜色为（颜色为（D）6叶绿体中色素经层析后，出现在滤叶绿体中色素经层析后，出现在滤纸上扩散最宽的色素带是（纸上扩散最宽的色素带是（A），最窄），最窄的色素带是（的色素带是（C），最整齐的色素带是），最整齐的色素带是（C）A叶绿素叶绿素a B叶绿素叶绿素b C胡萝卜素胡萝卜素 D叶黄素叶黄素7叶绿体的色素能在滤纸条上彼此分叶绿体的色素能在滤纸条上彼此分离开的原因是（离开的原因是（C）A色素提取液中的不同色素已分层色素提取液中的不同色素已分层 B阳光的照射使不同的色素彼此分阳光的照射使不同的色素彼此分开开C滤纸对各种色素的吸附力不同滤纸对各种色素的吸附力不同 D丙酮酸使色素溶解并彼此分离的丙酮酸使色素溶解并彼此分离的扩散速度不同扩散速度不同8在叶绿体色素的提取和分离实验中：在叶绿体色素的提取和分离实验中：（1）研磨绿叶时为防止叶绿素被破坏而加入）研磨绿叶时为防止叶绿素被破坏而加入CaCO3的原理是的原理是中中和细胞中的有机酸和细胞中的有机酸。（2）定性滤纸进行干燥处理的目的是）定性滤纸进行干燥处理的目的是使层析液在滤纸条上均匀使层析液在滤纸条上均匀扩散扩散。（3）对滤纸剪去两角的目的是使层析液）对滤纸剪去两角的目的是使层析液同时到达滤液细线同时到达滤液细线。（4）所画滤液细线越细越齐越好，这样可避免）所画滤液细线越细越齐越好，这样可避免 色素带部分重叠色素带部分重叠 以取得较好的分离效果以取得较好的分离效果。（5）层析装置加盖的目的是）层析装置加盖的目的是避免层析液挥发影响效果并引起中避免层析液挥发影响效果并引起中毒毒。（6）滤纸条上色素带最宽的颜色是）滤纸条上色素带最宽的颜色是蓝绿色蓝绿色，相邻色素带间距离，相邻色素带间距离最近的是最近的是叶绿素叶绿素a与与叶绿素叶绿素b。