离心机及rpm单位与g单位的换算介绍.docx
关于离心机及rpm单位与g (RCF)单位的换算离心就是采用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,加快液体中颗粒的沉降速度, 把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分别开。所以需要采用离心机产生强大的离心力, 才能迫使这些微粒克服集中产生沉降运动。当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时,由于重力场的作用使得悬浮的颗粒渐渐下沉。 粒子越重,下沉越快,反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度与微 粒的大小、形态和密度有关,并且又与重力场的强度及液体的粘度有关。象红血球大小的颗 粒,直径为数微米,就可以在通常重力作用下观看到它们的沉降过程。止匕外,物质在介质中沉降时还伴随有集中现象。集中是无条件的肯定的。集中与物质的 质量成反比,颗粒越小集中越严峻。而沉降是相对的,有条件的,要受到外力才能运动。沉 降与物体重量成正比,颗粒越大沉降越快。对小于几微米的微粒如病毒或蛋白质等,它们在 溶液中成胶体或半胶体状态,仅仅采用重力是不行能观看到沉降过程的。由于颗粒越小沉降 越慢,而集中现象则越严峻。所以需要采用离心机产生强大的离心力,才能迫使这些微粒克 服集中产生沉降运动。离心技术在生物科学,特殊是在生物化学和分子生物学讨论领域,已得到非常广泛的应 用,每个生物化学和分子生物学试验室都要装备多种型式的离心机。离心技术主要用于各种 生物样品的分别和制备,生物样品悬浮液在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的 微小颗粒(细胞器、生物大分子的沉淀等)以肯定的速度沉降,从而与溶液得以分别,而沉 降速度取决于颗粒的质量、大小和密度。基本原理:当一个粒子(生物大分子或细胞器)在高速旋转下受到离心力作用时、此离心力 由下式定义,即:F = m&S226;a = m&S226; 2 r a 一粒子旋转的加速度,m 一沉降粒子的有效质量,3 一粒 子旋转的角速度,r一粒子的旋转半径(cm)。通常离心力常用地球引力的倍数来表示,因而称为相对离心力“RCF”。或者用数字乘“g” 来表示,例如25000Xg,则表示相对离心力为25000。相对离心力是指在离心场中,作用于 颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度“g” (980cm/sec2),此时“RCF” 相对离心力可用下式计算:RCF= 1.1A19X10-5X(rpm)2 r(rpm revolutions per minute 每分钟转数,r/min )由上式可见,只要给出旋转半径r,则RCF和rpm之间可以相互换算。但是由于转头的外 形及结构的差异,使每台离心机的离心管,从管口至管底的各点与旋转轴之间的距离是不一 样的,所以在计算是规定旋转半径均用平均半径“rav”代替: ra v=( r min + rmax) / 2一般状况下,低速离心时常以转速“rpm”来表示,高速离心时则以“g”表示。计算颗粒 的相对离心力时,应留意离心管与旋转轴中心的距离“r”不同,即沉降颗粒在离心管中所 处位置不同,则所受离心力也不同。因此在报告超离心条件时,通常总是用地心引力的倍数 “Xg”代替每分钟转数“rpm”,由于它可以真实地反映颗粒在离心管内不同位置的离心力 及其动态变化。科技文献中离心力的数据通常是指其平均值(RCFav),即离心管中点的离 心力。单住rpm与g的换算:Centrifugal force conversionrpm h 1rpm h 1JRCF/Ll 2rRCF . U2r(rpm/1rpm . revolutions per minute RCF ' relative centrifugal force (x g) r , radius of rotor in mm离心机可分为工业用离心机和试验用离心机。试验用离心机又分为制备性离心机和分析性离 心机,制备性离心机主要用于分别各种生物材料,每次分别的样品容量比较大,分析性离心 机一般都带有光学系统,主要用于讨论纯的生物大分子和颗粒的理化性质,依据待测物质在 离心场中的行为(用离心机中的光学系统连续监测),能推断物质的纯度、外形和分子量等。 分析性离心机都是超速离心机。制备性离心机可分为三类:一般离心机:最大转速6000 rpm左右,最大相对离心力近6000Xg,容量为几十毫升至 几升,分别形式是固液沉降分别,转子有角式和外摆式,其转速不能严格掌握,通常不带冷 冻系统,于室温下操作,用于收集易沉降的大颗粒物质,如红血球、酵母细胞等。这种离心 机多用沟通整流子电动机驱动,电机的碳刷易磨损,转速是用电压调压器调整,起动电流大, 速度升降不匀称,一般转头是置于一个硬质钢轴上,因此精确地平衡离心管及内容物就极为 重要,否则会损坏禺心机。高速冷冻离心机:最大转速为2000025000rpm (r/min),最大相对离心力为89000Xg, 最大容量可达3升,分别形式也是固液沉降分别,转头配有各种角式转头、荡平式转头、区 带转头、垂直转头和大容量连续流淌式转头、一般都有制冷系统,以消退高速旋转转头与空 气之间摩擦而产生的热量,离心室的温度可以调整和维持在。40,转速、温度和时间都 可以严格精确地掌握,并有指针或数字显示,通常用于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、硫钱沉淀和免疫沉淀物等的分别纯化工作,但不能有效地沉降病毒、小细胞器(如 核蛋白体)或单个分子。超速离心机:转速可达5000080000 rpm,相对离心力最大可达510000Xg,最闻名的 生产厂商有美国的贝克曼公司和日本的日立公司等,离心容量由几十毫升至2升,分别的形 式是差速沉降分别和密度梯度区带分别,离心管平衡允许的误差要小于0.1克。超速离心机 的消失,使生物科学的讨论领域有了新的扩展,它能使过去仅仅在电子显微镜观看到的亚细 胞器得到分级分别,还可以分别病毒、核酸、蛋白质和多糖等。