实验六次溴酸钠法测定海水中的氨-氮.ppt

实验六实验六 次溴酸钠法测定海水中的氨次溴酸钠法测定海水中的氨-氮氮海水中的营养元素：海水中的营养元素：氧、碳、氧、碳、氮氮、磷、硅等主要元素，还、磷、硅等主要元素，还有铁、锰、铜、钼等微量元素有铁、锰、铜、钼等微量元素氮氮化合物在海洋中的存在形态：化合物在海洋中的存在形态：1.NH4+(NH3)、NO2-、NO3-三种无机化合三种无机化合氮氮2.溶解有机氮化合物溶解有机氮化合物3.不溶于海水的颗粒氮不溶于海水的颗粒氮其中无机氮化合物是海洋植物最重要的营其中无机氮化合物是海洋植物最重要的营养物质养物质3.吸光光度法吸光光度法原理原理：在一定的实验条件下，物质对光的吸收：在一定的实验条件下，物质对光的吸收与物质的浓度成正比。与物质的浓度成正比。显色剂：显色剂：波长的选择：波长的选择：孔雀绿的吸收光谱孔雀绿的吸收光谱7.2.1 7.2.1 吸光分析的几种方法吸光分析的几种方法吸光分析的几种方法吸光分析的几种方法目视比色法目视比色法标准系列标准系列未知样品未知样品特点特点利用自然光利用自然光比较吸收光的互补色光比较吸收光的互补色光准确度低（半定量）准确度低（半定量）不可分辨多组分不可分辨多组分方法简便，灵敏度低方法简便，灵敏度低光电比色法光电比色法分光光度法（紫外分光光度法（紫外-可见分光光度法）可见分光光度法）UV-VISUltraviolet Visual Spectroscopy0.575光源光源单色器单色器吸收池吸收池检测器检测器显示显示实验原理：实验原理：在在碱性碱性条件下，条件下，以次溴酸钠以次溴酸钠为氧化剂，将为氧化剂，将海水中的海水中的氨氨氧化为氧化为亚硝酸盐亚硝酸盐，亚硝酸盐在，亚硝酸盐在一定的一定的pH值下与值下与磺胺磺胺及及盐酸萘乙二胺盐酸萘乙二胺作用作用形成形成深红色深红色偶氮染料，于偶氮染料，于543毫微米毫微米波长处波长处进行光度测定。进行光度测定。使用液使用液注意：氧化剂储备液注意：氧化剂储备液实验步骤：工作曲线的制作实验步骤：工作曲线的制作1 分别移取分别移取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0毫升毫升NH4Cl标准使标准使用液于用液于6个比色管，用人工海水稀释至刻度线（个比色管，用人工海水稀释至刻度线（溶液浓度溶液浓度分别为分别为0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00微克氨微克氨/升）升）3 用移液管依次加入用移液管依次加入5毫升氧化剂（以次溴酸钠）使用液，毫升氧化剂（以次溴酸钠）使用液，混匀放置混匀放置30分钟分钟2 量取量取2份水样于份水样于50毫升比色管中，管上做标签，与毫升比色管中，管上做标签，与1一起一起做下面步骤做下面步骤5 用移液管依次加入用移液管依次加入5毫升磺胺毫升磺胺溶液，混匀放置溶液，混匀放置5分钟分钟6 用移液管依次加入用移液管依次加入1毫升盐酸萘乙二胺毫升盐酸萘乙二胺液，混匀放置液，混匀放置10分分钟钟7 在分光光度计上在分光光度计上543毫微米波长处测量毫微米波长处测量1的吸光值的吸光值A，未未加加NH4Cl溶液的吸光值为空白吸光值溶液的吸光值为空白吸光值Ab,样品的吸光值样品的吸光值AW,NO2-N 的吸光值的吸光值A NO2-N 4 量取量取2份水样于份水样于50毫升比色管中，管上做标签，与前面毫升比色管中，管上做标签，与前面的一起做下面步骤，来测定海水中的的一起做下面步骤，来测定海水中的NO2-N NH4+浓度浓度A-Ab7 以以1的的NH4-N浓度和浓度和A-Ab为横为横纵坐标作图，得到工作曲线纵坐标作图，得到工作曲线8 水样的水样的NH4-N吸光值为：吸光值为：A(NH4-N)=AW-Ab-A NO2-N 9 根据根据A(NH4-N)在在工作曲线上查出水样氨工作曲线上查出水样氨-氮的浓度氮的浓度721型分光光度计的使用方法型分光光度计的使用方法1 用调波长的旋钮调波长至用调波长的旋钮调波长至543毫微米毫微米2 将上面的盖子打开，用中间的调零旋钮调透光将上面的盖子打开，用中间的调零旋钮调透光值至零值至零3 将里面盛比色皿的盒子拿出来将里面盛比色皿的盒子拿出来4 用手拿比色皿的侧面（避免用手接触光面），用手拿比色皿的侧面（避免用手接触光面），用蒸馏水里外冲洗两次用蒸馏水里外冲洗两次5 最里面的比色皿盛蒸馏水（最里面的比色皿盛蒸馏水（80%满），剩下满），剩下的三个由颜色浅到深的顺序盛样品，在盛之前的三个由颜色浅到深的顺序盛样品，在盛之前要用样品润洗相对应的比色皿要用样品润洗相对应的比色皿2次，然后盛入次，然后盛入对应的样品（对应的样品（80%满）。满）。6 先用滤纸擦比色皿外面一遍，然后用擦镜纸先用滤纸擦比色皿外面一遍，然后用擦镜纸擦干净（特别是光面），按顺序放入盛比色皿擦干净（特别是光面），按顺序放入盛比色皿的盒子中（放正），用盒子上的铁皮固定好的盒子中（放正），用盒子上的铁皮固定好7 将盒子放入分光光度计内，注意和下面固定孔将盒子放入分光光度计内，注意和下面固定孔对好，对好，盖住分光光度计的盖子盖住分光光度计的盖子8 在蒸馏水位置，旋转在蒸馏水位置，旋转100%旋钮调透光值至旋钮调透光值至100%，然后测样（向里一个一个推），读吸光，然后测样（向里一个一个推），读吸光值。值。9 测完后将比色皿内的废液倒出，用蒸馏水内外测完后将比色皿内的废液倒出，用蒸馏水内外冲洗两次，桌上铺一张滤纸，将比色皿倒放上冲洗两次，桌上铺一张滤纸，将比色皿倒放上面晾干。面晾干。