《微生物的分离与纯化》教学课件.ppt

陈文智陈文智20172017年年5 5月月1818日日课题一：课题一：微生物的分离与纯化微生物的分离与纯化考纲与考点分析考纲与考点分析考纲考纲能力能力要求要求考点分析考点分析考题考题1、微生物、微生物的培养与分的培养与分离（实验）。离（实验）。实验与实验与探究探究1、无菌操作技术无菌操作技术；2、分离纯化大肠杆菌、分离纯化大肠杆菌的操作，的操作，平板划线法平板划线法和和稀释涂布平板法稀释涂布平板法；3、微生物的鉴定及数、微生物的鉴定及数量的测定。量的测定。2014卷卷T39；2015卷卷T39（2）（）（3）；）；2016全国卷全国卷T39。全国卷三年全国卷三年3考考 高考指数高考指数1、了解有关微生物及培养基的基础知识；、了解有关微生物及培养基的基础知识；2、能熟练、规范地进行无菌技术的操作；、能熟练、规范地进行无菌技术的操作；3、学会使用微生物分离与纯化的方法；、学会使用微生物分离与纯化的方法；4、微生物的鉴定及数量的测定。微生物的鉴定及数量的测定。教学目标教学目标(1)(1)制制作作牛牛肉肉膏膏蛋蛋白白胨胨固固体体培培养养基基方方法法步步骤骤：_、称量、溶化、称量、溶化、_、_。(2)(2)微微生生物物接接种种的的方方法法最最常常用用的的是是_法法和和_法。法。(3)(3)用用平平板板划划线线法法和和稀稀释释涂涂布布平平板板法法接接种种的的目目的的是是：使使聚聚集集在在一一起起的的微微生生物物_成成单单个个_，从从而而能能在培养基在培养基_形成形成单单个的个的_。(4)对对于于需需要要_保保存存的的菌菌种种，可可以以采采用用_管藏的方法。管藏的方法。活动一：知识回顾活动一：知识回顾计计算算灭灭菌菌倒平板倒平板平板划平板划线线稀稀释释涂布平板涂布平板分散分散细胞细胞表面表面菌落菌落长期长期甘油甘油活动二：活动二：2016年高考真题年高考真题39.生物生物选修选修1：生物技术实践：生物技术实践（15分）分）空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：下：配置培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、配置培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaClNaCl、X X、H2OH2O）;制作无菌平板；制作无菌平板；设置空白对照组和若干实验设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；组，进行相关操作；将各组平板置于将各组平板置于3737恒温箱中培恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。回答下列问题回答下列问题:（1）该培养基中微生物所需的氮来源于）该培养基中微生物所需的氮来源于_。若要完成步骤若要完成步骤，该培养基中的成分，该培养基中的成分X通常是通常是_。（2）步骤）步骤中，实验组的操作是中，实验组的操作是_。（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为为36个个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了落，这种结果说明在此次调查中出现了_现象。若现象。若将将30（即（即36-6）个）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做平板作为本组菌落数的平均值，该做法法_（填（填“正确正确”或或“不正确不正确”）。）。牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨琼脂琼脂放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间将各实验组平板分别将各实验组平板分别污染污染不正确不正确活动二：活动二：2016年高考真题年高考真题讨论一：讨论一：同学们，通过备考学习，你认为同学们，通过备考学习，你认为本题考查了那些知识点？本题考查了那些知识点？讨论二：讨论二：还有哪些知识点未考？（你的疑还有哪些知识点未考？（你的疑惑是什么？）惑是什么？）讨论一：讨论一：同学们，通过备考学习，你认为本题同学们，通过备考学习，你认为本题考查了那些知识点？考查了那些知识点？培养基的营养成分、培养基的营养成分、培养基的物理性质（固体、液体、半固体）、培养基的物理性质（固体、液体、半固体）、灭菌（消毒）、灭菌（消毒）、微生物的计数方法、微生物的计数方法、讨论二：讨论二：还有哪些知识点未考？（你的疑惑是什么？）还有哪些知识点未考？（你的疑惑是什么？）培养基的制作步骤、培养基的制作步骤、培养基的化学成分、培养基的化学成分、培养基的功能（选择、鉴别培养基）、培养基的功能（选择、鉴别培养基）、接种方法、接种方法、菌种的保藏方法、菌种的保藏方法、平板倒置的原因、平板倒置的原因、血细胞计数板的使用、血细胞计数板的使用、平板划线法：平板划线法：活动三：微生物的纯化与分离（实验）活动三：微生物的纯化与分离（实验）（实验操作）（实验操作）稀释涂布平板法：稀释涂布平板法：（实验操作）（实验操作）活动三：微生物的纯化与分离（实验）活动三：微生物的纯化与分离（实验）1.1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？要灼烧接种环？2 2、在划线操作结束时，为什么仍然需要灼烧接、在划线操作结束时，为什么仍然需要灼烧接种环？种环？3.3.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？进行划线？4 4、涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。、涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，应如何进行无菌操作？应如何进行无菌操作？1.1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？要灼烧接种环？1 1、操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在、操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；的微生物污染培养物；2 2、每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接、每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种；种环上残留的菌种；2 2、在划线操作结束时，为什么仍然需要灼烧接、在划线操作结束时，为什么仍然需要灼烧接种环？种环？划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。种，避免细菌污染环境和感染操作者。3.3.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？进行划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。答：以免接种环温度太高，杀死菌种。4 4、涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。、涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，应如何进行无菌操作？应如何进行无菌操作？应从操作的各个细节保证应从操作的各个细节保证“无菌无菌”。例如，酒。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。（20142014年新课标年新课标卷）卷）3939 生物生物选修选修1 1：生物技术实践：生物技术实践（1515分）分）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：回答下列问题：（1 1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是培养了一段时间，这样做的目的是_；然后，将；然后，将1mL1mL水样稀释水样稀释100100倍，在倍，在3 3个平板上用涂布法分别接入个平板上用涂布法分别接入0.1mL0.1mL稀释液；经稀释液；经适当培养后，适当培养后，3 3个平板上的菌落数分别为个平板上的菌落数分别为3939、3838和和3737。据此可得出每升水样中的活菌数为据此可得出每升水样中的活菌数为_。小刀试牛小刀试牛灭菌是否合格灭菌是否合格检测培养基平板检测培养基平板3.8107（2 2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过时，接种环通过_灭菌，在第二次及以后划线灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_。（3 3）示意图）示意图A A和和B B中，中，_表示的是用稀释涂布平表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。板法接种培养后得到的结果。（4 4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的析其原因是：振荡培养能提高培养液的_的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高_的利用率。的利用率。灼烧灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落B溶解氧溶解氧营养物质营养物质打开班级微信群打开班级微信群链接题目链接题目完成题目完成题目提交提交当堂当堂限时限时练习练习小小结结课后作业课后作业完成导学案课后作业完成导学案课后作业谢谢 谢谢 指指 导导 !