维生素片含量测定的方法验证.ppt

关于关于维生素片含量生素片含量测定的方法定的方法验证现在学习的是第1页，共20页实验原理实验原理维生素维生素B B1 1又称盐酸硫胺又称盐酸硫胺 （thiamine hydrochloridethiamine hydrochloride），化），化学名称为氯化学名称为氯化4-4-甲基甲基-3(2-3(2-甲基甲基-4-4-氨基氨基-5-5-嘧啶基嘧啶基)-)-甲基甲基-5-(2-5-(2-羟基乙基噻唑鎓盐酸盐羟基乙基噻唑鎓盐酸盐现在学习的是第2页，共20页性性 质质溶解性：水中易溶，乙醇中微溶，乙醚中不溶溶解性：水中易溶，乙醇中微溶，乙醚中不溶硫色素反应：硫色素反应：紫外吸收特性：紫外吸收特性：A Amaxmax=246nm=246nm与生物碱沉淀试剂反应与生物碱沉淀试剂反应氯化物特性：氯化物特性：特征性鉴别特征性鉴别特征性鉴别特征性鉴别含量测定含量测定含量测定含量测定氯化物检查氯化物检查氯化物检查氯化物检查现在学习的是第3页，共20页原理原理特征性鉴别特征性鉴别硫色素反应硫色素反应维生素维生素B B1 1在在碱液碱液中可被铁氰化钾氧化生成硫色素，色素中可被铁氰化钾氧化生成硫色素，色素转溶于转溶于正丁醇正丁醇(或异丁醇、异戊醇或异丁醇、异戊醇)中，显现于酸中消中，显现于酸中消失的失的蓝色荧光蓝色荧光。（见刘文英主编。（见刘文英主编药物分析药物分析第六版，第六版，P P258258）含量测定含量测定维生素维生素B B1 1有紫外吸收，有紫外吸收，A Amaxmax=246nm=246nm，现在学习的是第4页，共20页实验方法实验方法1.1.鉴别反反应取本品约取本品约5mg5mg，加氢氧化钠试液，加氢氧化钠试液2.5ml2.5ml使其溶解，使其溶解，加铁氰化钾试液加铁氰化钾试液0.5ml0.5ml与正丁醇与正丁醇5ml5ml，强力振摇，强力振摇2min2min，放置使成两液层，上层醇液即显强烈的蓝色荧，放置使成两液层，上层醇液即显强烈的蓝色荧光，光，加酸使成酸性荧光即消失加酸使成酸性荧光即消失，再加碱使成碱性，再加碱使成碱性，则荧光复现。则荧光复现。现在学习的是第5页，共20页含量测定含量测定 1.精密称取片粉40.98mg(相当于维生素B125mg，标示量为每1g药物中含有0.164g维生素B1)，置100ml量瓶中 加盐酸溶液（91000）约70ml，摇匀15分钟使维生素B1溶解，并定容至刻度，摇匀 干燥滤纸过滤精密量取续滤液5.0ml，置100ml量瓶中，盐酸溶液（91000）定容至刻度，摇匀 得到供示品溶液。现在学习的是第6页，共20页含量测定含量测定2.2.精密称取维生素取维生素B1B1对照品对照品25mg25mg，置100ml量瓶中，盐酸溶液（91000）定容至刻度，摇匀 得到对照品溶液。3.将2份溶液用紫外分光光度计在246nm处分别测定吸光度，计算即得。现在学习的是第7页，共20页实验内容与要求实验内容与要求鉴别试验鉴别试验吸收波长选择吸收波长选择精密度试验：用同一份样品溶液测定精密度试验：用同一份样品溶液测定6 6次，计算次，计算RSD%RSD%重复性试验：引用其他组同学数据（称样量，吸光度）重复性试验：引用其他组同学数据（称样量，吸光度）计算标示量计算标示量%，计算，计算RSD%RSD%稳定性试验：考察样品溶液稳定性试验：考察样品溶液30min30min内的稳定性，计算内的稳定性，计算RSD%RSD%加样回收率试验：根据重复性试验的结果，设计加样加样回收率试验：根据重复性试验的结果，设计加样回收率试验回收率试验含量测定：根据测定结果计算含量，标示量含量测定：根据测定结果计算含量，标示量%。如何引用？如何引用？如何引用？如何引用？现在学习的是第8页，共20页 线性性关关系和范系和范围分析方法的分析方法的验证1 精密度精密度试验2 重重现性性试验3 加加样回收回收试验4 稳定性定性试验5现在学习的是第9页，共20页线性与范围线性与范围精密称取片粉40.98mg(相当于维生素B125mg)，置100ml量瓶中 加盐酸溶液（91000）少量，使维生素B1溶解，并定容至刻度，摇匀 分别取上述溶液3.00ml、4.00ml、5.00ml、6.00ml、7.00ml置于100ml容量瓶中，加盐酸溶液（91000）至刻度，摇匀将其置于紫外分光光度计中在246nm处测量并用C做A的回归曲线。现在学习的是第10页，共20页线性性关关系系序号序号1 12 23 34 45 5浓度浓度（mg/mlmg/ml）测定值测定值现在学习的是第11页，共20页稳定性试验稳定性试验精密称取片粉40.98mg(相当于维生素B125mg)，置100ml量瓶中 加盐酸溶液（91000）少量，使维生素B1溶解，并定容至刻度，摇匀 将其置于紫外分光光度计中在246nm处测量在0、15、30、45、60min时间点分别测定样品的A246在0、1、2、4、8、12h分别测定样品的峰面积.RSD 2.0%RSD 2.0%RSD 2.0%RSD 2.0%RSD 2.0%RSD 2.0%RSD 2.0%，则需要重新选取时间点进行计算，直到则需要重新选取时间点进行计算，直到RSD RSD 2.0%2.0%，否则要尽快测定，否则要尽快测定现在学习的是第12页，共20页精密度试验精密度试验目的目的检测仪器、试剂、操作人员、实验条件等的可信程度检测仪器、试剂、操作人员、实验条件等的可信程度要求要求用对照品按样品溶液的制备方法制备对照品溶液，同浓用对照品按样品溶液的制备方法制备对照品溶液，同浓度至少平行操作度至少平行操作6 6份，份，浓度与信号值要在线性范围内浓度与信号值要在线性范围内RSD 2.0%RSD 2.0%仪器分析仪器分析现在学习的是第13页，共20页 同批、同法同批、同法序号时间(min)信号值平均信号值RSD（%）RSD（%）1234567稳定性定性试验现在学习的是第14页，共20页重现性试验重现性试验目的目的考察样品溶液制备方法的可靠程度考察样品溶液制备方法的可靠程度要求要求同批样品按相同方法制备样品溶液，至少同批样品按相同方法制备样品溶液，至少6 6份份,浓度与信号值均要在线性范围内浓度与信号值均要在线性范围内RSD 2.0%RSD 2.0%仪器分析仪器分析现在学习的是第15页，共20页重重现性性试验(示例示例)试验序号称样量（g）测定值（mg）含量（mg/g）平均含量（mg/g）RSD（%）10.166622.04132.29134.530.3%2.0%20.166724.82148.8930.166921.90131.2240.174223.54135.1350.166720.86125.136现在学习的是第16页，共20页精密度精密度试验（示例（示例）实验序号信号值平均值RSD10.5120.5100.2%(2.0%)20.50830.51140.50950.51060.509现在学习的是第17页，共20页加样回收率试验加样回收率试验目的目的考察准确度，即用该方法测定的结果与真实值或参考察准确度，即用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度考值接近的程度要求要求设计高、中、低三个浓度，每个浓度各分别制备三设计高、中、低三个浓度，每个浓度各分别制备三份供试品溶液进行测试，计算回收率份供试品溶液进行测试，计算回收率RSD 2.0%RSD 2.0%现在学习的是第18页，共20页加加样回收回收试验序号称样量（g）待测组分含量（mg）对照品加入量（mg）测得量（mg）回收率（%）平均加样回收率（%）RSD（%）10.1665.2820.250015.027.2100.130.251240.250953.0450.250015.029.898.660.250070.250442.8480.250015.033.1100.090.2510取含量测定时一半的称样量，取含量测定时一半的称样量，0.5g/20.5g/298102%98102%现在学习的是第19页，共20页感谢大家观看现在学习的是第20页，共20页