兽医微生物学考试1讲课稿.doc

Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。兽医微生物学考试1-1菌株：指不同来源的某一种细菌的纯培养物。2无菌操作：指防止微生物进入机体或其它物品的操作方法。3生长曲线：将细菌接种在液体培养基中培养，以培养的时间为横坐标，以活菌数的对数为纵坐标得出的曲线。4.侵袭力：是指病原菌在机体内定居，突破机体的防御屏障，内化作用，繁殖和扩散的能力。5.共生：两种或多种微生物共同生活在一起，彼此间互不伤害或互为有利的关系。6.菌落：单个细菌在固体培养基上经一定时间培养后形成的一个肉眼可见的细菌集落。7.转导：以噬菌体为媒介，将供体菌DNA片段转移给受体菌，使受体菌获得新的遗传性状的过程。8.感染：指病原微生物在宿主体内持续存在或增殖。微生物：在自然界中除了我们肉眼可见的动植物等一些较大的生物体外，还有许多形体细小、结构简单、肉眼不能直接看见，需借助显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍后才能观察的微小生物，统称为微生物。9荚膜：一部分细菌在其生活过程中,可在细胞壁的外面产生一种粘液样的物质，包围整个菌体，称为荚膜（2分）；保护细菌免受有害环境因素的影响，与细菌毒力有关，荚膜具有抗原性（1分）。10毒素：某些细菌在生长过程中产生的对动物机体呈现毒性作用的物质（2分），包括外毒素和内毒素（1分）。11侵袭力：指微生物突破宿主机体防卫屏障，侵入宿主活组织并在其中生长繁殖和向四周扩散的能力（2分），包括侵袭性酶和菌体表面结构（1分）。12真菌：真菌是一大类具有细胞壁，不含叶绿素，没有根、茎、叶，营腐生或寄生生活的真核微生物（2分）；仅少数类群为单细胞，大多数呈分枝或不分枝的丝状体（1分）。13生长曲线：如果将细菌接种在液体培养基并置于适宜的温度条件（1分），定时取样检查活菌数，可发现其生长过程具有一定的规律性（1分）；以时间为横坐标，以活菌数为纵坐标，可绘制出一条曲线，称为“生长曲线”（1分）。14干扰素：是由病毒或诱生剂刺激人或动物有核细胞产生的糖蛋白（2分），因能干扰病毒在非感染组织的复制，故称为干扰素（1分）。15病毒：病毒是没有细胞结构但有遗传、自我复制等生命特征的微生物，是目前已知的最小的生命体（2分）。以病毒颗粒的形式存在，具有一定的形态、结构和传染性，必须借助电子显微镜才能观察到（1分）。16内基氏小体：也称为包涵体（1分），指某些病毒感染细胞中，在普通光学显微镜下可见胞浆或胞核内出现嗜酸或嗜碱性染色、大小不同和数量不等的圆形或不规则的团块结构（2分）。17空斑试验：细胞单层接种病毒后再覆盖一层含营养液的琼脂层（1分），感染细胞释放的病毒不能悬浮于液体中，只能感染邻近的细胞（1分）；以致感染区由原始病灶向四周扩大，形成类似细菌的菌落（1分）。18微生物：是个体细小、肉眼看不见、必须用光学或电子显微镜才能观察到的（1分）一群结构比较简单、繁殖迅速的最微小的生物总称。（1分）19菌落与菌苔：单个或多个细菌接种在固体培养基上，在适宜条件下，经过一定时间培养后形成的单个，肉眼可见的细菌细胞集聚体称为菌落。菌落彼此相连形成片叫菌苔20IMVIC试验：是一组区别大肠杆菌和产气杆菌的生化试验（1分），I吲哚试验，MM.R（甲基红）试验，VI二乙酰试验，C枸橼酸盐试验（1分）。21免疫活性细胞：在免疫细胞中，受抗原刺激后，能特异地识别抗原决定基（1分），并能分化增殖，发生特异性免疫应答，产生抗体或淋巴因子的细胞。（1分）22巴氏消毒法：是以较低温度杀灭液体食品及物品内的病原菌或特定微生物（1分），而又不破坏其营养成分及有效成分的消毒方法。因为这种方法是由巴斯德创立的，故称为巴氏消毒法。23单克隆抗体：是由淋巴细胞杂交瘤产生的（1分），只针对复合抗原分子上某一单个抗原决定基的特异性抗体。（1分）24正常微生物群：是指微生物与其宿主在共同历史进化过程中形成的生态系，这个生态系是由微生物和宏生物共同组成的，其中微生物群称为正常微生物群。25灭活疫苗：又称死苗。用物理的或化学的方法将病原微生物杀死后，病原微生物仍保持其抗原成分的免疫原性。（1分）用物理的或化学的方法将病原微生物杀死,并用其制成的疫苗,称灭活苗。（1分）26抗原：是一类能刺激机体的免疫系统（使之发生免疫应答）产生抗体或致敏淋巴细胞，（1分）并能与相应抗体或致敏淋巴细胞在体内或体外发生特异性反应的物质。（1分）27外毒素与内毒素：前者由某些病原菌在新陈代谢过程中产生，并分泌到菌体外环境中的一类毒性代谢产物。（1）后者是一类由革兰氏阴性菌在正常代谢过程中产生，在细菌生活状态下不释放或不分泌到外界环境中去，只有菌体细胞自溶、死亡崩解，或人工方法(超声波处理、反复冻融、研磨等)破坏其细胞的完整性时，才释放出来的毒素。（1）1.简述革兰氏阴性菌细胞壁的结构特点。革兰氏阴性菌的细胞壁较薄，其结构和成分较复杂，由外膜和周质间隙组成（2分）。外膜由脂多糖、磷脂、蛋白质和脂蛋白等复合构成，周质间隙是一层薄的肽聚糖（1分）。脂多糖为革兰氏阴性细菌所特有，位于外膜的最表面（1分），由类脂A和多糖组成，其中类脂A是内毒素的主要毒性成分（1分）2.什么是类毒素？有何用途？外毒素经0.3-0.4%甲醛溶液处理，使其毒性完全丧失，而保留其抗原性称之为类毒素。（2分）用途：类毒素注入机体后，可刺激机体产生抗毒素，因此可作为疫苗进行免疫接种（2分）；也可用来生产高效价的抗毒素，用于紧急治疗和预防。（1分）3.简述常用的几种巴氏消毒法。（1）低温维持巴氏消毒法：在63-65保持30min，然后迅速冷却至10以下。（1.5分）（2）高温瞬时巴氏消毒法：在71-72保持15s，然后迅速冷却至10以下。（1.5分）（3）超高温巴氏消毒法：在132保持1-2s，然后迅速冷却至10以下，这样在常温下的保存期可达半年。（2分）4.简述金黄色葡萄球菌毒力强弱的鉴定要点。（1）凝固酶试验：阳性（1分）（2）菌落颜色：金黄色（1分）（3）溶血试验：溶血（1分）（4）生化反应：分解甘露醇（1分）（5）动物试验：家兔皮下接种1.0ml24h培养物，可引起局部皮肤溃疡坏死；静脉接种0.10.5ml，于2448h死亡。剖检可见浆膜出血，肾、心肌及其他脏器出现大小不等的脓肿。（1分）5.什么是瑞氏染色？试举例说明其在微生物实验室诊断上的应用。瑞氏染色：细菌抹片自然干燥后滴加瑞氏染色液于其上，经1-3分钟（为了避免很快变干，染色液可稍多加些，或者看情况补充滴加），再加约与染液等量的中性蒸馏水，轻轻晃动玻片，使与染液混匀，经5分钟左右，直接用水冲洗，吸干，镜检。细菌染色成蓝色，组织、细胞等物呈其他颜色。（3分）在微生物实验室诊断上的应用：如怀疑为巴氏杆菌（或里氏杆菌）感染时，可直接取病料（心血、肝脏或脾脏等）作涂片，进行瑞氏染色后镜检，若发现菌体为两极浓染的小杆菌，且为蓝色，则可初步确定该菌为巴氏杆菌（或里氏杆菌）。在此基础上再进一步作分离培养等鉴定。（2分）6送检一病(死)猪，临床诊断怀疑是仔猪黄痢，如何进行微生物学诊断？怀疑是仔猪黄痢，即怀疑其病原为致病性大肠杆菌，微生物学诊断如下:(2分)（1）分离培养：取其小肠内容物或黏膜刮取物以及相应肠段的肠系膜淋巴结，分别在麦康凯平板和血液琼脂平板上划线分离培养。若在麦康凯平板上长出红色菌落或在血液平板上长出呈溶血的菌落，即为可疑菌落。(3分)（2）镜检：挑取平板中的可疑单菌落作细菌抹片，进行革兰氏染色镜检，发现菌体为着色均一的红色球杆菌（G-菌），且多单在。(2分)（3）分离细菌的纯化与生化鉴定：挑取平板中已作镜检的可疑单菌落接种于普通琼脂斜面中进行纯培养，然后挑取纯培养物分别接种于几种常用的生化培养基和单糖发酵管中，进行MR试验、VP试验、吲哚试验和单糖发酵试验等。以确定分离株是否为大肠杆菌。(2分)（4）血清型鉴定：使用单因子抗O血清对分离株作血清型鉴定。(1分)（5）动物试验：用灭菌生理盐水洗下纯培养物，取0.2-0.5ml注射敏感的实验动物（家兔或仔猪），待动物死亡后，再进行剖检，进一步作分离培养鉴定以确诊。(2分)7某猪场断奶仔猪发生疾病，经兽医诊断疑似仔猪水肿病，请用微生物学方法确诊？答：仔猪黄痢是由“产志贺毒素大肠杆菌（STEC）”引起的一种肠毒血症，多发于断奶后1周的仔猪。该病的确诊主要在于STEC的分离培养及其毒力因子的检测。（1分）（1）取发病仔猪十二指肠黏膜病料，在麦康凯平板上进行划线分离培养；（1分）（2）挑取可疑菌落（通常为红色）进行纯培养以及革兰氏染色，如发现G中等大小杆菌，继续以下试验；（2分）（3）纯培养物接种三糖铁琼脂以及常用的生化培养管；如果三糖铁琼脂斜面变黄、底部变红、产气、不产H2S，能够发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖产酸产气，尿素酶阴性；可继续以下鉴定；（2分）（4）如IMViC试验为模式，可继续血清学检查（O:K:H），判定其血清型；（2分）（5）毒力因子的检测：黏附素菌毛通常为F18等（1分）；只有最终确定所分离的大肠杆菌确实可产生志贺毒素（Stx2e），才能最终确定为产肠毒素大肠杆菌。（2分）8某鸡场20日龄肉用仔鸡，怀疑发生了传染性法氏囊炎，请用微生物学方法确诊？答：检测程序（1）症状观察和病理解剖，观察剖检病变；（0.5分）（2）采样：以无菌方式采集病变严重和含毒量高的组织(法氏囊、脾、肾等)进行实验室诊断；（1分）（3）细菌分离：对病料进行平板培养分离细菌；（0.5分）（4）病料的无菌预处理：将病料加入5-10倍的生理盐水研磨均匀，离心取上清并加入一定浓度的抗生素作用一段时间或直接通过过滤除菌，进行无菌预处理；（1分）（5）病毒分离：绒毛尿囊膜接种9-11日龄SPF或无抗IBDV抗体的鸡胚，接种后24h照胚，弃去死胚，留下24h以后死亡鸡胚，并收集尿囊膜和尿囊液进行下述检测；病毒特异性检测：（1）使用已知的抗IBDV多抗或单抗与临床分离的病毒进行琼脂扩散试验（2分）；（2）对所分离的病毒，也可通过其它特异的实验室方法鉴定病毒，如病毒中和试验、免疫荧光试验、ELISA、核酸检测试验（PCR、核酸杂交检测法）等。（1分）判定标准（1）通过症状与剖检病变进行初步诊断（1分）；（2）细菌分离培养为阴性（1分）；（3）如果琼脂扩散试验中的抗原孔和抗体孔之间出现白色沉淀线，或其它特异的诊断结果为阳性，即可判定所分离的病毒为IBDV（1分）。􀁺综上所述，可确断为传染性法氏囊炎。9何谓革兰氏染色法原理和用途如何？（10分）答：原理：革兰氏阴性菌细胞壁内含脂类较多，在革兰氏染色中易被脱去初色，用复红染色后为红色菌体（2分），而革兰氏阳性菌细胞壁脂类少，粘肽多，酒精难以脱去初色，仍为兰紫色（2分）。作用：通过革兰氏染色可以把细菌分为两大类，为病原微生物的诊断奠定基础。（2分）10叙述补体结合反应的原理及判定方法。（10分）原理：抗原抗体复合物可以激活补体，被活化的补体成分可与抗原抗体复合物结合，但不能与单独的抗原与抗体结合。（2分）其原理是根据补体是否被结合来说明待检系统中的抗原抗体是否相应，而补体是否被结合则通过指示系统是否溶血来反应（2分）。要素：补体，待检系统（已知抗原和未知抗体或已知抗体和未知抗原）及指示系统（绵羊红细胞和溶血素）（2分）判定方法：如待检系统抗原中抗原与抗体对应，发生特异性结合，补体被消耗，指示系统不溶血，补反阳性；（2分）如待检系统抗原抗不结合，则补体存在，指示系统溶血，补反阴性。（2分）11叙述免疫学的实际应用（10分）答：免疫学的实际应用包括免疫诊断、免疫预防、免疫治疗三个方面。免疫诊断包括血清学诊断和变态反应诊断两项内容。血清学反应的要点用已知抗血清鉴别病原微生物或抗原成分或用已知抗原检查病畜血清中抗体，总之二者必具其一。血清学常用的方法：沉淀反应、凝集反应、补反结合反应、标记抗体技术、中和反应等，变态反应是细胞免疫反应的诊断方法，用变应原给动物点眼或注射观察其是否发生特异性变态反应而诊断疾病。如牛结核、布氏杆菌的诊断均可用此法。免疫预防：是采用通过给健康家畜注射疫苗，使家畜获得特异性免疫力的一种方法，所用疫苗包括死疫苗（灭活苗）、活疫苗（弱毒苗）进行免疫，以获得特异性免疫力。近年来，又研制有基因工程疫苗、亚单位疫苗、化学疫苗、合成肽苗等，可进一步提高免疫效果。免疫治疗，主要采用传染病痊愈后动物血清或高免血清对传染病进行治疗的方法（IBD的高免血清、高免卵黄）其特异强、效果显著。也可用其它免疫球蛋白、干扰素、胸腺肽、细胞介素、转移因子等对传染病进行治疗，使传染病迅速恢复，这也属于免疫学方法。评分标准:此题为考察考生综合问答的能力只要具备三个方面内容都可适当给分。12叙述抗体形成的一般规律。掌握此规律有何实际意义？（10分）形成规律：i.初次反应抗原初次进入机体后，需要经过一定的潜伏期才产生抗体，其长短与抗原性有关，初次反应产生抗体少，持续时间也短。ii.再次反应相同抗原第二次进入机体，开始时可出现原有抗体量降低，后IgG大量增加，可比初次多几倍到几十倍，且在机体内保留时间长，IgM很少增加。iii.回亿反应抗原刺激而产生抗体经过一段时间后可逐渐消失，此时再接触抗原可以使相应抗体大量上升iv.实践意义：观察机体内抗体产生动态，实践中有一定意义，例如预防接种时，做二次或二次以上接种，比一次接种效果好。又如在应用血清学反应诊断传染病时，采用双份血清，若第二次比第一次高4倍或以上，则有诊断意义。13叙述炭疽病、禽霍乱、猪瘟、鸡新城疫病的微生物学诊断方法。（每种传染病最少2个诊断方法）。（10分）二填空题（每小题2分共20分）1微生物的主要类群包括：细菌、放线菌、真菌、螺旋体、霉形体、立克次氏体、衣原体、病毒和少数藻类。2动物的胸腺是中枢免疫器官，脾脏是外周免疫器官。3细菌特殊结构包括荚膜、芽孢、鞭毛、纤毛等。4机体对结核分枝杆菌免疫的特点是细胞免疫、带菌免疫与变态反应同时存在两大特点5培养细菌常用的培养基可分为基础培养基、鉴别培养基、选择培养基、营养培养基、厌氧培养基五种。6变态反应的类型包括型（过敏型）、（细胞毒型）、（免疫复合物型）、（迟发型）型。7炭疽杆菌的致病因素主要有荚膜和毒素两部分构成。8一个抗原分子一般是由抗原决定基与载体蛋白两大部分组成。9链球菌所引起的溶血现象，可以分为、三种（错一项扣1分）10目前我国规定：生活饮用水的标准为1毫升水中细菌总数不超过100个，大肠杆菌指数不超过3个，大肠杆菌价不低于300。一单选1.于1861年用著名的弯颈瓶试验证明了微生物是来源于微生物的种子，否定了自然发生论的是_C_。A.吕文虎克B.琴纳C.巴斯德D科赫2.属于非细胞形态结构的微生物是_D_。A细菌B真菌C衣原体D病毒3.在高压蒸汽灭菌时，通常采用的压力为每平方英寸15磅，其相应的温度约为CA100B115C121D1264.病原菌在适宜的液体培养基中生长繁殖，其致病力最强时是处于生长曲线的_B_A迟缓期B对数期C稳定期D衰亡期5.凡能从无机物中取得碳源的细菌称为_A_。A.自养菌B.异养菌C.腐生菌D.寄生菌6.干热灭菌法适用于灭菌_C_。A.工作服B.培养基C.玻璃器皿D.橡皮器材7.牛出败的病原是_C_。A大肠杆菌B化脓性链球菌C多杀性巴氏杆菌D金黄色葡萄球菌8.莱姆病的病原是B。A猪痢蛇形螺旋体B伯氏疏螺旋体C钩端螺旋体D兔梅毒螺旋体9.鸡白痢沙门氏菌在麦康凯琼脂上不能形成红色菌落，是因为沙门氏菌不能利用培养基中的_C_。A葡萄糖B甘露醇C乳糖D蔗糖10.整合在宿主菌染色体上的噬菌体基因组，被称为B。A亲代噬菌体B前噬菌体C温和噬菌体D烈性噬菌体11.在固体培养基上能形成“油煎蛋状”菌落的微生物是D。A立克次氏体B大肠杆菌C猪痢短螺旋体D鸡毒支原体12.有关细菌“双名法”的叙述，正确的是_B_。A.一个细菌有两个名字B.细菌的名称由属名和种名构成。C.细菌的名称用拉丁文或英文表示D.细菌的名称均采用小写1.细菌在与外界进行物质交换时，需要消耗能量的物质转运方式是CD。A.单纯扩散B.促进扩散C.主动输送D.基团转位2.下列关于微生物的说法，正确的有ABCD。A个体微小B分布广泛C结构简单D繁殖快3.能形成芽胞的细菌有_AD_。A.炭疽杆菌B.沙门氏菌C.丹毒杆菌D.魏氏梭菌4.具有抗酸染色特性的细菌是_AB_。A副结核分枝杆菌B牛分枝杆菌C金黄色葡萄球菌D丹毒杆菌5.支原体感染可能引起的疾病有_BC_。A.禽霍乱B.猪喘气病C.鸡慢性呼吸道病D.猪肺疫1.显微镜的发明人是（A）AAntonyVanLeeuwenhoekBLuisPasteurCJosephListerDRobertKoch2下列何种物质能使细菌的细胞壁缺失，形成L型细菌（A）A青霉素B链霉素C氨基酸D乳糖3细菌革兰氏染色法的发明人是（A）AGramBKochCPasteur4一个细菌芽胞重新形成细菌繁殖体的数目是（A）A一个B二个C三个D四个5病毒的繁殖方式是（D）A有丝分裂AB二分裂法C出芽繁殖D复制方式6研究细菌的形态与染色特性，通常采用下列生长期的细菌（B）A迟缓期B对数生长期C稳定期D衰老期7下列何种细菌在葡萄糖血清琼脂上可形成勋章样菌落（D）A大肠杆菌B炭疽杆菌C巴氏杆菌D魏氏梭菌8以溴麝香草酚兰作指示剂的糖发酵试验，结果为阳性时，其培养基的颜色变化为（C）A红黄B兰红C兰黄D黄兰9口蹄疫病毒的主要特性之一是（B）。A不易发生变异B易发生变异C一般不易变异10构成五聚体的免疫蛋白是（B）AIgDBIgGCIgADIgMEIgE一名词解释（每小题2分共20分）1质粒：2亚单位疫苗：3大肠杆菌指数：4SPF动物：5S-R变异：6抗体：7凝集反应：8细胞免疫：9类毒1质粒：2亚单位疫苗：3大肠杆菌指数：4SPF动物：5S-R变异：6抗体：7凝集反应：8细胞免疫：9类毒素10人工自动天然被动免疫二填空题（每小题2分共20分）1微生物学的发展历史可概括为三个阶段，即2细菌的基本形态是、三大类。、，并据此将细菌分为、3郭霍（KOCH）对微生物学的重大贡献是4多杀性巴氏杆菌可引禽霍乱,猪的，牛的等。5免疫细胞主要包括N细胞、NK细胞等。6细菌的繁殖方式一般为病毒的繁殖方式为。，真菌的繁殖方式为，7微生物的变异现象主要表现有四个方面。8中枢免疫器官包括，外周免疫器官包括。9正常免疫反应包括。10微生物的营养要求包括等物质。三选择题（每题1分共10分）1微生物是最小生物的总称，但不包括（D）A螺旋体B立克次氏体C衣原体D原虫2微生物学的创始人是（A）AAntonyVanLeeuwenhoekBLuisPasteurCJosephListerDRobertKoch3测定细菌大小的常用单位是（B）AnmBmCmmDpm4芽胞的形成是细菌的（A）A休眠结构B繁殖形式C某一发育阶段5霉形体是介于下述两类生物之间的微生物（C）A原虫和细菌B细菌和真菌C细菌和病毒D立克次氏体于病毒6某一细菌能发酵葡萄糖产酸产气，可记录为（D）A+B-C±D7一般病原菌生长所需要的渗透压是（C）A高渗B低渗C等渗8瘤胃内微生物的种类主要是（C）A细菌B纤毛虫C细菌纤毛虫D病毒9高压灭菌压力达15磅/时2（1.02kg/cm2），灭菌温度为（B）A100B121.3C125D13110抗原抗体反应的可见阶段是（）A第一阶段B第二阶段C两阶段都可以四问答题（共50分）1细菌对某些药物的敏感性与细胞壁的化学结构有何关系？（10分）2叙述细菌生长与繁殖的条件。（10分）3抗原与抗体反应的一般规律（10分）4叙述抗传染免疫的类型和特点。（10分）5叙述三种细菌性传染病的病原微生物名称、染色特性和诊断要点（每种传染病1-2个方法）。-