SMP-11-007-01色谱柱管理规程完整25750.pdf

黑龙江宝庆隆生物技术有限责任公司 文件名称 色谱柱标准管理规程 文件编号 SMP-11-007 版 本 号 01 拷贝号 起 草 人 起草日期 年 月 日 审 核 人 审核日期 年 月 日 审 核 人 审核日期 年 月 日 批 准 人 批准日期 年 月 日 颁发部门 质量管理部 执行日期 年 月 日 分发部门 中心化验室 1 目的 建立色谱柱标准管理规程，明确色谱柱的管理和操作方法及要求。2 范围 适用于中心化验室气相色谱仪和液相色谱仪用的所有色谱柱。3 责任者 中心化验室、质量管理部、质量受权人 4 职责 中心化验室副主任负责本标准管理规程的起草。中心化验室主任负责本标准管理规程的审核。质量管理部部长负责本标准管理规程的审核。质量受权人负责本标准管理规程的批准。5 内容 色谱柱的购入 新色谱柱购入时，验收人检查外包装、封口和标签是否完好，造册登记，内容包括：生产公司、品名、规格、编号、购进时间、启用日期、柱内保护溶液等。在包装盒空白处贴上色谱柱专用标签，标签上填写编号、购入日期、用途等，并在色谱柱上贴上简单标签，填写色谱柱台账依规定放至特定位置。标签格式 色谱柱专用标签格式详见表 1 和表 2。表 1 包装盒标签 编 号 购入日期 启用日期 保护液体 用 途 表 2 色谱柱用标签 编 号 保护液体 用 途 色谱柱编号-序号，按照色谱柱购入日期进行编号 色谱柱品牌的拼音首字母 色谱柱种类 例如：C18-Agilent-注释：如果一天内购入同一种类色谱柱多个，则在日期后编码，例如：C18-Agilent-a、C18-Agilent-b。色谱柱存放和保养 每启用一根新色谱柱，在色谱柱上贴上标签并注明启用日期，启用前依据柱子的使用说明(注射前润湿程序、清洗程序和保养程序)对相关人员进行培训并记录。色谱柱使用一段时间后，常遇到色谱柱被污染，柱效会有一定程度的下降，采用适 当的方法(具体参照柱子的使用说明)对色谱柱进行保护，可以延长色谱柱的使用寿命。如果必要，需进行样品的预处理。溶解的样品进样前用滤膜过滤，以除去不溶物。流动相中如有不纯物质将影响柱效，所以溶剂尽量使用色谱级别的，至少是分析纯级别，流动相使用前用微孔膜过滤。色谱柱分类存放，按不同柱分类，装入对应的包装盒中。随色谱柱说明书也贴上相应的标签放在文件夹中归档(归于检验室档案柜中)保存。每根色谱柱每两个月保养一次，特别是对于一些使用频率少的色谱柱，因为放置时间长，容易干柱，每一次做好保养记录同时记录于色谱柱使用记录。色谱柱使用 柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以 免柱床产生空隙。避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处 掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。大多数反相色谱柱的 pH 稳定范围是 2，尽量不超过该色谱柱的 pH 范围。如使用柱温控制装置时，应注意在通人流动相后才能升温。一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的 20 倍左右，即常规分析需要 50ml75ml。保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进人柱内，使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。在完成分离分析工作之后，不应立即停机，需及时对色谱分析系统进行冲洗，一般 以上，以除去色谱柱内的杂质。如果使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水“过渡”即每天分析开始前必须先用纯水冲洗 30 分钟以上再用缓冲盐流动相平衡；分析结束后必须先用纯水冲洗 30 分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗 30 分钟保护柱子。由于品种对色谱柱有较强的选择性，经试验摸索后，确定每个品种的专用色谱柱，贴上标签，做到专柱专用。延长柱子的寿命。每次使用完色谱柱后，填写色谱柱使用记录。对于确已失效的柱子，申请停用，填写色谱柱停用记录，不能随意丢弃，专门存放。对于使用时间较长柱效降低的柱子，可把它用于检测产品的中间体。色谱柱再生 色谱柱使用一段时间后,常遇到柱子被污染,柱效会有一定程度的下降，采用适当的方法对色谱柱进行保护，可以延长色谱柱的使用寿命。保护柱(预柱)的使用：对于较昂贵的色谱柱，可以在柱前加一保护柱，防止样品中杂质污染分析柱，对于制备柱,因其进样量大，使用保护柱尤为重要。再生处理包括正反两种顺序：硅胶柱（未键合）：正己烷二氯甲烷异丙醇。硅胶基质非极性键合相（C18,C8,C4,C2,C1,PHENYL,CN,NH2）：95%水/5%乙腈（甲醇）乙腈（甲醇）THF；（含蛋白污染物）B 从 10到 90的梯度，A=TFA 水溶液，B=TFA 乙腈溶液。硅胶基质极性键合相（CN，NH2，DIOL 等）：氯仿异丙醇二氯甲烷庚烷。凝胶色谱柱（GPC/GFC 等）：通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂冲洗。建议清洗柱子的其他条件：溶剂体积：推荐使用柱体积的 1020 倍 流速：推荐使用常规流速的 1/51/2 不同流动相转换：推荐换相时浓度梯度由小到大 6 相关文件 无 7 修订历史 版本号 修订原因 修订内容 执行日期 01 1 公司组织架构改变 2 增加文件和记录的适用性，规范性 1 各部门的名称及职责改变 2 文件格式调整、内容优化 年 月 日 8 附件 附件 1 色谱柱台账 编号及版本号：SMP-11-007-R01-01 附件 2 色谱柱使用记录 编号及版本号：SMP-11-007-R02-01 附件 3 色谱柱停用记录 编号及版本号：SMP-11-007-R03-01 附件 1 色谱柱台账 编号及版本号：SMP-11-007-R01-01 页码：1/1 年 接收日期 启用日期 编 号 出厂编号 生产厂家 型 号 规 格 备 注 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 附件 2 色谱柱使用记录 编号及版本号：SMP-11-007-R02-01 页码：1/1 年 色谱柱类型：编号：品牌：型号：使用日期 检品名称 柱压 柱效 维护保养 使用人 备注 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 附件 3 色谱柱停用记录 编号及版本号：SMP-11-007-R03-01 页码：1/1 年 色谱柱类型 编号 品牌 型号 购入日期 停用日期 停用原因 备注 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日 月 日