干细胞动员讲稿.ppt

干细胞动员第一页，讲稿共四十七页哦第一部分 目前所知的影响干细胞动员因素 第二部分 老年多发性骨髓瘤病人的干细胞动员 第三部分 异基因干细胞的动员 第二页，讲稿共四十七页哦第一部分第一部分 目前所知的影响干细目前所知的影响干细胞动员因素胞动员因素 第三页，讲稿共四十七页哦化疗或细胞因子治疗后外周血中补充造血干、祖细胞的临床过程称为动员。干细胞动员是骨髓间充质与造血细胞相互作用的生理过程，其调节着骨和骨髓的再塑过程，也调控着干/祖细胞的增殖和迁移。第四页，讲稿共四十七页哦干细胞动员始于上世纪60年代少数报道:小鼠、狗和猴子的外周血中存在造血干细胞在稳定状态下人类外周血中存有很低水平的干细胞 应用稳定状态下的外周血，在自体、同基因和异基因移植中，多数病例植入失败第五页，讲稿共四十七页哦70年代后期，发现在环磷酰胺和其他药物化疗后，病人循环中的干细胞水平有所增加80年代初期，To等报道白血病病人早期缓解时循环中有高水平的干细胞。该研究小组所行的临床研究第一个证实自体动员后外周血移植可获得细胞植入 第六页，讲稿共四十七页哦起初，动员方案只是基于化疗，但随着Welte等发现人类G-CSF后，动员方案开始包括G-CSF，在今天已成为标准的动员方案。第七页，讲稿共四十七页哦最终的、可再定居的干细胞是迁移的细胞 人类和小鼠胚胎发育后期，干细胞可通过血液循环从胎肝迁移至骨髓，以成熟和不成熟状态定居于骨髓。这些干细胞不是最终的，因为它们不能挽救并再定居于接受致死照射量的受者，其原因是它们没有在受者循环中迁移、归巢和再定居于骨髓的能力。第八页，讲稿共四十七页哦干细胞的运动性（迁移、归巢和释放）是其再定居于骨髓、维持造血系统发展所必备的。第九页，讲稿共四十七页哦循环中的造血干细胞能归巢至骨髓 稳定状态下，循环中干细胞的作用目前尚不明了。实验证实其可迁移至非造血器官，尤其是在炎症后。动物实验发现，循环中低水平的干细胞可不断地植入骨髓中，提示骨髓干细胞的持续释放和再植入的顺序发生是生理过程一部分。第十页，讲稿共四十七页哦在一些应急信号，包括注射G-CSF和SCF，在增加干细胞释放的同时，也增加它们的归巢和植入的能力。这些实验证实了这样的假说：作为应急反应，对骨髓损伤的组织修复可通过循环中的干细胞归巢和再植入增加来完成。第十一页，讲稿共四十七页哦最终的、可再定居的干细胞增殖和迁移的频繁转换与其释放至循环、迁移、归巢和再植入至骨髓等有关，这也是其生理发展的一部分。第十二页，讲稿共四十七页哦骨和骨髓的重塑过程是相互调节的造血干细胞的增殖和释放需要骨髓破坏/重塑的动态循环，这与骨骼重塑中的破骨细胞/成骨细胞相互作用有关这两个过程似乎受同一细胞因子的调节，如MMP-9、G-CSF、SCF、IL-8和SDF-1等 第十三页，讲稿共四十七页哦动员过程中破骨细胞的作用与其数量的增加和化学介质、蛋白水解酶的分泌有关。蛋白水解酶的分泌和激活可导致骨髓基质、黏附分子、细胞因子和化学介素的裂解和退化，从而导致干细胞易于穿过内皮细胞并从骨髓中释放。第十四页，讲稿共四十七页哦应急导致的干祖细胞动员 单一或多重的应急信号可干扰稳态造血，导致骨髓中成熟和不成熟的造血细胞向外周循环的释放增加，这多发生在炎症和损伤时。是免疫防御机制的一部分。如马拉松比赛后，运动员外周中G-CSF的升高可导致白细胞增加，尤其是干细胞增加。第十五页，讲稿共四十七页哦细胞损伤的药物和细胞因子作为应急信号，可增加外周血中的干细胞。这是化疗+G-CSF的动员的基础。第十六页，讲稿共四十七页哦干祖细胞锚定在骨髓微环境，需黏附分子相互作用的激活，这种激活是受SCF和SDF调节的。动员需打断这种平衡。有人证实整和素VLA-4在动员中起重要作用：VLA-4抗体可阻止干细胞表达的黏附分子与基质细胞表达的配体结合，涉及到c-kit受体的信号。第十七页，讲稿共四十七页哦动员的干细胞与骨髓中者相比，VLA-4和c-kit的表达降低。另外动员的干细胞凋亡基因caspase 3、4、8等表达均升高，所以有人认为干细胞释放至外周血是凋亡的途径。第十八页，讲稿共四十七页哦SDF-1/CXCR4是干细胞归巢和动员的关键调控者SDF-1称为基质细胞衍生因子-1，CXCR4是其受体，后者在干细胞表达。动员的干细胞CXCR4表达下降。第十九页，讲稿共四十七页哦许多动物实验表明，增加SDF-1表达或增加CXCR4对SDF-1 反应的因素（药物、细胞因子、转基因动物模型等）均能增加干细胞的动员。而在动员过程中，SDF-1 调节一些蛋白溶解酶的分泌，能使SDF-1失活。第二十页，讲稿共四十七页哦大量研究表明通过SDF-1/CXCR4的相互作用，调控着干细胞的归巢和动员。第二十一页，讲稿共四十七页哦结论骨髓作为成熟和不成熟造血干细胞的细胞库，在应急信号下，释放干细胞至循环并迁移至损伤部位，以构成机体防御和组织修复。第二十二页，讲稿共四十七页哦骨髓的稳态平衡被破坏后，可导致SDF-1的短暂升高，中性粒细胞和破骨细胞的增殖和激活。然后多种因素参与，如蛋白溶解酶的释放、干细胞的增殖、细胞CXCR4表达增加、SDF-1失活、骨髓黏附机制和细胞外基质等。经每一轮的G-CSF刺激，最终导致干细胞的释放。第二十三页，讲稿共四十七页哦第二部分第二部分 老年多发性骨髓瘤病老年多发性骨髓瘤病人的干细胞动员人的干细胞动员 第二十四页，讲稿共四十七页哦造血干细胞采集的最佳方式 目前最佳的采集造血干细胞的基础是决定采集的时机，这个时机基于每日计数供者/病人外周血CD34+细胞的能力。经反复证实，目前所能达到的最佳的预期指标为采集当日早晨外周血中CD34+细胞数/l，这项指标在易于动员和难于动员者中均适用。第二十五页，讲稿共四十七页哦有些作者推荐外周血CD34+细胞在8-20/l时开始采集，以便易于一次采集可获得至少2-4106CD34+细胞/kg。第二十六页，讲稿共四十七页哦采集时间在注射G-CSF后，循环中的白细胞有一迅速下降过程。在每次皮下注射G-CSF后的约3-6小时，有一CD34+细胞动员的高峰，这与G-CSF半衰期相平行。为优化采集，一般认为在注射后至少1小时以后采集比较合理。第二十七页，讲稿共四十七页哦预计那些病人动员效果不佳 在多发性骨髓瘤病人中，年龄因素的影响呈持续的并逐渐增加，但没有一阈值出现CD34+的动员迅速下降。另有两个因素有明显的统计学差别 化疗12个月 血小板计数200109/L者 第二十八页，讲稿共四十七页哦动员方案的选择 化疗+刺激因子的动员明显优于单用刺激因子者 因化疗的毒副反应而终止治疗的缘故，在一些老年病人不适于两者联用。在一部分预期动员效果不佳的骨髓瘤病人中，单用刺激因子所获得的干细胞与化疗+刺激因子者一样多。第二十九页，讲稿共四十七页哦目前的标准药物 G-CSF目前已成为测定其他药物的标准 GM-CSF目前较少单药用于动员，因其动员效果稍逊且副作用较多。EPO有时也用于动员。第三十页，讲稿共四十七页哦替代的药物：SCF新的药物：长效G-CSF。AMD3100（抑制SDF-1a和其受体CXCR4结合）第三十一页，讲稿共四十七页哦再动员目前有争议：立即再动员；2-3周后；如果在移植过程中给予了适量的细胞，有可能在第一次移植的白细胞恢复时，采集到足够的第二次移植所需的细胞。有可能在第一次移植至少一年后，采集足够的干细胞。第三十二页，讲稿共四十七页哦骨髓瘤病人动员的原则1.第一次采集时，尽早进行，即化疗70岁、化疗12个月、血小板计数8106/kg时，急性和慢性GVHD的风险增加。第四十六页，讲稿共四十七页哦谢谢第四十七页，讲稿共四十七页哦