食品检验工高级技能5.pdf

1 模拟 食品检验工高级技能5 训练 1训练 1 面包中铅含量的测定第 1 题：1仪器与试剂的准备(1)仪器所用玻璃仪器均以 10%20%(体积分数)硝酸浸泡 24h以上，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗，晾干后方可使用。原子吸收分光光度计。测定条件：灯电流7.5mA，波长 283.3nm，狭缝 0.2nm。石墨炉操作条件：于 120干燥 20s，于 450灰化 20s，于 2300原子化 5s。由于某些样品或因样品量增加干扰增大，如加基底改善剂后的石墨炉条件可以自行决定。氘灯背景校正(也可根据仪器型号，调至最佳条件)。(2)试剂硝酸、6mol/L 硝酸、硝酸(1+199)(V/V)、10%硝酸(V/V)、过硫酸铵、5g/L 硫酸钠溶液、石油醚、铅标准溶液(每毫升相当于 1mg铅)、铅标准使用液(每毫升相当于 1g 铅)。参考答案：1操作步骤称取 1.05.0g 样品，置于石英或瓷坩埚中，加5mL硝酸，放置 0.5h，小火蒸干，继续加热炭化，移入高温炉中，手 500灰化 1h，取出放冷，再加 1mL硝酸浸湿灰分，小火蒸干。称取2g 过硫酸铵，覆盖灰分，再移入高温炉中，于 800灰化 20min，冷却后取出，以硝酸溶液(1+199)少量多次洗入10mL 容量瓶中，并稀释至刻度，备用。取与消化样品用相同量的硝酸、过硫酸铵，按同一方法做试剂空白试验。吸取 0.0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL 铅标准使用液，分别置于100mL容量瓶中，加硝酸(1+199)稀释至刻度，混匀(当各取 50L 注入石墨炉时，其曲线各点的铅含量为0.0ng、0.25ng、0.50ng、1.00ng、1.50ng、2.00ng)。将处理后的样液、试剂空白液和各容量瓶中铅标准稀释液分别导入火焰进行测定。以铅含量对测得的吸光度绘制标准曲线比较定量。平行测定两次，两次测定的结果之差不得超过平均值的20%。2 数据记录及处理 (1)数据记录(2)以各标准溶液中铅的质量为横坐标，测得各标准溶液的吸光度A 为纵坐标，绘制标准曲线。根据空白测定液和各样品测定液的吸光度，从标准曲线上查出空白测定液和各样品测定液中铅的质量。(3)按下式计算样品中铅的含量式中m溶液从标准曲线上查出样品测定液中铅的质量(ng)；m空白从标准曲线上查出空白溶液中铅的质量(ng)；m 样品样品质量(g)。(4)计算平行测定结果的平均值和两次测定结果之差与平均值的百分比。详细解答：2 训练 2训练 2 糖果中砷含量的测定第 2 题：1仪器与试剂的准备(1)仪器可见分光光度计、测砷装置。(2)试剂6mol/L 盐酸、氧化镁、硝酸镁溶液、150g/L 碘化钾溶液、酸性氯化亚锡溶液、100g/L 乙酸铅溶液、乙酸铅棉花、无砷锌粒、二乙氨基二硫代甲酸银-三乙醇胺-三氯甲烷溶液、砷标准溶液(每毫升相当于 0.1mg 砷)、砷标准使用液(每毫升相当于 1.0 g 砷)。参考答案：1操作步骤称取 5.0g 磨碎样品，置于坩埚中，加1g氧化镁和 10mL硝酸镁溶液，混匀，浸泡 4h，于低温或水浴锅上蒸干。用小火炭化至无烟后转移至高温炉中，于 550灼烧 34h，冷却后取出。加 5mL水湿润灰分，用玻璃棒搅拌，用少量水将附着在玻璃棒上的灰分洗至坩埚中，于水浴蒸干后移入高温炉内，于550灰化 2h，冷却后取出。加5mL水湿润灰分，慢慢加入10mL6mol/L盐酸溶液，将溶液移入 50mL容量瓶中，坩埚用 6mol/L 盐酸洗涤 3 次，每次 5mL，再用水洗涤 3 次，每次 5mL，洗液均并入容量瓶中，加水至刻度，摇匀。此溶液10mL相当于 1g 样品，相当于加入盐酸量(中和需要量除外)1.5mL。此溶液全量用于银盐法测定时，不需要再加盐酸。取与消化样品用相同量的氧化镁和硝酸镁溶液，按同一操作方法做试剂空白试验。取灰化消化液和空白液分别置于150mL锥形瓶中。吸取 0.0mL、2.0mL、4.0mL、6.0mL、8.0mL、10.0mL 砷标准使用液(相当于 0.0 g、2.0 g、4.0 g、6.0g、8.0 g、10.0g 砷)，分别置于 150mL锥形瓶中，加水至43.5mL，再加 6.5mL盐酸。在灰化消化液、空白液和砷标准使用液中各加 3mL150g/L碘化钾溶液和 0.5mL 酸性氯化亚锡溶液，混匀，静置15min。各加 3g锌粒，立即分别塞上装有乙酸铅棉花的导气管，使管尖端插入盛有 4mL银盐溶液的离心管的液面下。在常温下反应 45min 后，取下离心管，加三氯甲烷补足 4mL。用 1cm比色皿，以“0”管调节零点，于520nm处测定其吸光度，绘制标准曲线比较定量。平行测定两次，两次测定的结果之差不得超过平均值的 10%。2 数据记录及处理 (1)数据记录(2)以各标准溶液中砷的质量为横坐标，测得各标准溶液的吸光度A 为纵坐标，绘制标准曲线。根据空白溶液和各样品溶液的吸光度，从标准曲线上查出空白溶液和各样品溶液中砷的质量。(3)按下式计算样品中砷的含量式中m 样品溶液 从标准曲线上查出样品溶液中砷的质量(g)；m 空白从标准曲线上查出空白溶液中砷的质量(g)；m样品样品质量(g)。(4)计算平行测定结果的平均值和两次测定结果之差与平均值的百分比。3 详细解答：训练 3训练 3 面包中沙门氏菌的检验第 3 题：1仪器与试剂的准备(1)仪器紫外光灯(波长 366nm，功率 6W)、放大镜(34X)、毛细滴管。(2)试剂缓冲蛋白胨水、氯化镁孔雀绿(MM)增菌液、四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液、SS琼脂培养基 含 1%(质量分数)蔗糖、HE琼脂培养基、MUCAP 试剂、氧化酶试纸、三糖铁琼脂培养基。参考答案：1操作步骤(1)增菌 称取 25g 打碎样品，置于装有225mL缓冲蛋白胨水的 300mL三角瓶内，于(361)培养 4h。吸取 10mL，转种于 100mL氯化镁孔雀绿增菌液或四硫磺酸钠煌绿增菌液中，于42培养 1824h。同时另取 10mL，转种于 100mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液中，于(361)培养 1824h。(2)分离培养 将增菌培养液摇匀，挑取一接种环，划线接种于SS和 HE琼脂培养基各一个，于(361)培养(242)h。观察各琼脂平板上有无可疑沙门氏菌菌落。如无可疑菌落，应再继续培养(242)h。(3)鉴定 从培养的分离培养基上选可疑沙门氏菌菌落(尽量选较大、分离较好的单个菌落)，用玻璃笔做好标记并编号。用毛细滴管吸取 MUCAP 试剂，加一滴于编号的菌落上。待一个平板的被检菌落全部滴加试剂后，将平板拿到 366nm紫外光灯下检视。发蓝色荧光的为 MUCAP 试验阳性，将阳性菌落号记录下来。用接种环挑取荧光反应阳性菌落，涂于氧化酶试纸上，观察涂菌点是否变蓝色。于 10min 内变蓝色为氧化酶试验阳性；不变色为阴性。MUCAP试验阴性的样品，报告为“未检出沙门氏菌”。MUCAP 试验阳性、氧化酶试验阴性的样品，继续进行生化和血清学试验。(4)生化学试验挑取选择性琼脂平板上的可疑菌落，接种在三糖铁琼脂斜面和底层穿刺。同时再接种蛋白胨水(供靛基质试验用)、尿素琼脂培养基(pH=7.2)、氰化钾培养基、赖氨酸脱羧酶试验培养基和对照培养基各1 管，于(361)培养 1824h，必要时可延长至 48h。判断生化反应结果。(5)血清学试验采用 1.5%(质量分数)琼脂斜面培养物做玻片凝集试验用的抗原。血清不凝集时，将菌株接种到琼脂量高(质量分数为 2.5%3.0%)的培养基上再检查。若是由于存在 V抗原而阻止了凝集反应，则可挑取菌苔于1mL生理盐水中，制成浓菌液，于酒精灯火焰上煮沸后再检查。H抗原发育不良时，将菌株接种到 0.7%0.8%(质量分数)的半固体琼脂平板的中央，使菌落蔓延生长，在其边缘部分取菌检查。或将菌株通过装有0.3%0.4%(质量分数)的半固体琼脂的小玻管12 次，自远端取菌培养后再检查。用 AF多价血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水作为对照。在生理盐水中自凝集的为粗糙型菌株，不能分型。凡AF 多价血清呈凝集的，可依次用O因子血清进行凝集试验，根据结果判定 O群。若不被 AF 多价 O因子血清凝集，则可用 57 种或 163 种沙门氏菌因子血清中的7 种多价血清检查。若有其中一种血清凝固，则用这种血清包括的O群血清逐一检查，以确定 O群。根据所确定的 O群，依次4 用 H因子血清检查第1 相和第 2 相的 H抗原。对不常见的菌型可先用163 种沙门氏菌因子血清中的8 种多价 H血清检查。如其中某种多价血清凝集时，则再用这种血清所包括的H因子血清逐一检查，以确定第 1 相和第 2 相的 H抗原。无单因子血清时，要用 2 个 H复合因子血清核对其检查的结果。如果仅检出第 1 相和第 2 相时，可在琼脂斜面上连续接种12 代后再检查。如任为一相，要用位相变异的方法检查另一相的H抗原。将两端开口的小试管(下端开口要留一缺口，不要平齐)放在半固体琼脂培养基管内，小试管的上端应高出培养基表面，灭菌，备用。溶化琼脂，冷却至50，挑取已知H因子血清 1 环，涂于套管中的琼脂表面，在 37下培养，每日观察。另一相解离后可由套管外的半固体琼脂表面取菌检查。用 Vi 因子血清检查。已知具有 Vi 抗原的菌型有伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、都柏林沙门氏菌。综合生化试验和血清学分型鉴定的结果，按照沙门氏菌属抗原表判定菌型，并报告结果。详细解答：