动物细胞培养和核移植技术讲稿.ppt

关于动物细胞培养和核移植技术第一页，讲稿共二十五页哦2.2 动物细胞工程动物细胞工程2.2.1 动物细胞培养和核动物细胞培养和核移植技术移植技术第二页，讲稿共二十五页哦动物细胞工程通常采用的技 术 手 段 动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合单克隆抗体单克隆抗体动物细胞核移植动物细胞核移植是其他动物细胞工程技术的基础。是其他动物细胞工程技术的基础。第三页，讲稿共二十五页哦第四页，讲稿共二十五页哦动物细胞培养动物细胞培养v概念概念:就是从动物机体中取出相关的组织就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的放在适宜的培养基中培养基中,让这些细胞生长和增殖。让这些细胞生长和增殖。v培养过程：培养过程：第五页，讲稿共二十五页哦 注意关键词:细胞贴壁细胞贴壁 接触抑制接触抑制 原代培养原代培养 传代培养传代培养阅读课文阅读课文44464446页相关内容页相关内容第六页，讲稿共二十五页哦 1、该技术实施的原理是什么？、该技术实施的原理是什么？原理是细胞增殖原理是细胞增殖（有丝分裂）（有丝分裂）。第七页，讲稿共二十五页哦思考：思考：2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？培养材料？1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？特之处？3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基、液体培养基 2、成分中有动物血清等、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体体第八页，讲稿共二十五页哦胚胎组织或幼龄动物组织胚胎组织或幼龄动物组织贴壁生长接触抑制5%CO2维持培养液的pHP46讨论讨论第九页，讲稿共二十五页哦剪碎剪碎剪碎剪碎胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶1010代以后，细胞增殖缓慢，细胞核型可能变化代以后，细胞增殖缓慢，细胞核型可能变化贴壁生长贴壁生长贴壁生长贴壁生长接触抑制接触抑制接触抑制接触抑制2、动物细胞培养过程：、动物细胞培养过程：转入培养液中进行原代培养转入培养液中进行原代培养转入培养液中进行传代培养转入培养液中进行传代培养制成细胞悬液制成细胞悬液胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶胰蛋白酶制成细胞悬液制成细胞悬液第十页，讲稿共二十五页哦一、动物细胞培养一、动物细胞培养1、过程：、过程：动物胚胎或幼龄动物的动物胚胎或幼龄动物的组织、器官组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代细胞代细胞原代培养原代培养50代细胞代细胞传代培养传代培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系单个细胞单个细胞加培养液加培养液遗传物质遗传物质未改变未改变遗传物质遗传物质已改变已改变动物组织细胞间隙中含动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）（分解弹性纤维）第十一页，讲稿共二十五页哦动物细胞培养与植物组织培养的比较：动物细胞培养与植物组织培养的比较：植物细胞培植物细胞培养养动物细胞培动物细胞培养养比较项目比较项目原原 理理培养基培养基结结 果果培养目的培养目的细胞的细胞的全能性全能性细胞的增殖细胞的增殖固体；营养固体；营养物质；激素物质；激素液体；营养液体；营养物质动物血清物质动物血清培养成植株培养成植株培养成细胞培养成细胞系或细胞株系或细胞株快速繁殖，培养快速繁殖，培养无病毒植株等无病毒植株等获得细胞的获得细胞的产物或细胞等产物或细胞等第十二页，讲稿共二十五页哦3 3、动物细胞培养的条件、动物细胞培养的条件（抗生素，更换培养液）（抗生素，更换培养液）无菌、无毒无菌、无毒营养：与体内基本相同营养：与体内基本相同温度和温度和PHPH气体环境气体环境（95%95%空气空气+5%CO+5%CO2 2 ）（36.50.536.50.5，7.2-7.4 7.2-7.4）（合成培养基）（合成培养基）第十三页，讲稿共二十五页哦动物细胞培养技术应用动物细胞培养技术应用va、生产生物制品、生产生物制品vb、与基因工程相结合、与基因工程相结合vc、有毒物质的检测、有毒物质的检测第十四页，讲稿共二十五页哦培养目的培养目的培养基特有成分培养基特有成分培养基性质培养基性质原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养植物组织培养、动物细胞培养的比较植物组织培养、动物细胞培养的比较细胞的全能性细胞的全能性获得细胞或细获得细胞或细胞产物胞产物获得植株或细胞获得植株或细胞产品物产品物动物血清动物血清植物激素植物激素液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基细胞增殖细胞增殖第十五页，讲稿共二十五页哦克隆羊多利克隆羊多利二、细胞核移植技术和克隆动物二、细胞核移植技术和克隆动物第十六页，讲稿共二十五页哦绵羊绵羊绵羊绵羊乳腺细胞乳腺细胞卵细胞卵细胞重组胚胎重组胚胎C C母绵羊子宫母绵羊子宫多莉羊多莉羊克隆羊多利的培育过程细胞核移植细胞核移植胚胎移植胚胎移植(减减中期中期卵母细胞卵母细胞)第十七页，讲稿共二十五页哦动物细胞核移植技术和克隆动物动物细胞核移植技术和克隆动物v动物细胞核移植：动物细胞核移植：是将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞是将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）动物个体（克隆动物）分类：分类：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性困难细胞分化程度高，恢复全能性困难第十八页，讲稿共二十五页哦1 1、概念、概念将一个动物的将一个动物的细胞核细胞核，移入一个已经去掉细胞，移入一个已经去掉细胞核的核的卵母细胞卵母细胞中，使其重组发育成中，使其重组发育成新的胚胎新的胚胎，这个，这个新的胚胎最终发育为新的胚胎最终发育为动物个体动物个体。2 2、结果：、结果：3 3、原理：、原理：克隆动物克隆动物动物细胞核动物细胞核的全能性的全能性二、细胞核移植技术和克隆动物二、细胞核移植技术和克隆动物第十九页，讲稿共二十五页哦4 4、种类、种类体细胞核移植体细胞核移植胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植（难度较高）（难度较高）5 5、体细胞核移植的过程（克隆高产奶牛）、体细胞核移植的过程（克隆高产奶牛）第二十页，讲稿共二十五页哦动物细胞核移植技术和克隆动物动物细胞核移植技术和克隆动物 1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达（Lucinda）的奶牛，年产奶量为）的奶牛，年产奶量为30.8 t，创造了世界奶牛产，创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛，年平均产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛，年平均产奶量一般为十几吨，而我国奶牛产奶量年平均水平仅为奶量一般为十几吨，而我国奶牛产奶量年平均水平仅为34 t。（1）能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗？请说明理由）能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗？请说明理由（2）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你，你将如何对它进）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你，你将如何对它进 行克隆？行克隆？第二十一页，讲稿共二十五页哦卵母卵母细胞细胞去核去核体细体细胞取胞取核核电电刺刺激激使使两两细细胞胞融融合合重组细胞重组细胞重组胚胎重组胚胎新个体新个体第二十二页，讲稿共二十五页哦核移植技术核移植技术克隆羊培育过程克隆羊培育过程黑面绵羊去黑面绵羊去核卵细胞核卵细胞白面绵羊乳白面绵羊乳腺细胞核腺细胞核细胞核移植细胞核移植重组细胞重组细胞电脉冲刺激电脉冲刺激早期胚胎早期胚胎胚胎移植胚胎移植另一头绵羊的子宫另一头绵羊的子宫妊娠、出生妊娠、出生克隆羊多利克隆羊多利第二十三页，讲稿共二十五页哦6 6、应用、应用器官移植器官移植加快家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育加快家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育转基因转基因克隆动物克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白作为生物反应器，生产医用蛋白保护频危物种保护频危物种体细胞核移植技术用于体细胞核移植技术用于人类疾病治疗人类疾病治疗第二十四页，讲稿共二十五页哦感感谢谢大大家家观观看看01.04.2023第二十五页，讲稿共二十五页哦