医学专题—医院感染学-标本采集和判断.ppt

医院感染标本医院感染标本的采集与结果的采集与结果(ji gu)判断判断李芳芳讲师李芳芳讲师(jingsh)第一页，共三十九页。病病例例：某某院院胸胸外外科科在在一一个个星星期期内内分分别别送送来来三三份份不不同同病病人人的的标标本本(biobn)(biobn)（痰痰标标本本(biobn)(biobn)、切切口口分分泌泌物物标标本本(biobn)(biobn)、血血标标本本(biobn)(biobn)），经经检检测测均均检检出出了了金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌，PCRPCR结结果果相相同同，耐耐药药谱谱结结果果相相同同：耐耐药药：头头孢孢唑唑啉啉、头头孢孢哌哌酮酮、头头孢孢三三嗪嗪、青青霉霉素素、氨氨苄苄青青霉霉素素、羧羧苄苄青青霉素，敏感：万古霉素。霉素，敏感：万古霉素。耐甲氧西林耐甲氧西林(x ln)(x ln)金黄色葡萄球金黄色葡萄球菌菌 爆发爆发(bof)第二页，共三十九页。l临床标本检验临床标本检验l对病人对病人(bngrn)及带菌者进行监测及带菌者进行监测l配合医院感染爆发的调查配合医院感染爆发的调查l配合抗生素合理使用的管理配合抗生素合理使用的管理l医院环境的细菌学监测医院环境的细菌学监测l研究与教育研究与教育临床临床(ln chun)(ln chun)微生物学实验室的微生物学实验室的任务任务第三页，共三十九页。医院感染医院感染(gnrn)(gnrn)标本采集及检验标本采集及检验l标本采集标本采集(cij)、检验的一般程序、检验的一般程序l医院感染标本采集的一般标准医院感染标本采集的一般标准l标本的运送与处理标本的运送与处理l各类医院感染标本的采集和检验各类医院感染标本的采集和检验第四页，共三十九页。临临床床需需要要医医生生选选择择合合适适的的方方法法(fngf)(fngf)、开开医医嘱嘱、填填写写申申请请单单护护士士备备物物、采采集集标标本本（正正确确的的用用物物、时时间间、方方法法(fngf)(fngf)）卫卫勤勤中中心心运运送送标标本本微微生生物物实实验验室室检验检验出报告、指导临床用药出报告、指导临床用药标本采集及检验标本采集及检验(jinyn)(jinyn)一般程序一般程序您认为在标本采集您认为在标本采集(cij)和检验时要注意什么和检验时要注意什么？第五页，共三十九页。标本采集的一般标本采集的一般(ybn)(ybn)标标准准l标本容器标本容器(rngq)的要求：的要求：无菌干燥、宽口无菌干燥、宽口l棉拭要求：棉拭要求：l不同部位的标本采集：不同部位的标本采集：眼、耳、鼻、喉、创眼、耳、鼻、喉、创面、脓肿、组织标本、痰、脑脊液面、脓肿、组织标本、痰、脑脊液l标本及化验单标本及化验单：病人姓名、采集时间及日期、病人姓名、采集时间及日期、病区、床号、标本名、采集部位病区、床号、标本名、采集部位(bwi)、临床诊断、临床诊断、检验项目检验项目l与抗生素使用的时间关系与抗生素使用的时间关系l存在正常菌群部位存在正常菌群部位：消毒或绕道消毒或绕道第六页，共三十九页。Lipsky和和Plorde将标本按存在将标本按存在(cnzi)(cnzi)部位部位的深浅分为三层的深浅分为三层l深层标本深层标本：循环血液、胸液、腹腔循环血液、胸液、腹腔(fqing)液、关节液液、关节液l深层标本但与外界相通深层标本但与外界相通：子宫内膜、膀子宫内膜、膀胱、瘘管胱、瘘管l严重污染有正常菌群的标本严重污染有正常菌群的标本：皮肤或粪皮肤或粪便等便等第七页，共三十九页。标本标本(biobn)(biobn)的运送与的运送与处理处理l标本采集标本采集(cij)后应尽快送检后应尽快送检l采集与培养有时间间隔采集与培养有时间间隔l收到标本后的处理：收到标本后的处理：检查检查-肉眼观察肉眼观察-处理处理-涂片检查涂片检查-电话通知电话通知 立即处理的标本立即处理的标本：脑脊液、眼分泌物，洗胃液：脑脊液、眼分泌物，洗胃液 肺组织肺组织(查结核分支杆菌查结核分支杆菌)可暂缓处理的标本可暂缓处理的标本：创面拭子、痰、粪便（冷藏：创面拭子、痰、粪便（冷藏2-32-3小时）、尿（冷藏小时）、尿（冷藏2424小时小时 ）第八页，共三十九页。三、三、各类标本的采集各类标本的采集(cij)(cij)和检和检验验l血标本血标本(biobn)l尿标本尿标本l呼吸道标本呼吸道标本l粪标本粪标本l脑脊液标本脑脊液标本l脓及伤口标本脓及伤口标本第九页，共三十九页。（一）血标本（一）血标本(biobn)(biobn)采样时机采样时机：l菌血症出现于发热或寒战菌血症出现于发热或寒战(hnzhn)(hnzhn)前前1h1h内内l细菌性心内膜炎细菌性心内膜炎 3 3次血培养（次血培养（24h 24h内内3 3次次,次间隔次间隔1h1h）l间歇性菌血症间歇性菌血症 3 3次次/24-48h/24-48h内、不同部内、不同部位位l已接受抗生素治疗的病人已接受抗生素治疗的病人 4-6 4-6次，吸次，吸收或中和血中的抗生素收或中和血中的抗生素第十页，共三十九页。血标本血标本血标本血标本(biobn)(biobn)l采样方法采样方法消毒消毒 抽取（干燥、灭菌的针筒）抽取（干燥、灭菌的针筒）更更换针头换针头 注入注入(zh r)(zh r)培养基培养基 混合混合 周围血推片周围血推片l量：培养基的量：培养基的1/101/10 成人：成人：5-10mL5-10mL（SBE10-20mlSBE10-20ml）婴儿及儿童：婴儿及儿童：1-2mL1-2mL第十一页，共三十九页。血标本血标本(biobn)抽血至培养瓶（需氧或厌氧）抽血至培养瓶（需氧或厌氧）35普通孵育普通孵育置全自动血培养仪置全自动血培养仪药敏试验药敏试验 获得纯菌获得纯菌菌种鉴定（生化鉴定：传统或自动化）菌种鉴定（生化鉴定：传统或自动化）二级报告，微生物学检验报告单二级报告，微生物学检验报告单每日观察每日观察仪器阳性报警仪器阳性报警涂片革兰染色涂片革兰染色一级报告，通知临床一级报告，通知临床血平板、巧克力平板、麦康凯平板分离培养血平板、巧克力平板、麦康凯平板分离培养检验检验(jinyn)方方法法第十二页，共三十九页。血标本血标本(biobn)抽血至培养抽血至培养(piyng)瓶（需氧或厌氧）瓶（需氧或厌氧）35普通普通(ptng)孵育孵育置全自动血培养仪置全自动血培养仪每日观察每日观察仪器阳性报警仪器阳性报警无细菌生长无细菌生长第第5、7天作盲目移种天作盲目移种第第7天作盲目移种天作盲目移种阴性报告阴性报告无细菌生长无细菌生长检验方法检验方法第十三页，共三十九页。血标本血标本(biobn)检验检验(jinyn)方方法法第十四页，共三十九页。结果结果(ji gu)分析分析l有意义菌有意义菌：类杆菌、肠杆菌科细菌、铜绿假：类杆菌、肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、嗜血流感杆菌、金黄色葡萄球菌、单胞菌、嗜血流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌肺炎链球菌l无病原学意义菌无病原学意义菌：非溶血性链球菌（：非溶血性链球菌（D族除族除外）、类白喉杆菌、芽胞杆菌外）、类白喉杆菌、芽胞杆菌血标本血标本血标本血标本(biobn)(biobn)第十五页，共三十九页。（二）尿标本（二）尿标本(biobn)(biobn)中段尿采样中段尿采样l女性：女性：清洁清洁(qngji)(qngji)-清洗清洗-无菌纱布擦干无菌纱布擦干-分开阴唇分开阴唇-置棉花于阴道口置棉花于阴道口-留取中留取中段尿段尿10ml10ml（灭菌容器）（灭菌容器）l男性：男性：清洗清洗-冲洗冲洗-留取中段尿留取中段尿l老年人和儿童：老年人和儿童：清洁外生殖器及肛门部位，清洁外生殖器及肛门部位，用清洁的尿盆或烧瓶接取用清洁的尿盆或烧瓶接取第十六页，共三十九页。其它其它(qt)采样方法采样方法l耻骨上膀胱穿刺抽吸采样耻骨上膀胱穿刺抽吸采样：膀胱充盈时，19号或20号针头及针筒，穿刺点-脐与耻骨联合中点连线的下1/3处l长期导尿者长期导尿者：消毒尿管与引流管接头，无菌空针抽取消毒尿管与引流管接头，无菌空针抽取l膀胱镜检、导尿管导尿、逆行肾盂造影术膀胱镜检、导尿管导尿、逆行肾盂造影术：术中采取术中采取l输尿管膀胱梗阻输尿管膀胱梗阻：分段采集数份，分别培养分段采集数份，分别培养尿标本尿标本尿标本尿标本(biobn)(biobn)第十七页，共三十九页。检查检查(jinch)(jinch)方法方法l湿片镜检湿片镜检-指导培养指导培养l离心离心-沉淀沉淀(chndin)(chndin)-涂片涂片-染色染色l分离培养分离培养-菌落观察菌落观察-涂片涂片-镜检镜检 纯培养纯培养 l结核杆菌检查结核杆菌检查-抗酸染色抗酸染色 培养（罗氏培养基）培养（罗氏培养基）尿标本尿标本尿标本尿标本(biobn)(biobn)第十八页，共三十九页。1 1份标本份标本(biobn)(biobn)1010个油镜视野，每个视野细菌数：个油镜视野，每个视野细菌数：1-101-10个个-每每1mL1mL尿液有尿液有10104 4-10-105 5个细菌个细菌 污染或特殊情况污染或特殊情况100-1000100-1000个个-每每1mL1mL尿液有尿液有10106 6-10-108 8个细菌个细菌 尿路感染尿路感染 常见病原菌：常见病原菌：大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌、伤寒沙门菌等变形杆菌、伤寒沙门菌等临床意义临床意义尿标本尿标本(biobn)第十九页，共三十九页。尿快速检验尿快速检验(jinyn)(jinyn)报告报告（24h24h报告报告）l无细菌生长或尿液含菌数无细菌生长或尿液含菌数10103 3cfu/mlcfu/mll尿液含菌数尿液含菌数10105 5cfu/mlcfu/ml,确定为大肠杆菌或粪链确定为大肠杆菌或粪链球菌球菌,直接药敏试验结果直接药敏试验结果(ji gu)(ji gu)满意，作最后报满意，作最后报告告l尿液含菌数尿液含菌数10105 5cfu/mlcfu/ml，但鉴定结果不典型，但鉴定结果不典型，2424小时预报，第二天作细菌鉴定和纯菌的药敏小时预报，第二天作细菌鉴定和纯菌的药敏试验，争取试验，争取4848小时最后报告小时最后报告尿标本尿标本(biobn)(biobn)第二十页，共三十九页。（三）呼吸道标本（三）呼吸道标本(biobn)(biobn)标本采集标本采集(cij)(cij)l采集时间采集时间-晨痰晨痰l采集方法采集方法：咽拭子咽拭子：灌注活性炭粉的棉拭、：灌注活性炭粉的棉拭、StuartStuart运输培运输培养基养基痰标本痰标本：清晨咳痰法、小儿取痰法、导管取痰：清晨咳痰法、小儿取痰法、导管取痰法、气管穿刺吸痰法、气管切开者深入透气法、气管穿刺吸痰法、气管切开者深入透气孔中取痰、纤维支气管镜采取痰标本孔中取痰、纤维支气管镜采取痰标本第二十一页，共三十九页。痰标本痰标本(biobn)(biobn)的的处理处理l取可疑部分（脓、血）接种及涂片取可疑部分（脓、血）接种及涂片l涂片三张：涂片三张：1 1张革兰染色、张革兰染色、1 1张抗酸染色、张抗酸染色、1 1张备用张备用l接种接种5%5%血平板血平板(pngbn)(pngbn)1 1个：分离全部细菌个：分离全部细菌l中国兰平板中国兰平板1 1个：直接药敏试验个：直接药敏试验呼吸道标本呼吸道标本(biobn)第二十二页，共三十九页。痰标本痰标本(biobn)(biobn)检查方法检查方法l直接镜检直接镜检:标本是否标本是否(sh fu)(sh fu)合格、区分正常部分合格、区分正常部分和病变部分和病变部分l结核菌检查结核菌检查：抗酸染色、罗氏培养基：抗酸染色、罗氏培养基-鉴鉴定定-药敏试验药敏试验l分离培养分离培养（巧克力平板、血平板）：（巧克力平板、血平板）：菌落观菌落观察察-鉴定鉴定呼吸道标本呼吸道标本(biobn)第二十三页，共三十九页。不合格标本不合格标本：标本中平均：标本中平均(pngjn)(pngjn)每个视野内扁每个视野内扁平上皮细胞多于平上皮细胞多于2525个，找不到病变部分。个，找不到病变部分。合格标本合格标本：标本中可见白细胞（脓细胞）、：标本中可见白细胞（脓细胞）、柱状上皮细胞集中，有时还可见到不少柱状上皮细胞集中，有时还可见到不少(b sho)(b sho)黏液丝（标本来自气管或支气管内分泌物）。黏液丝（标本来自气管或支气管内分泌物）。镜下观察镜下观察(gunch)第二十四页，共三十九页。检验检验(jinyn)(jinyn)报告报告l直接镜检报告直接镜检报告（约（约2h2h）：标本是否合格）：标本是否合格(hg)(hg)、有、有无脓细胞、柱状上皮细胞、扁平上皮细胞的数量、无脓细胞、柱状上皮细胞、扁平上皮细胞的数量、阳性球菌？阴性球菌？阳性球菌？阴性球菌？l培养检查结果报告培养检查结果报告：5%5%血平板、中国兰平板、血平板、中国兰平板、药敏试验结果药敏试验结果呼吸道标本呼吸道标本(biobn)第二十五页，共三十九页。上呼吸道正常寄生菌：上呼吸道正常寄生菌：草绿色链球菌草绿色链球菌常见病原菌：常见病原菌：肺炎链球菌、肺炎链球菌、A A族链球菌、金黄族链球菌、金黄色葡萄球菌色葡萄球菌(p to qi jn)(p to qi jn)、卡他布兰汉菌、白喉棒、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、结核分支杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流状杆菌、结核分支杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌等感嗜血杆菌、肠杆菌和军团菌等临床意义临床意义呼吸道标本呼吸道标本(biobn)第二十六页，共三十九页。（四）（四）粪标本粪标本(biobn)(biobn)l采集采集：量：量-0.5-0.52g2g，保存液，保存液，4 4o oC24hC MIC MIC的的5 5倍倍中中介介（intermediateintermediate，I I）：在在药药物物浓浓集集部部位位的的体体液液中中或或大大剂剂量量给给药药后后在在体体内内的的药药物物浓浓度度能能抑抑制制待待测测菌菌，平平均均血血药药浓浓度度 MICMIC；在在“耐耐药药”和和“敏感敏感”之间的缓冲带之间的缓冲带耐耐药药（resistantresistant，R R）：待待测测菌菌不不能能被被所所测测药药物物常规剂量的体内浓度所抑制。常规剂量的体内浓度所抑制。抑菌试验结果抑菌试验结果(ji gu)(ji gu)判断判断第三十六页，共三十九页。尿培养报告单尿培养报告单金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(p to qi jn)敏感：敏感：万古霉素万古霉素中介：中介：氧氟沙星（诺氟沙星）氧氟沙星（诺氟沙星）耐药：耐药：青霉素、头孢唑啉、头孢哌酮、青霉素、头孢唑啉、头孢哌酮、头孢三嗪、氨苄青霉素、羧苄青霉素头孢三嗪、氨苄青霉素、羧苄青霉素报告单结果报告单结果(ji gu)(ji gu)分析分析第三十七页，共三十九页。第三十八页，共三十九页。内容(nirng)总结医院感染标本。检查-肉眼观察-处理-涂片(t pin)检查-电话通知。成人：5-10mL（SBE10-20ml）。菌种鉴定（生化鉴定：传统或自动化）。老年人和儿童：清洁外生殖器及肛门部位，用清洁的尿盆或烧瓶接取。1份标本10个油镜视野，每个视野细菌数：。尿液含菌数105cfu/ml,确定为大肠杆菌或粪链球菌,直接药敏试验结果满意，作最后报告。直接镜检:标本是否合格、区分正常部分和病变部分。谢谢第三十九页，共三十九页。