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最全的高三生物实验总结石嘴山市第一中学高三生物实验总结一、生物实验中试剂的作用及实验方法总结 (一)化学物质的检测方法 淀粉碘液 (蓝色) 还原性糖斐林试剂班氏试剂(砖红色) CO2Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊) 乳酸pH试纸 O2余烬复然 蛋白质被蛋白酶水解、双缩脲试剂(紫色) 脂肪苏丹染液 (橘黄色)、苏丹染液 (红色) DNA二苯胺(蓝色) 染色体龙胆紫溶液,醋酸洋红溶液 (二)实验条件的控制方法 1、加水中氧气泵入空气或氧气或放入绿色植物 2、减少水中氧气容器密封或油膜覆盖或用凉开水 3、除去容器中CO2NaOH溶液 4、除去叶中原有淀粉置于黑暗环境 5、除去叶中叶绿素酒精水浴加热 6、除去光合对呼吸干扰给植株遮光 7、如何得到单色光棱镜色散或透明薄膜滤光 8、血液抗疑加入柠檬酸钠 9、线粒体提取细胞匀浆离心 (三)实验结果的显示方法 光合速度O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量 水生植物可依气泡的产生量或产生速率; 离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目; 植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。 呼吸速度O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量原子或分子转移途径放射性同位素示踪细胞液浓度大小、植物细胞是否死亡质壁分离甲状腺激素动物耗氧量,发育速度等生长激素生长速度(体重、体长变化)胰岛素作用动物活动状态四、实验中控制温度的方法 1、还原糖,DNA鉴定沸水浴加热 2、酶促反应水浴保温 3、用酒精溶解叶中的叶绿素酒精要隔水加热、 4、细胞和组织培养恒温箱培养五、实验中常用器材和药品的使用 1、NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH 2、Ca(OH)2:鉴定CO2 3、CaCl2:提高细菌细胞壁的通透性 4、HCl:解离或改变溶液的pH 5、NaHCO3:提供CO2 6、NaCl:配制生理盐水或用于提取DNA 7、琼脂:激素或其他物质的载体或培养基的凝固剂 8、酒精:用于消毒、提纯DNA、叶片脱色及配制解离液 9、蔗糖:测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原10、滤纸:过滤或纸层析 11、纱布、尼龙布:过滤,遮光12、龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色六、一些常见的实验方法根据颜色来确定某种物质的存在: 淀粉+I2(蓝色);还原性糖+斐林试剂(砖红色);脂肪+苏丹(橘黄)或+苏丹(红色);蛋白质+双缩脲试剂(紫色);(2)用荧光标记法来证明细胞膜具有一定的流动性(3)同位素示踪法:光合作用产生氧气的来源; 光合作用中二氧化碳的去向;噬菌体侵染细菌实验证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质; DNA的复制是半保留复制。(4)获得无籽果实的方法:用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房,如无籽蕃茄;诱导染色体变异,如无籽西瓜。(5)确定某种激素功能的方法:饲喂法,切除注射法,阉割移植法,切除口服法。(6)确定传入、传出神经的功能:刺激+观察效应器的反应或测定神经上的电位变化。(7)植物杂交的方法雌雄同花:花蕾期去雄+套袋 +开花期人工授粉+套袋雌雄异花:花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋(8)确定某一显性个体基因型的方法:测交; 该显性个体自交。(9)确定某一性状为显性性状或隐性性状的方法:具有一对相对性状的纯合体的杂交 自交,观察后代是否有性状分离(10)确定某一个体是否具有抗性基因的方法:确定小麦是否具有抗锈病基因,用锈病菌去侵染,一段时间后,观察有无锈斑出现。(11)育种的方法:杂交育种;人工诱变育种;单倍体育种;基因工程育种;细胞工程育种;多倍体育种等。(12)测定种群密度的方法:样方法; 标志重捕法(13)生态瓶的制作方法;瓶必须透明,且封闭(14)测定细菌的数目-显微计数七、实验技术1、光学显微镜的使用:适用于观察生物的微观结构,如细胞的结构,包括光镜下可看到的各种细胞器。2、临时装片、切片和涂片的制作技术:适用于显微观察,凡需在显微镜下观察的生物材料,必须先制成临时装片、切片或涂片。如“观察植物细胞的质壁分离和复原的实验”中要制作洋葱表皮的临时装片,在生物组织中脂肪的鉴定中要制作花生种子的切片等。3、研磨和过滤技术:适用于从生物组织中提取物质,如酶、色素等。研磨时要先将生物材料切碎,然后加入研磨剂常用SiO2、提取液及其他必要物质,充分研磨后,往往要进行过滤,以除去滤渣,所用过滤器具则根据需要或或根据试题中提供的器材加以选用,如可用滤纸、纱布、脱脂棉、尼龙布等。4、解离技术:用于破坏细胞壁,分散植物细胞,制作临时装片。5、恒温技术:适用于有酶参加的生化反应,一般用水浴或恒温箱。根据题目要求选用。6、纸层析技术:适用于溶液中物质分离。重要步骤包括制备滤纸条、画滤液细线、层析分离。7、根尖培养技术: 观察植物根尖有丝分裂的实验二、设计实验步骤常用“四步法”。 第一步:共性处理实验材料,均等分组并编号。选择实验材料时要注意应用一些表示等量的描述性语言,如:“生长一致的”,“年龄相同的,体重一致的”等等。分成多少组要视题目中所给的信息而定,(一般情况分两组)。编号最好用A、B、C或甲、乙、丙,而不用1、2、3 避免与实验步骤相混淆。 第二步:遵循单因子变量原则,对照处理各组材料。方法为一组为对照组(往往为处于正常生理状态的),其余为实验组,对照组与实验组只能有一个实验条件不同(单因子变量),其他条件要注意强调出相同来,这是重要的得分点或失分点。至于变量是什么要根据具体题目来确定。 第三步:相同条件培养(饲养、保温)相同时间。 第四步:观察记录实验结果。 实验结果的预测(预期);首先要根据题目判断该题是验证性实验还是探究性实验,如果是验证性实验,则结果只有一个,即题目中要证明的内容。如果是探究性实验,则结果一般有三种:实验组等于对照组,说明研究的条件对实验无影响。实验组大于对照组,说明研究的条件对实验有影响,且影响是正相关。实验组小于对照组,说明研究的条件对实验有影响,且影响是负相关。 三、教材中实验总结(一)用显微镜观察多种多样的细胞实验目的:1)使用高倍显微镜观察几种细胞,比较不同细胞的异同点2)运用制作临时装片的方法实验原理:利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构,例如:可以看到叶绿体、线粒体等细胞器,从而能够区别不同的细胞。方法步骤:第一步:转动反光镜使视野明亮 第二步:在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央 第三步:用转换器转过高倍物镜问(1)是低倍镜还是高倍镜的视野大,视野明亮?为什么?(提示:低倍镜的视野大,通过的光多,放大的倍数小;高倍镜视野小,通过的光少,但放大的倍数高。)问(2)为什么要先用低倍镜观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察?(提示:如果直接用高倍镜观察,往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此,需要先用低倍镜观察清楚,并把要放大观察的物像移至视野的中央,再换高倍镜观察。)问(3)用转换器转过高倍镜后,转动粗准焦螺旋行不行?(提示:不行。用高倍镜观察,只需微调即可。转动粗准焦螺旋,容易压坏玻片。) 第四步:观察并用细准焦螺旋调焦。(二)观察DNA和RNA在细胞中的分布原理:甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA和染色剂结合。实验材料用具:人的口腔上皮细胞或蚕豆叶表皮,洋葱表皮,大烧杯,小烧杯,温度计,滴管,消毒牙签,载玻片,盖玻片,铁架台,石棉网,火柴,酒精灯,吸水纸,显微镜、质量分数为0.9%的NaCl溶液,质量分数为0.8%的盐酸,吡罗红甲基绿染色剂实验方法步骤:取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片在酒精灯下烘干防止污迹干扰观察效果保持细胞原有形态消毒为防止感染,漱口避免取材失败固定装片水解1在小烧杯中加入30 mL质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中;230 水浴保温5 min。改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色冲冼用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S洗去残留在外的盐酸染色1用吸水纸吸去载玻片上多余的水分;2用吡罗红甲基绿染色剂2滴染色5 min;3吸去多余的染色4盖上盖玻片。 观察先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,调节清晰后才换用高倍物镜观察使观察效果最佳实验结果细胞核区域染成绿色,细胞质区域染成红色。实验结论DNA主要分布在细胞核中(线粒体和叶绿体中也含有少量的DNA),RNA主要分布在细胞质中。注意事项: 1.材料的选择 选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察; 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞)2.取材要点 取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质; 取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。 3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗。 4.安全要点 用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂; 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟。 5.换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,切不可动粗准焦螺旋。(三)检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质实验原理:可溶性还原糖+ 斐林试剂砖红色沉淀。(水浴加热)脂肪小颗粒 + 苏丹染液橘黄色小颗粒。(要显微镜观察)蛋白质 + 双缩脲试剂紫色反应。实验材料:1.可溶性还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织,以苹果、梨为最好。2.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h4h)。3.蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白)。实验步骤:1、还原性糖的鉴定:(1)还原性糖:有还原性基团游离醛基或酮基的糖;如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖。(2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。 (3)步骤:取样液2mL于试管中加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)水浴加热2min左右观察颜色变化(浅蓝色棕色砖红色)(4)结论:还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀2、脂肪的鉴定(1)步骤:取材:花生种子(浸泡3-4h),将子叶削成薄片制作切片:(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央染色:(滴苏丹染液23滴切片上23min后吸去染液滴体积分数50%的酒精洗去浮色吸去多余的酒精)制作装片:(滴12滴清水于材料切片上盖上盖玻片)镜检鉴定:(显微镜对光低倍镜观察高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)(2)结论:细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色。(3)实验成功的要点:.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h4h)。该试验成功的关键是获得只含有单层细胞理想薄片。滴苏丹染液染液染色2-3min,时间不宜过长,以防细胞的其他部分被染色。3、蛋白质的检测(1)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)(2)步骤:试管中加样液2mL加双缩脲试剂A液1mL,摇匀加双缩尿试剂B液4滴,摇匀 观察颜色变化(紫色) (3)结论:蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。(4)实验成功的要点:蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白稀释液)。双缩脲试剂的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入双缩脲试剂B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液)。(四)用高倍镜观察线粒体和叶绿体实验目的:使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。实验原理:叶绿体的辨认依据:叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形。线粒体辨认依据:线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色,细胞质接近无色实验材料:观察叶绿体时选用:藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是:叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片,所以作为实验的首选材料。(若用菠菜叶作实验材料,要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。)方法步骤:步 骤注 意 问 题分 析1制片。用镊子取一片黑藻的小叶,放入载玻片的水滴中,盖上盖玻片。制片和镜检时,临时装片中的叶片不能放干了,要随时保持有水状态否则细胞或叶绿体失水收缩,将影响对叶绿体形态和分布的观察。2低倍镜下找到叶片细胞3高倍镜下观察叶绿体的形态和分布4制作人的口腔上皮细胞临时装片在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液用牙签取碎屑盖盖玻片5观察线粒体蓝绿色的是线粒体,细胞质接近无色。讨论:1、细胞质基质中的叶绿体,是不是静止不动的?为什么?答:不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动,这种运动能随时改变椭球体的方向,使叶绿体既能接受较多光照,又不至于被强光灼伤。2、叶绿体的形态和分布,与叶绿体的功能有什么关系?答:叶绿体的形态和分布都有利于接受光照,完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多,这可以接受更多的光照。(五)通过模拟实验探究膜的透性实验目的:1说明生物膜具有选择透过性 2尝试模拟实验的方法实验原理:某些半透膜(如动物的膀胱膜、肠衣等),可以让某些物质透过,而另一些物质不能透过。或者(玻璃纸)水分子可以透过,而蔗糖分子因为比较大,不能透过。可以用半透膜将不同浓度的溶液分隔开,然后通过观察溶液液面高低的变化,来观察半透膜的选择透过特性,进而类比分析得出生物膜的透性。方法步骤:1取两个长颈漏斗,分别在漏斗口处封上一层玻璃纸。2在A漏斗中注入硫酸铜溶液,B漏斗中注入蔗糖溶液,并加入少许红墨水,使其略呈红色。3将两个漏斗分别浸入盛有蒸馏水的烧杯中,在两漏斗的液面处做标记4静置一段时间后,观察烧杯中蒸馏水颜色的变化及长颈漏斗的液面变化,并将观察到的结果设计表格进行记录。讨论:1漏斗管内的液面为什么会升高?答:由于单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量多于从长颈漏斗渗出的水分子数量,使得管内液面升高。2如果用一层纱布代替玻璃纸,漏斗管内的液面还会升高吗?答:用纱布替代玻璃纸时,因纱布的孔隙很大,蔗糖分子也可以自由通透,因而液面不会升高。3如果烧杯中不是清水,而是同样浓度的蔗糖溶液,结果会怎样?答:半透膜两侧溶液的浓度相等时,单位时间内透过玻璃纸进入长颈漏斗的水分子数量等于渗出的水分子数量,液面也不会升高(六)观察植物细胞的质壁分离与复原 实验原理:成熟的植物细胞有一大液泡。当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞液中的水分就透过原生质层进入到外界溶液中,由于原生质层比细胞壁的伸缩性大,当细胞不断失水时,液泡逐渐缩小,原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来,既发生了质壁分离。当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,外界溶液中的水分就透过原生质层进入到细胞液中,液泡逐渐变大,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,既发生了质壁分离复原。材料用具:紫色的洋葱鳞片叶;刀片,镊子,滴管,载玻片,盖玻片,吸水纸,显微镜;蔗糖的质量浓度为0.3g/mL的溶液,清水 方法步骤:1、制作洋葱鳞片叶表皮的临时装片:选取洋葱鳞片叶外表皮紫色较深的部位,用刀片划一个0.7cm见方的小块,用镊子尖插入平行于根侧的一个边,紧紧捏住这侧整个边缘部分,然后稍用力慢慢撕取,将捏住的较厚的部分表皮用刀片切去,剩余部分展平于载玻片中央的水滴中盖上盖玻片,即制成临时装片。2、观察植物细胞的质壁分离与复原现象(1)观察洋葱表皮细胞用显微镜观察,可以看到洋葱鳞片叶表皮细胞中紫色的中央液泡,还可以看到原生质层紧紧地贴着细胞壁。 (2)观察洋葱表皮细胞的质壁分离: 从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶液,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次,盖玻片下面的洋葱鳞片叶表皮就浸润在蔗糖溶液中。用高倍镜观察,可以看到细胞中的中央液泡逐渐变小,原生质层逐渐与细胞壁分离开来。 (3)观察洋葱表皮细胞的质壁分离复原 从盖玻片的一侧滴入清水,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次,盖玻片下面的洋葱鳞片叶表皮就浸润在清水中。用高倍镜观察,可以看到细胞中的中央液泡逐渐胀大,原生质层又逐渐贴着细胞壁。结论:外界溶液浓度>细胞液浓度,细胞出现质壁分离现象;外界溶液浓度<细胞液浓度,细胞出现质壁分离复原现象。实验应用用途实验设计结论单一变量验证原生质层和细胞壁伸缩性大小成熟植物细胞+分离剂,镜检观察细胞形态发生质壁分离现象,证明原生质层的伸缩性比细胞壁大。植物细胞的结构特性判断细胞死活待测细胞+ 一定浓度的分离剂,镜检观察细胞形态能发生质壁分离和复原,说明细胞是活细胞。细胞的生活状态测定细胞液浓度待测细胞+ 一系列浓度梯度的分离剂,镜检观察细胞形态细胞液浓度介于未分离和刚发生分离的浓度之间。不同浓度的分离剂比较不同植物细胞的细胞液浓度不同植物细胞+同一浓度分离剂,镜检观察细胞发生质壁分离的时间先发生质壁分离的和分离明显的植物细胞的细胞液浓度小。不同植物细胞(七)探究影响酶活性的因素的实验实验目的:1探究不同温度和PH对过氧化氢酶活性的影响。 2培养实验设计能力。方法步骤:提出问题作出假设设计实验(包括选择实验材料、选择实验器具、确定实验步骤、设计实验记录表格)实施实验分析与结论表达与交流。实例1:比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率 实验原理:鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算,质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比,每滴FeCl3溶液中的Fe3+数,大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍 方法步骤:步骤注意问题解释取4支洁净试管,编号,分别加入2mL H2O2溶液不让H2O2接触皮肤H2O2有一定的腐蚀性将2号试管放在90oC左右的水浴中加热,观察气泡冒出情况,与1号对照 向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液,观察气泡产生情况不可用同一支滴管肝脏研磨液必须是新鲜的肝脏要制成研磨液由于酶具有高效性,若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶,会影响实验准确性因为过氧化氢酶是蛋白质,放置过久,可受细菌作用而分解,使肝脏组织中酶分子数减少,活性降低研磨可破坏肝细胞结构,使细胞内的酶释放出来,增加酶与底物的接触面积2-3min后,将点燃的卫生香分别放入3号和4号试管内液面的上方,观察复燃情况放卫生香时,动作要快,不要插到气泡中现象:4号试管产生气泡多,冒泡时间短,卫生香猛烈复燃,3号试管产生气泡少,冒泡时间长,卫生香几乎无变化 避免卫生香因潮湿而熄灭实例2:温度对酶活性的影响实验原理:1淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过程中,不同阶段的中间产物遇碘后,会呈现红褐色或红棕色。)麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注:市售a-淀粉酶的最适温度约60oC方法步骤:操作注意问题解释取3支试管,编上号,然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液 另取3支试管,编上号,然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液 将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组,分别放入热水(约60oC)、沸水和冰块中,维持各自的温度5min不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶液防止混合时,由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化,反应温度不是操作者所要控制的温度,影响实验结果。分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度5min保持各自温度时间不能太短淀粉酶催化淀粉水解需要一定时间在3支试管中各滴入1-2滴碘液,摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录碘液不能滴加太多防止影响实验现象的观察用表格的形式显示实验步骤号加入试剂或处理方法试管ABCabc1可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL/ 新鲜淀粉酶溶液/1mL1mL1mL2保温5min60oC100oC0oC60oC100oC0oC3将a液加入到A试管,b液加入到B试管,c液加入到C试管中,摇匀 4保温5min60oC100oC0oC 5滴入碘液,摇匀2滴2滴2滴 6观察现象并记录 实例3:PH对酶活性的影响用表格开式显示实验步骤:(注意操作顺序不能错)序号加入试剂或处理方法试管1231注入新鲜的淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸馏水1mL/3注入氢氧化钠溶液/1mL/4注入盐酸/1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL660oC水浴保温5min 7加入斐林试剂,边加边振荡2mL2mL2mL8水浴加热煮沸1min 9观察3支试管中溶液颜色变化变记录 (八)叶绿体色素的提取和分离实验目的:1尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和用纸层析法分离提取到的色素。2分析实验结果,探究叶绿体中有几种色素,以及各自所呈现的颜色。实验原理:1叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于丙酮等有机溶剂中,所以用丙酮、乙醇等能提取色素。2层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体色素在层析液中的溶解度不同,分子量小的溶解度高,随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以用层析法来分离四种色素。实验材料:幼嫩、鲜绿的菠菜叶实验步骤:步 骤注 意 问 题分 析1提取色素5克绿叶剪碎,放入研钵,加SiO2、CaCO3和5mL丙酮(或10mL无水乙醇)迅速、充分研磨。(若没有无水乙醇,也可用体积分数为95%的乙醇,但要加入适量的无水碳酸钠,除去水分)加SiO2加CaCO3加丙酮迅速加SiO2为了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨时叶绿素受到破坏。因为叶绿素含镁,可被细胞液中的有机酸产生的氢代替,形成去镁叶绿素,CaCO3可中和液泡破坏释放的有机酸,防止叶绿体被破坏。叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。减少研磨过程叶绿素的分解,减少有毒性的丙酮挥发。2收集滤液漏斗基部放一单层尼龙布,研磨倒入漏斗内挤压,将滤液收集到小试管中,用棉花塞塞住试管口。尼龙布起过滤作用。试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥发。3制备滤纸条将干燥的滤纸,顺着纸纹剪成长10cm,宽1cm的纸条,一端剪去二个角,并在距这一端1cm处划一铅笔线。干燥顺着纸纹剪成长条一端剪去二个角可吸收更多的滤液。层析时,色素分离效果好。可使层析液同时到达滤液细线。4划滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线划出细、齐、直的一条滤液细线,干后重复三次。滤液细线越细、越齐越好。重复三次。防止色素带之间部分重叠。增加色素在滤纸上的附着量,实验结果更明显。5纸层析法分离色素将3mL层析液倒入烧杯中,将滤纸条(划线一端朝下)插入层析液中,用培养皿盖盖上烧杯。层析液不能没及滤纸条。烧杯要盖培养皿盖。防止色素溶解在层析液中,层析液中的苯、丙酮、石油醚易挥发6.观察实验结果扩散最快是胡萝卜素,扩散最慢是叶绿素b,含量最多的是叶绿素a。四种色素之所以能被分离,是因为四种色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同。结果滤纸条上从上到下依次为:橙黄色(胡萝卜素)、黄色(叶黄素)、蓝绿色(叶绿素a)、黄绿色(叶绿素b).实验讨论: 1滤纸条上的滤液细线,为什么不能触及层析液?答:滤纸条上的滤液细线如触及层析液,滤纸上的叶绿体色素就会溶解在层析液中,实验会失败。2提取和分离叶绿体色素的关键是什么?答:提取叶绿体色素的关键是:叶片要新鲜、浓绿;研磨要迅速、充分;滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,以免滤液挥发。分离叶绿体色素的关键是:一是滤液细线要细且直,而且要重复划几次;二是层析液不能没及滤液线。(九) 探究酵母菌的呼吸方式1 原理: 酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水:C6H12O6 + 6O2 + 6H2O 酶 6CO2 + 12H2O + 能量在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳:C6H12O6 酶 2C2H5OH + 2CO2 + 少量能量2装置:下图为“探究酵母菌细胞呼吸的方式”的实验装置图,请据图分析甲:有氧呼吸装置 乙:无氧呼吸装置.A瓶加入的试剂是NaOH,其目的是:使进入B瓶的空气先经过NaOH处理,排除空气中CO2对实验结果的干扰。 C瓶和E瓶加入的试剂是澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液),其作用是 : 检测CO2的产生D瓶应封口放置一段时间后,再连通E瓶,其原因是:D瓶应封口放置一段时间后,酵母菌会将瓶中的氧气消耗完。再连通E瓶,就可以确保通入澄清石灰水(或溴麝香草酚蓝水溶液)的CO2是酵母菌的无氧呼吸所产生的3、检测: (1)检测CO2的产生:使澄清石灰水变浑浊,或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。 (2)检测酒精的产生:橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与酒精发生反应,变成灰绿色。(十)观察植物细胞的有丝分裂实验原理:有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式。在植物体中,有丝分裂常见于分生区的细胞,如:根尖、茎尖等。高等植物细胞有丝分裂的过程,分为分裂间期和细胞分裂期,由于在细胞分裂期,细胞中发生着染色体的有规律的变化,又将其分为前期、中期、后期、末期。可以用高倍镜观察植物细胞有丝分裂的过程,根据各个时期细胞内染色体(或染色质)的变化情况,识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。细胞核内的染色质(染色体)容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)染成深色。目的要求 1、 观察有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期。培养学生的观察能力。2、 学会制作植物根尖有丝分裂装片的技术。培养学生的动手能力。3、 学会使用高倍镜和绘生物图的方法。材料用具洋葱(可以用蒜、葱、蚕豆代替)。显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,剪刀,镊子。氯化氢的质量分数为15%的盐酸,酒精的体积分数为95%的溶液,龙胆紫(的质量分数为0.01g/mL的或0.02g/mL的溶液(或醋酸洋红液)。方法步骤1、洋葱根尖的培养实验课前的34d,取洋葱一个,注意:洋葱要选择底盘大,避免用新采收的洋葱;剥去外层老皮,用刀削去老根,不要削掉“根芽”。放在广口瓶或烧杯上,瓶内装满清水,放置在光照处。注意每天换水12次,使洋葱的底部总是接触到水。待根长到5cm时,取生长健壮的根尖制片观察。2、装片的制作(1)、解离:剪取根尖23mm(最好在每天的1014点取根,因此时间是洋葱根尖有丝分裂高峰期),立即放入盛有质量分数为15%的HCL溶液和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1)的玻璃皿中,在室温下解离35min。(2)、漂洗:待根尖酥软后,用镊子取出,放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。(3)、染色:把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)的培养皿中,染色35min。(4)、制片:取一干净载玻片,在中央滴一滴清水,将染色的根尖用镊子取出,放入载玻片的水滴中,并且用镊子尖把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片再加一载玻片。然后,用拇指轻轻地压载玻片。取下后加上的载玻片,即制成装片。3、 洋葱根尖有丝分裂的观察(1)、低倍镜观察把制成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察,要求找到分生区的细胞,它的特点是:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂。(2)、高倍镜观察找到分生区的细胞后,把低倍镜移走,直接换上高倍镜,用细准焦螺旋和反光镜把视野调整的既清晰又较亮,直到看清细胞物象为止。仔细观察,找到处于有丝分裂的前期、中期、后期、末期和间期的细胞。注意:观察时,应根据有丝分裂各时期的特点,仔细辨认。由于间期长,视野中多数细胞均处于此时期,易于观察。其它时期,可先找出细胞分裂期的中期,然后再找到前期、后期、末期的细胞。仔细观察各个时期内染色体的变化特点。在同一视野中,很难找全各个时期的细胞,可以慢慢地移动装片,在不同视野下寻找。(十一)模拟探究细胞表面积与体积的关系实验目的:通过探究细胞大小,即细胞的表面积与体积,与物质运输效率之间的关系,探讨细胞不能无限长大的原因。实验原理:用琼脂块模拟细胞。琼脂块越小,其表面积越大,则其与外界效换物质的表面积越大,经交换进来的物质在琼脂块中扩散的速度快;琼脂块中含有酚酞,与NaOH相遇,呈紫红色,可显示物质(NaOH)在琼脂块中的扩散速度。操作步骤:操作方法注意问题解释用塑料餐刀将含酚酞的琼脂块切成三块边长分别为3cm、2cm、1cm的正方体将3块琼脂块放在烧杯内,加入NaOH溶液,将琼脂块淹没,浸泡10min。用塑料勺不时翻动琼脂块。不要用勺子将琼脂块切开或挖动其表面避免干扰实验结果戴上手套,用塑料勺将琼脂块从NaOH溶液中取出。用纸巾把它们吸干,用塑料刀把琼脂块切成两半。仔细观察切面的颜色变化,变成红色的部分代表NaOH扩散的深度,测量每一块上NaOH扩散后着色的浓度。记录测量结果应避免NaOH与皮肤和眼睛等接触。如泼洒出来,应立即用水冲洗泼洒处。每两次操作之间必须把刀擦干NaOH有腐蚀性避免干扰实验结果根据测量结果进行计算,并将结果填在记录表中结论:琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减小;NaOH扩散的体积与整个琼脂块的体积之比随着琼脂块的增大而减小。说明:细胞体积越大,其相对表面积越小,细胞的物质运输的效率就越低。细胞表面积限制了细胞的长大。1.制约细胞体积的因素有三个方面:(1) 细胞相对表面积与体积的关系,细胞体积越小,其相对表面积(表面积/体积)越大,细胞与周围环境交换物质能力越大。(2) 细胞核与细胞质之间有一定的关系,一个核内所含的DNA是一定的,控制细胞活动也就有一定的限度,使细胞不可能太大。(3) 细胞内物质的交流受到细胞体积的制约,细胞体积过大,影响物质流动速度,细胞内的生命活动就不能灵敏的控制与缓冲。2卵细胞是一种特殊的细胞,因为它含有许多供胚胎发育的营养物质卵黄,而使细胞体积增大了许多倍。但卵细胞一般与外界交换物质少,故表面积与体积的比例特殊。(十二)观察细胞的减数分裂实验目的:通过观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片,识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置和数目,加深对减数分裂过程的理解。实验原理:蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞,再形成精子。此过程要经过两次连续的细胞分裂:减数第一次分裂和减数第二次分裂。在此过程中,细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化,因而可据此识别减数分裂的各个时期。方法步骤:1、低倍镜观察:在低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片识别初级精母细胞、次级精母细胞和精细胞。2、高倍镜观察:先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞,再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。3、绘图:根据观察结果,尽可能多地绘制减数分裂不同时期的细胞简图。(十三)低温诱导染色体加倍原理:用低温处理植物分生组织细胞,能够抑制纺锤体的形成,以致影响染色体被拉向两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,于是,植物细胞染色体数目发生变化。方法步骤: (1)洋葱长出约1cm左右的不定根时,放入冰箱的低温室内(4),诱导培养36h。 (2)剪取诱导处理的根尖约0.51cm,放入卡诺氏液中浸泡0.51 h,以固定细胞的形态,然后 用体积分数为95%的酒精冲洗2次。 (3)制作装片:解离漂洗染色制片(过程同观察细胞的有丝分裂的制片方法一样) (4)观察,比较:视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞.(十四)调查常见的人类遗传病要求:1调查的群体应足够大;2选取群体中发病率较高的单基因遗传病。如红绿色盲、白化病、高度近视(600度以上)等.3如果调查某病的遗传方式,则要对患病的家族群体进行调查统计。方法:保证调查的群体足够大, 分组调查,汇总数据,统一计算.步骤组织问题调查小组 确定课题分头调查研究 撰写调查报告汇报、交流调查结果。计算公式(十五)探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用1.原理:植物插条经植物生长调节剂处理后,对植物插条的生根情况有很大影响,而且用不同浓度、不同时间处理其影响程度亦不同。其影响存在一个最适浓度、在此浓度下插条生根数量最多、生长最快。 常用的生长素类似物:NAA(萘乙酸), 2,4-D, IPA(苯乙酸). IBA(吲哚丁酸)等2.步骤:(1)选择插条:以1年生苗木最好(1年或2年生枝条形成层细胞分裂能力强、发育快、易成活)(2)扦插枝条的处理:枝条的形态学上端为平面,下