【课件】微生物的基本培养技术第1课时课件2022-2023学年高二下学期生物人教版选择性必修3.pptx

第第2 2节节 微生物的培养技术及应用微生物的培养技术及应用一一 生物的基本培养技生物的基本培养技术（第（第1课时）第1章 发酵工程 向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶，由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶，自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么，怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？应该先对制作用具和原料进行应该先对制作用具和原料进行灭菌处理灭菌处理，再接种，再接种纯的菌种纯的菌种，并控制发酵条件，避免杂菌进入。，并控制发酵条件，避免杂菌进入。从社会中来1 1、防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。提，也是发酵工程的重要基础。2 2、实验室培养微生物的条件、实验室培养微生物的条件:培养基无菌技术要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件；要为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件；要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。无细胞结构原核细胞真核细胞真菌：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履虫、变形虫等微生物的类群病毒细菌立“一”支 蓝 细 线微生物：难以用肉眼观察的微小生物的统称。本章提及的微生物主要指用于发酵的细菌细菌和真菌真菌。【自主探究】请结合教材【自主探究】请结合教材P9-10P9-10面，完成金版新知一面，完成金版新知一 培养基的配制培养基的配制 1.培养基的概念：培养基的概念：2.培养基的培养基的用途：用途：3.培养基的类型：培养基的类型：4.培养基的必备营养成分：培养基的必备营养成分：5.配制培养基时，如何满足不同微生物的特殊需求？配制培养基时，如何满足不同微生物的特殊需求？1、培养基概念：人们按照微生物对人们按照微生物对营养物质营养物质的不同需求，配制出供其生长的不同需求，配制出供其生长繁殖的繁殖的营养基质营养基质。3、培养基类型：固体培养基液体培养基+琼脂分离、计数、鉴定等扩大培养、工业生产2、培养基作用：用以用以培养、分离、鉴定、保存微生物培养、分离、鉴定、保存微生物或或积累其代谢物积累其代谢物。长有酵母菌菌落盛有液体培养基 微生物在微生物在固体培养基表固体培养基表面或内部生长，面或内部生长，就可以形成肉就可以形成肉眼可见的菌落。眼可见的菌落。4、培养基的成分：牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成组分含量提供的主要营养牛肉膏5g碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g氮源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000ml水碳源、氮源、水、无机盐4、培养基的成分：不加碳源不加碳源的培养基用来的培养基用来培养培养 微生物微生物不加氮源培养基可用来培养 微生物碳源、氮源、水、无机盐碳源：无机碳源：CO2、CO32-、HCO3-有机碳源：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物氮源：无机氮源：NH4、NO3-、NH3等有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等自养固氮对 pH、特殊营养物质、氧气的需求CC【自主探究】请结合教材P10-11面，思考下列问题：1.获得纯净培养物的关键是什么？2.消毒和灭菌的区别是什么？3.为了防止杂菌污染，具体措施有哪些？（四个方面）4.如何针对不同的作用对象选择合适的消毒/灭菌方法？u主要包括主要包括 和和 消毒对操作的空间、操作者的衣着和手灭菌培养细菌用的培养皿、接种用具和培养基防止杂菌污染u获得纯净的获得纯净的微生物培养物的关键是：微生物培养物的关键是：消毒消毒灭菌灭菌煮沸消毒、煮沸消毒、巴氏巴氏消毒、酒精、氯气、紫外线消毒消毒、酒精、氯气、紫外线消毒湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌高压蒸汽灭菌锅湿热灭菌、干热灭菌、湿热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌灼烧灭菌干热灭菌箱注意：注意：避免已经灭菌的材料用具与周围物品接触避免已经灭菌的材料用具与周围物品接触为了避免周围环境微生物污染，操作应在超净工为了避免周围环境微生物污染，操作应在超净工作台并在酒精灯火焰旁进行。作台并在酒精灯火焰旁进行。超净工作台超净工作台A2 2常用方法：常用方法：法和法和 法。法。微生物群分散单个细胞单个菌落繁殖不同菌落的不同菌落的形状、大小、颜色形状、大小、颜色等不同。等不同。菌落是菌落是鉴定菌种鉴定菌种的重要依据。的重要依据。1.1.概念概念：由：由 繁殖繁殖所获得的微生物群体是纯培养物，获得所获得的微生物群体是纯培养物，获得 的的过程就是纯培养过程就是纯培养。3、步骤（1）制备培养基配制培养基灭菌包器材称取去皮马铃薯称取去皮马铃薯200g200g，切成小块，加水，切成小块，加水1000ml1000ml，加热煮沸至马铃薯软，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g20g葡萄糖、葡萄糖、15-20g15-20g琼脂琼脂，用蒸馏水，用蒸馏水定容至定容至1000ml1000ml。将配制好的将配制好的培养基培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入再放入高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅中，在压力为中，在压力为100kPa100kPa、温度为、温度为121121的条件下，灭的条件下，灭菌菌15-30min15-30min。将将5-85-8套套培养皿培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱干热灭菌箱内，在内，在160-170160-170灭菌灭菌2h2h。1 1、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？倒平板倒平板注意事项：倒平板注意事项：5050左右左右在酒精灯火焰附近在酒精灯火焰附近冷凝后平板倒置冷凝后平板倒置可以防止可以防止皿盖上的水珠落入培养基，皿盖上的水珠落入培养基，可以避免培养基可以避免培养基中的中的水分过快蒸发。水分过快蒸发。（2）接种和分离酵母菌 通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。分散到培养基表面。单个细胞微生物群单个菌落连续划线培养分区划线法（平板划线）经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。12345灼烧接种环，直至接种环金属丝烧红在火焰旁冷却接种环，拔出酵母菌培养液试管的棉塞试管口通过火焰在火焰附近用接种环蘸取一环菌液试管口通过火焰，并塞上棉塞将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线划3个平板（重复实验）1个不划线（空白对照）（2）接种和分离酵母菌第1区划线接种环灭菌第2区划线接种环灭菌第3区划线接种环灭菌接种环灭菌12345接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次划线首尾不能相接每次划线前对接种环进行灼烧灭菌划线后,培养皿倒置培养平板划线法注意事项:第4区划线（2）接种和分离酵母菌分区划线法一、概念检测1.微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。判断下列相关表述是否正确。（1）培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利。（）（2）消毒和灭菌的杀菌程度存在差异。（）（3）微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物。（）2.日常生活中保存食品的方法有哪些？这些方法是如何阻止或抑制微生物生长的？干制干制可以降低食品的水分含量；可以降低食品的水分含量；腌制腌制可以通过食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖；可以通过食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖；低温低温则是通过降低微生物的代谢速率来抑制微生物的生长和繁殖。则是通过降低微生物的代谢速率来抑制微生物的生长和繁殖。二、拓展应用1 1.某同学将某同学将5 5个手指尖在贴有个手指尖在贴有“洗手前洗手前”标签的培养基上轻轻按一下。然后标签的培养基上轻轻按一下。然后用肥皂将该手洗干净，再将用肥皂将该手洗干净，再将5 5个指尖在贴有个指尖在贴有“洗手后洗手后”标签的同种标签的同种培养基培养基上上轻轻按一下。将这两个轻轻按一下。将这两个培养皿培养皿放入放入3737恒温培养箱中培养恒温培养箱中培养24h24h后，发现贴有后，发现贴有“洗手后洗手后”标签的培养皿中菌落较少。请分析回答下列问题。标签的培养皿中菌落较少。请分析回答下列问题。(1)这个实验中需要进行灭菌处理的材料用具有_。培养皿和培养基(2)“将指尖在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养中的哪一步操作？接种（3）从实验结果来看,洗手后我们就能进行无菌操作了吗？操作时，我们可以采用 什么方法来避免手上微生物的污染？通过实验结果可以看到，洗手后手上还有一些微生物，不能直接进行无菌操作。可以通过用酒精棉球擦拭双手，或戴消过毒的手套等方法来避免手上微生物的污染。2 2.某某生生物物兴兴趣趣小小组组将将从从葡葡萄萄皮皮上上成成功功分分离离来来的的野野生生酵酵母母菌菌分分别别接接种种于于3 3个个盛盛有有等等量量同同种种液液体体培培养养基基的的锥锥形形瓶瓶中中，并并放放置置在在摇摇床床上上培培养养，摇摇床床转转速速分分别别为为 210 210 r/minr/min，230 230 r/minr/min和和250 250 r/minr/min。培培养养时时间间与与酵酵母母菌菌种种群群密密度度的的关关系系如如下图所示。请分析回答下列问题。下图所示。请分析回答下列问题。（1 1）摇床转速不同）摇床转速不同,意味着培养条件有什么不同意味着培养条件有什么不同？二、拓展应用意味着培养液中02含量不同。（2 2）从图中数据你可以得出什么结论）从图中数据你可以得出什么结论?其原因是其原因是 什么什么?培养液中02含量越高,酵母菌种群密度越大。（3 3）为什么培养）为什么培养8h8h后，其中后，其中2 2个锥形瓶中酵母菌个锥形瓶中酵母菌 的种群密度基本达到稳定的种群密度基本达到稳定?这时候已经达到了环境容纳量。