实验室生物安全综述.pptx

实验室生物安全综述实验室生物安全综述 第一章第一章 实验室生物安全概述实验室生物安全概述2 2第1页/共35页 第一节第一节 实验室生物安全的概念实验室生物安全的概念3 3第2页/共35页一、生物危害一、生物危害一、生物危害一、生物危害 广义的生物危害广义的生物危害广义的生物危害广义的生物危害 是指各种生物因子对人、环境和社会造成的危害或潜在是指各种生物因子对人、环境和社会造成的危害或潜在 的危害。的危害。狭义的生物危害狭义的生物危害狭义的生物危害狭义的生物危害 是指在实验室进行感染性致病因子的科学研究过程中对是指在实验室进行感染性致病因子的科学研究过程中对 实验室人员造成的危害和对环境的污染。实验室人员造成的危害和对环境的污染。4 4第3页/共35页二、生物二、生物二、生物二、生物安全安全安全安全1 1.生物安全生物安全生物安全生物安全 是指防范、处理微生物及其毒素对人体危害的综合是指防范、处理微生物及其毒素对人体危害的综合措施。措施。2.2.实验室实验室实验室实验室生物生物生物生物安全安全安全安全 是是指以实验室为科研和工作场所时，避免危险指以实验室为科研和工作场所时，避免危险生物因子造生物因子造 成成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措的综合措 施施。5 5第4页/共35页三三三三、生物生物生物生物安全的相关安全的相关安全的相关安全的相关术语术语术语术语1.1.有害生物因子有害生物因子有害生物因子有害生物因子 是指那些能够对人、环境和社会造成危害作用的生物因子。是指那些能够对人、环境和社会造成危害作用的生物因子。2 2.危害危害危害危害废弃物废弃物废弃物废弃物 是指具有是指具有潜在生物危险、可燃、易燃、腐蚀、有毒、潜在生物危险、可燃、易燃、腐蚀、有毒、放射放射 和和起破坏作用的对人、环境有害的一切废弃物起破坏作用的对人、环境有害的一切废弃物。3.3.气溶胶气溶胶气溶胶气溶胶 是指悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子形成的相对是指悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子形成的相对 稳定的分散体系（粒径一般为稳定的分散体系（粒径一般为0.00110m0.00110m）。）。6 6第5页/共35页4.4.缓冲间缓冲间缓冲间缓冲间 是指设置在清洁区、半污染区和污染区相临两区之间是指设置在清洁区、半污染区和污染区相临两区之间 的缓冲密闭室，具有通风系统，其两个门具有互锁功能，的缓冲密闭室，具有通风系统，其两个门具有互锁功能，且不能同时处于开启状态。且不能同时处于开启状态。5.5.生物安全柜生物安全柜生物安全柜生物安全柜 生物安全实验室中极为重要的设备，其主要原理是使安生物安全实验室中极为重要的设备，其主要原理是使安 全柜内保持负压，气流只能从外部进入安全柜，使柜内全柜内保持负压，气流只能从外部进入安全柜，使柜内 的病原微生物不能溢出，从而保护工作人员，同时其循的病原微生物不能溢出，从而保护工作人员，同时其循 环风和排风经过高效过滤器过滤，又能保护环境。环风和排风经过高效过滤器过滤，又能保护环境。7 7第6页/共35页 第二节第二节 实验室感染的类型和来实验室感染的类型和来源源8 8第7页/共35页一、实验室感染的类型一、实验室感染的类型一、实验室感染的类型一、实验室感染的类型 1 1.气溶胶导致的实验室气溶胶导致的实验室气溶胶导致的实验室气溶胶导致的实验室感染感染感染感染 由于由于实验室中的病原微生物可以以气溶胶的形式实验室中的病原微生物可以以气溶胶的形式飘浮在飘浮在空空 气中气中，工作人员吸入了这种污染的空气而造成，工作人员吸入了这种污染的空气而造成感染。感染。2 2.事故性事故性事故性事故性感染感染感染感染 因为因为实验室人员操作过程中的疏忽，使本来接触实验室人员操作过程中的疏忽，使本来接触不到的病不到的病 原微生物原微生物污染环境，直接或间接感染实验室人员甚至污染环境，直接或间接感染实验室人员甚至危及危及 周围环境。周围环境。3 3.人为人为人为人为破坏破坏破坏破坏 有意有意播散生物制剂。播散生物制剂。9 9第8页/共35页 二、实验室感染的来二、实验室感染的来二、实验室感染的来二、实验室感染的来源源源源（一）标本（一）标本（一）标本（一）标本 1.1.检测标本：检测标本：检测标本：检测标本：实验室标本；临床标本。实验室标本；临床标本。2.2.菌毒种：菌毒种：菌毒种：菌毒种：一类；二类；三类；四类。一类；二类；三类；四类。（二）仪器设备使用过程中产生的污染（二）仪器设备使用过程中产生的污染（二）仪器设备使用过程中产生的污染（二）仪器设备使用过程中产生的污染 1 1离心机：离心机：离心机：离心机：可能造成实验室感染的有气溶胶、飞溅物和可能造成实验室感染的有气溶胶、飞溅物和 离心管泄漏等。离心管泄漏等。2 2组织匀浆器、粉碎器及研磨器：组织匀浆器、粉碎器及研磨器：组织匀浆器、粉碎器及研磨器：组织匀浆器、粉碎器及研磨器：可能造成实验室感染的有气溶胶、漏和容器破碎等。可能造成实验室感染的有气溶胶、漏和容器破碎等。3 3超声波器具：超声波器具：超声波器具：超声波器具：气溶胶。气溶胶。1010第9页/共35页4 4真空冷冻干燥机及离心浓缩机：真空冷冻干燥机及离心浓缩机：真空冷冻干燥机及离心浓缩机：真空冷冻干燥机及离心浓缩机：气溶胶；直接接触污染。气溶胶；直接接触污染。5 5培养搅拌器、振荡器和混匀器：培养搅拌器、振荡器和混匀器：培养搅拌器、振荡器和混匀器：培养搅拌器、振荡器和混匀器：气溶胶；飞溅物；溢出物。气溶胶；飞溅物；溢出物。6 6恒温水浴器和恒温震荡水浴器：恒温水浴器和恒温震荡水浴器：恒温水浴器和恒温震荡水浴器：恒温水浴器和恒温震荡水浴器：微生物生成；气溶胶微生物生成；气溶胶7 7厌氧罐：厌氧罐：厌氧罐：厌氧罐：爆裂，散布传染性物质。爆裂，散布传染性物质。1111第10页/共35页（三）操作过程产生的污染三）操作过程产生的污染三）操作过程产生的污染三）操作过程产生的污染 1 1.接种：接种：接种：接种：气溶胶。应使用无弹力的铂丝接种环，细菌接种气溶胶。应使用无弹力的铂丝接种环，细菌接种 后后接种环火焰灭菌易崩散，酒精灯烧灼接种环火焰灭菌易崩散，酒精灯烧灼时要特别时要特别 注意。注意。2 2.混匀：混匀：混匀：混匀：气溶胶。吸管吸吹菌液时不要产生气泡，应沿容气溶胶。吸管吸吹菌液时不要产生气泡，应沿容 器器壁排出壁排出。3 3.研磨：研磨：研磨：研磨：气溶胶。最好使用组织研磨器，乳钵易产生气溶气溶胶。最好使用组织研磨器，乳钵易产生气溶 胶胶。4 4.移液：移液：移液：移液：吸管上端的棉花松紧要适度，吸液时要从管底吸吸管上端的棉花松紧要适度，吸液时要从管底吸 取，吹出时要轻缓，不要全部吹净，以免产生气取，吹出时要轻缓，不要全部吹净，以免产生气 泡，形成气溶胶泡，形成气溶胶。1212第11页/共35页5.5.开封：开封：开封：开封：溢出，溢出，要避免压力和气流的急剧变化。要避免压力和气流的急剧变化。6.6.离心：离心：离心：离心：离心管套底垫要完好，使用匹配的管、套、离心管套底垫要完好，使用匹配的管、套、离心头，加盖。离心头，加盖。7.7.注射：注射：注射：注射：做好个人防护，正确使用注射器。做好个人防护，正确使用注射器。8.8.搬运：搬运：搬运：搬运：室内移动要避免滑落，移出室外要有坚实室内移动要避免滑落，移出室外要有坚实 密闭的外包装。密闭的外包装。1313第12页/共35页 第三节第三节 实验室生物安全防护实验室生物安全防护1414第13页/共35页一、实验室一、实验室一、实验室一、实验室防护器材防护器材防护器材防护器材 1.1.一级一级一级一级屏障屏障屏障屏障 是是操作者和被操作对象之间的隔离，以防止操作操作者和被操作对象之间的隔离，以防止操作人员被人员被 感染为感染为目的，也称一级隔离目的，也称一级隔离 。如如：生物安全柜、防护服、手套、安全眼镜、呼吸防护生物安全柜、防护服、手套、安全眼镜、呼吸防护 装置、紧急装置、紧急冲洗冲洗装置等。装置等。2.2.二二二二级级级级屏障屏障屏障屏障 是是生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离。隔离。是是一级屏障的外围设施。以防止实验室以外的人员被一级屏障的外围设施。以防止实验室以外的人员被感感 染染为目的。为目的。如如：实验室的建筑、结构和装修、电气和自控、通风：实验室的建筑、结构和装修、电气和自控、通风和和 净化净化、给水排水和气体供应、消防和灭菌等。、给水排水和气体供应、消防和灭菌等。1515第14页/共35页二、规范化实验室管理二、规范化实验室管理二、规范化实验室管理二、规范化实验室管理 1 1.实验室管理规章制度实验室管理规章制度实验室管理规章制度实验室管理规章制度：包括包括培训制度、准入培训制度、准入制度制度、健健 康康监测报告制度、个人良好行为制度监测报告制度、个人良好行为制度、意外事故报告、意外事故报告 制度制度等等。2 2.标准操作程序：标准操作程序：标准操作程序：标准操作程序：包括实验废弃物处置标准包括实验废弃物处置标准操作操作程序程序、进出进出实验室标准程序、菌毒种实验室标准程序、菌毒种使用标准使用标准操作程序、操作程序、实实 验验室消毒标准操作程序、室消毒标准操作程序、意外意外事故处理标准操作事故处理标准操作程程 序序及各种仪器及各种仪器设备和设备和实验标准操作程序等。实验标准操作程序等。1616第15页/共35页第二章第二章 实验室生物安全风险评估实验室生物安全风险评估1717第16页/共35页 第一节第一节 病原微生物的风险评估病原微生物的风险评估1818第17页/共35页一、病原微生物的风险一、病原微生物的风险一、病原微生物的风险一、病原微生物的风险等级等级等级等级第第第第一类病原一类病原一类病原一类病原微生物微生物微生物微生物能够能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或发现或者者已经宣布消灭的微生物。已经宣布消灭的微生物。如如:鼠疫耶尔森菌、霍乱弧菌；天花病毒、新疆出血热病毒鼠疫耶尔森菌、霍乱弧菌；天花病毒、新疆出血热病毒、埃博拉、埃博拉病毒病毒、猴痘病毒等、猴痘病毒等2929种病原体种病原体 。第二类病原第二类病原第二类病原第二类病原微生物微生物微生物微生物能够能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、与人、动物动物与人、动物与动物间传播的微生物与人、动物与动物间传播的微生物。如如：炭疽杆菌、布氏杆菌、结核分枝杆菌、艾滋病病毒、高：炭疽杆菌、布氏杆菌、结核分枝杆菌、艾滋病病毒、高致病性致病性禽流感禽流感病毒、乙型脑炎病毒、脊髓灰质炎病毒、病毒、乙型脑炎病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病毒狂犬病毒、SARSSARS冠冠状状病毒、西尼罗病毒等病毒、西尼罗病毒等 70 70 种。种。1919第18页/共35页第三第三第三第三类病原微生物类病原微生物类病原微生物类病原微生物:能够能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者动物或者环境环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引很少引起起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。如如:沙眼衣原体、破伤风梭菌沙眼衣原体、破伤风梭菌 致病性大肠杆菌、致病性大肠杆菌、脑膜炎脑膜炎球菌球菌、伤寒伤寒沙门菌、志贺菌、葡萄球菌；钩端螺旋体；白沙门菌、志贺菌、葡萄球菌；钩端螺旋体；白假假丝酵母菌、肠道病毒丝酵母菌、肠道病毒、轮状病毒、肝炎病毒、风疹病毒、轮状病毒、肝炎病毒、风疹病毒、流流感感病毒、病毒、疱疹病毒等疱疹病毒等275275种。种。第四类病原微生物第四类病原微生物第四类病原微生物第四类病原微生物:在在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。如如:小鼠白血病病毒；减毒、弱毒菌株，以及不属于小鼠白血病病毒；减毒、弱毒菌株，以及不属于以以上上三类的三类的各种低各种低致病性微生物菌种。致病性微生物菌种。2020第19页/共35页 第二节第二节 实验室仪器设备的风险评估实验室仪器设备的风险评估2121第20页/共35页实验室仪器设备的风险评估应从以下各方面进行：实验室仪器设备的风险评估应从以下各方面进行：实验室仪器设备的风险评估应从以下各方面进行：实验室仪器设备的风险评估应从以下各方面进行：1.1.所有仪器设备是否都经过安全使用认证。所有仪器设备是否都经过安全使用认证。2.2.在对仪器设备进行维护之前，是否进行了清除污染工作。在对仪器设备进行维护之前，是否进行了清除污染工作。3.3.生物安全柜和通风橱是否进行定期检测和保养。生物安全柜和通风橱是否进行定期检测和保养。4.4.高压灭菌器和其他压力容器是否定期检查。高压灭菌器和其他压力容器是否定期检查。5.5.离心机的离心吊桶及转子是否定期检查。离心机的离心吊桶及转子是否定期检查。6.6.是否有盛放碎玻璃的安全容器。是否有盛放碎玻璃的安全容器。7.7.是否配备并使用供丢弃锐器的容器。是否配备并使用供丢弃锐器的容器。8.8.是否配备并使用污染废弃物专用容器。是否配备并使用污染废弃物专用容器。2222第21页/共35页 第三节第三节 实验室生物安全的环境评估实验室生物安全的环境评估 2323第22页/共35页实验室生物安全环境评估因素涉及：实验室生物安全环境评估因素涉及：实验室生物安全环境评估因素涉及：实验室生物安全环境评估因素涉及：1.1.实验室建筑实验室建筑 2.2.储存设施储存设施 3.3.环境卫生和工作人员设施环境卫生和工作人员设施 4.4.实验室生物安全保障实验室生物安全保障 5.5.暖气和通风暖气和通风 6.6.照明照明2424实验室建筑总体是否整齐，并且周围没有障碍物实验室建筑是否清洁地板是否有任何结构缺陷，是否防滑活动空间和走廊是否满足人员通行和大型仪器设备的搬运试验台表面是否耐溶剂和腐蚀性化学品的侵蚀是否每个实验室房间都有洗手池实验室建筑在结构和维护中能否避免啮齿类动物和节肢动物进入及滞留所有暴露在外的蒸汽管道和热水管道是否采取了隔热或防护措施来保护人员安全是否配备有断电时使用的独立供电系统是否安排了储存设备、储存架来确保储存物品不会滑动、倒塌或掉落储存设施里是否堆积有易造成人员绊倒、火灾、爆炸和昆虫匿藏的垃圾、闲杂材料和物品冰箱和储存区域是否上锁建筑物是否处于清洁、有序和卫生的状态是否有饮用水是否提供冷热水、肥皂和毛巾是否分别给男女工作人员提供了更衣间实验室的每一位成员是否都配备了存放日常服装的设施是否有实验室人员进行午餐等活动的房间是否有适当的机构来收集和处理普通生活垃圾噪声水平是否在可接受范围内普通照明是否充分试验台上是否有工作照明日光灯色彩是否和谐是否已经进行了定性的危险度评估来明确规定安全保障系统所保护的范围在不用时整个建筑物是否可以安全的锁上门和窗是否是防破碎的装有危害性物品以及贵重仪器设备的房间是否上锁使用这样的房间、仪器和物品是否进行控制并需批准工作温度是否舒适对于直接暴露在阳光下的窗户是否装有避光窗帘是否有足够的通风换气通风系统是否装有高效空气过滤器机械通风系统是否会影响生物安全柜和通风橱内部及周围气流第23页/共35页 第三章第三章 实验室生物安全防护水平实验室生物安全防护水平2525第24页/共35页一一一一、实验室生物安全防护水平的分级实验室生物安全防护水平的分级实验室生物安全防护水平的分级实验室生物安全防护水平的分级 1.1.根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将实验室生物安全防护水平分为将实验室生物安全防护水平分为4 4级，级，1 1级防护水平最低，级防护水平最低，4 4级防护水平最高。级防护水平最高。2.2.分别以分别以BSL-1BSL-1、BSL-2BSL-2、BSL-3BSL-3、BSL-4BSL-4表示实验室的相表示实验室的相应应 生物安全防护水平。生物安全防护水平。3.3.一、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动。一、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动。4.4.三、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动，要三、四级实验室从事高致病性病原微生物实验活动，要 通过国家认可，颁发相应级别的生物安全实验室证书，通过国家认可，颁发相应级别的生物安全实验室证书，证书有效期为证书有效期为5 5年。年。2626第25页/共35页二、二、二、二、BSL-1BSL-1BSL-1BSL-1安全实验室安全实验室安全实验室安全实验室 1.1.1.1.生物安全水平生物安全水平生物安全水平生物安全水平 能够能够安全操作，对实验室工作人员和动物安全操作，对实验室工作人员和动物无明显无明显致病性的、对致病性的、对环境环境 危害危害程度微小的、程度微小的、特性特性清楚的病原微生物的生物安全水平清楚的病原微生物的生物安全水平。2.2.2.2.用途用途用途用途 (1 1)生物实验教学。生物实验教学。(2)2)从事具有明确生物学特征的、已知在健康成人中不从事具有明确生物学特征的、已知在健康成人中不引起疾病的微引起疾病的微 生物菌株生物菌株的的研究。研究。3.3.3.3.安全装备安全装备安全装备安全装备 (1 1)一般一般不需要生物不需要生物安全柜。安全柜。(2 2)工作人员工作人员在实验室应穿在实验室应穿工作服。工作服。(3)3)必要时戴手套或必要时戴手套或眼罩。眼罩。(4)4)配备常规的实验及清洁配备常规的实验及清洁用具。用具。2727第26页/共35页2828 BSL-1安全实验室安全实验室第27页/共35页三、三、三、三、BSL-2BSL-2BSL-2BSL-2安全实验室安全实验室安全实验室安全实验室 1.1.生物安全水平生物安全水平生物安全水平生物安全水平 能够能够安全操作对实验室工作人员和动物安全操作对实验室工作人员和动物致病性致病性低的、对环境有低的、对环境有轻微轻微 危害危害的病原的病原微生物的微生物的生物安全水平生物安全水平。2.2.用途用途用途用途 从事与从事与某些某些严重人类严重人类疾病疾病有关的，有关的，但具有但具有有效治疗和预防措施的微有效治疗和预防措施的微 生物菌株研究。生物菌株研究。3.3.安全安全安全安全装备：装备：装备：装备：（1 1）生物生物安全柜（安全柜（II II级级）。（2 2）实验）实验外罩、手套等在离开时必须留在实验室外罩、手套等在离开时必须留在实验室中中,不能不能污染污染非实验非实验区区。（3 3）在）在生物安全柜（生物安全柜（II II级）外操作感染性物质，要使用个体级）外操作感染性物质，要使用个体防护装备。防护装备。（4 4）实验室）实验室提供带锁的门提供带锁的门,以及相应的实验清洁设备。以及相应的实验清洁设备。2929第28页/共35页3030 BSL-2安全实验室安全实验室第29页/共35页四、四、四、四、BSL-3BSL-3BSL-3BSL-3安全实验室安全实验室安全实验室安全实验室 1.1.生物安全水平生物安全水平生物安全水平生物安全水平 能够安全能够安全地地从事从事国内和国外的、可能通过国内和国外的、可能通过呼吸道呼吸道感染、引起严重感染、引起严重或致或致 死性疾病的死性疾病的病原病原微生物研究工作微生物研究工作的生物安全水平的生物安全水平。2.2.用途用途用途用途 从事从事国内和国外国内和国外的、的、可能通过可能通过呼吸道感染，引起呼吸道感染，引起严重严重或致死性或致死性疾病疾病的的 病原微生物的研究工作。病原微生物的研究工作。3.3.安全装备安全装备安全装备安全装备 （1 1）生物安全柜）生物安全柜（II II级级）。（2 2）呼吸器、面罩和防护服。）呼吸器、面罩和防护服。（3 3）实验室）实验室由清洁区、半污染区和污染由清洁区、半污染区和污染区组区组 成，污染区和半成，污染区和半污染区之污染区之 间间设设缓冲间缓冲间。必要时必要时半污染区和清洁区之间亦设缓冲间。半污染区和清洁区之间亦设缓冲间。（4 4）建造）建造空气管道通风系统以进行气体消毒。空气管道通风系统以进行气体消毒。3131第30页/共35页3232 BSL-3安全实验室安全实验室第31页/共35页五五五五、BSL-4BSL-4BSL-4BSL-4安全实验室安全实验室安全实验室安全实验室 1 1、生物安全水平、生物安全水平、生物安全水平、生物安全水平 能够安全能够安全地地从事从事国内和国外的、能通过气溶胶国内和国外的、能通过气溶胶传播的、严重传播的、严重危害危害人和人和 动物生命的、动物生命的、无无特效特效治疗和治疗和预防预防措施措施的微生物菌株研究工作的生物安的微生物菌株研究工作的生物安 全水平。全水平。2 2、用途、用途、用途、用途 从事从事国内和国外的、能通过气溶胶传播的、严重危害国内和国外的、能通过气溶胶传播的、严重危害人和动物人和动物生命的生命的、无无特效治疗和预防措施的微生物菌株研究特效治疗和预防措施的微生物菌株研究工作工作。3 3、安全装备、安全装备、安全装备、安全装备 （1 1）生物生物安全柜（安全柜（IIIIII级）级）。（2 2）防护）防护服，呼吸器、正压服，呼吸器、正压面罩。面罩。（3 3）实验室）实验室应为应为负压，由负压，由清洁区、半污染区和清洁区、半污染区和污染污染区区组成。组成。（4 4）配备应急电源和专用供电线路，安装安全防护排水管。）配备应急电源和专用供电线路，安装安全防护排水管。3333第32页/共35页3434第33页/共35页 Thank you!3535第34页/共35页